| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 第一章 引言 | 第10-20页 |
| 1 小麦赤霉病简述 | 第10-11页 |
| 2 禾谷镰刀菌研究概况 | 第11-13页 |
| 2.1 禾谷镰刀菌的类型及特征 | 第11页 |
| 2.2 禾谷镰刀菌的寄主范围 | 第11页 |
| 2.3 禾谷镰刀菌的侵染循环过程 | 第11-13页 |
| 2.4 赤霉病抗性品种的培育 | 第13页 |
| 3 Bax inhibitor-1(BI-1)的研究概述 | 第13-18页 |
| 3.1 真菌的细胞程序性死亡(apoptotic-like programmed cell death) | 第13-14页 |
| 3.2 BI-1蛋白结构与功能 | 第14-15页 |
| 3.3 哺乳动物中的BI-1蛋白 | 第15-16页 |
| 3.4 植物中的BI-1蛋白 | 第16-18页 |
| 3.5 真菌中的BI-1蛋白 | 第18页 |
| 4 禾谷镰刀菌中BI-1蛋白的研究意义 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-29页 |
| 1 实验材料 | 第20-21页 |
| 1.1 供试菌株 | 第20页 |
| 1.2 供试植物 | 第20页 |
| 1.3 常用培养基(1L) | 第20页 |
| 1.4 抗生素 | 第20-21页 |
| 1.5 常用生化试剂 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-29页 |
| 2.1 禾谷镰刀菌中BI-1同源蛋白的生物信息学分析 | 第21-22页 |
| 2.1.1 禾谷镰刀菌BI-1同源蛋白序列的获得 | 第21页 |
| 2.1.2 禾谷镰刀菌BI-1同源蛋白的结构域预测 | 第21页 |
| 2.1.3 禾谷镰刀菌BI-1氨基酸序列同源性分析 | 第21-22页 |
| 2.2 供试载体的构建 | 第22-23页 |
| 2.2.1 引物设计与PCR扩增 | 第22页 |
| 2.2.2 PCR产物回收 | 第22页 |
| 2.2.3 扩增产物的TA克隆 | 第22页 |
| 2.2.4 质粒的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.5 质粒的酶切与连接 | 第23页 |
| 2.2.6 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备及转化 | 第23页 |
| 2.3 禾谷镰刀菌目的基因的敲除 | 第23-26页 |
| 2.3.1 禾谷镰刀菌基因敲除原理 | 第23-24页 |
| 2.3.2 禾谷镰刀菌原生质体的制备和转化 | 第24-25页 |
| 2.3.3 禾谷镰刀菌基因组DNA的粗提 | 第25页 |
| 2.3.4 Southern杂交 | 第25页 |
| 2.3.5 禾谷镰刀菌菌丝体total RNA的提取及检测 | 第25-26页 |
| 2.3.6 反转录PCR (RT-PCR) | 第26页 |
| 2.4 禾谷镰刀菌菌落生长速度测定 | 第26页 |
| 2.5 禾谷镰刀菌产孢量测定 | 第26-27页 |
| 2.6 禾谷镰刀菌孢子萌发率测定 | 第27页 |
| 2.7 禾谷镰刀菌有性交配鉴定 | 第27页 |
| 2.8 禾谷镰刀菌DON毒素测定 | 第27页 |
| 2.9 禾谷镰刀菌致病力分析 | 第27-28页 |
| 2.10 不同胁迫环境下孢子死亡率统计 | 第28页 |
| 2.11 酵母互补实验 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-41页 |
| 1 禾谷镰刀菌FgBI-I基因的序列分析 | 第29-30页 |
| 2 FgBI-1基因缺失突变体的获得 | 第30-31页 |
| 3 禾谷镰刀菌FgBI-1基因缺失突变体的表型分析 | 第31-41页 |
| 3.1 FgBI-1基因的缺失不影响禾谷镰刀菌的生长发育及其致病性 | 第31-36页 |
| 3.1.1 FgBI-1基因缺失突变体的菌落生长形态 | 第31-32页 |
| 3.1.2 FgBI-1基因缺失突变体的产孢量及孢子形态 | 第32-33页 |
| 3.1.3 FgBI-1基因缺失突变体孢子的萌发率测定 | 第33页 |
| 3.1.4 FgBI-1基因缺失突变体的有性生殖观察 | 第33-34页 |
| 3.1.5 FgBI-1基因缺失突变体DON毒素测定 | 第34-35页 |
| 3.1.6 FgBI-1基因缺失突变体致病力分析 | 第35-36页 |
| 3.1.7 FgBI-1基因的亚细胞定位 | 第36页 |
| 3.2 FgBI-1基因的凋亡功能初探 | 第36-41页 |
| 3.2.1 DTT和Farnesol对FgBI-1基因表达量的影响 | 第37-38页 |
| 3.2.2 FgBI-1基因缺失突变体在不同胁迫下的菌落生长 | 第38-39页 |
| 3.2.3 DTT和高温诱导下的孢子死亡率统计 | 第39页 |
| 3.2.4 FgBI-1基因的酵母异源互补 | 第39-41页 |
| 第四章 讨论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-52页 |
| 附录 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
