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金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺纤维化分子机制与PI3K/Akt信号通路在乳腺纤维化的研究

摘要第4-6页
abstract第6-7页
1 引言第21-36页
    1.1 S.aureus引起奶牛乳腺炎的现状第21-24页
        1.1.1 奶牛乳腺炎的原因第21页
        1.1.2 S.aureus的致病作用第21-23页
        1.1.3 S.aureus与奶牛乳腺炎第23页
        1.1.4 S.aureus诱导乳腺炎模型的研究第23-24页
    1.2 组织器官纤维化实验动物模型的研究现状第24-27页
        1.2.1 组织器官纤维化第24-25页
        1.2.3 肝肺纤维化模型的研究第25-27页
    1.3 TGF-β1、bFGF、PDGF-BB及其相应受体在组织器官纤维化中的作用第27-31页
        1.3.1 TGF-β1和TβRⅠ在纤维化中的作用第27-29页
        1.3.2 bFGF和FGFR2在纤维化中的作用第29-30页
        1.3.3 PDGF-BB和PDGFRβ在纤维化中的作用第30-31页
    1.4 信号通路在组织器官纤维化中的研究进展第31-36页
        1.4.1 TLRs信号通路在组织器官纤维化中的研究进展第31-33页
        1.4.2 NF-κB信号通路在组织器官纤维化中的研究进展第33-34页
        1.4.3 AP-1信号通路在组织器官纤维化中的研究进展第34-35页
        1.4.4 PI3K/Akt信号通路在组织器官纤维化中的研究进展第35-36页
    1.5 研究的目的和意义第36页
2 奶牛乳腺炎和乳腺纤维化自然病例中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF的表达分布第36-43页
    2.1 材料第36-37页
        2.1.1 试验材料第36-37页
        2.1.2 主要试剂第37页
        2.1.3 主要仪器与设备第37页
    2.2 方法第37-39页
        2.2.1 自然病例奶牛乳腺组织的病理学观察第37-38页
        2.2.2 S.aureus的分离与鉴定第38页
        2.2.3 免疫组化法检测自然病例奶牛乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB、bFGF的表达定位第38-39页
    2.3 切片观察与处理第39页
    2.4 结果第39-41页
        2.4.1 自然病例奶牛乳腺炎乳腺组织病理变化第39-40页
        2.4.3 自然病例奶牛乳腺炎乳腺组织的细菌分离结果第40页
        2.4.4 自然病例乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF的免疫组化结果第40-41页
    2.5 讨论第41-42页
    2.6 小结第42-43页
3 奶牛乳腺炎S.aureus诱导小鼠乳腺纤维化模型的建立第43-49页
    3.1 材料第43页
        3.1.1 S.aureus第43页
        3.1.2 实验动物及动物福利第43页
        3.1.3 主要试剂第43页
        3.1.4 主要仪器第43页
    3.2 方法第43-44页
        3.2.1 S.aureus菌液的制备第43-44页
        3.2.2 小鼠乳腺纤维化模型的建立第44页
    3.3 切片观察与处理第44页
    3.4 结果第44-48页
        3.4.1 小鼠临床症状观察第44-45页
        3.4.2 病理组织学观察第45-48页
    3.5 讨论第48-49页
    3.6 小结第49页
4 奶牛乳腺炎S.aureus对小鼠乳腺纤维化模型中TGF-β1、PDGF-BB、bFGF及其受体表达的影响第49-81页
    4.1 材料第49-50页
        4.1.1 S.aureus第49页
        4.1.2 实验动物第49页
        4.1.3 主要试剂第49-50页
        4.1.4 主要设备第50页
    4.2 方法第50-55页
        4.2.1 10~8 cfu/mLS.aureus感染小鼠实验分组第50-51页
        4.2.2 小鼠乳腺病理组织学观察第51页
        4.2.3 应用免疫组化染色检测小鼠乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF与受体的表达分布第51页
        4.2.4 应用qPCR法检测小鼠乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF与受体mRNA的相对表达第51-53页
        4.2.5 应用Westernblot法检测小鼠乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF与受体蛋白的相对表达第53-55页
    4.3 数据分析与处理第55页
    4.4 结果第55-79页
        4.4.1 10~8 cfu/mLS.aureus感染小鼠乳腺的病理组织学观察结果第55-57页
        4.4.2 小鼠乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF及其受体的表达分布第57-62页
        4.4.3 奶牛乳腺炎S.aureus对小鼠乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF及其受体表达的影响第62-79页
    4.5 讨论第79-81页
    4.6 小结第81页
5 TLRs/NF-κB和TLRs/AP-1信号通路在奶牛乳腺炎S.aureus诱导小鼠乳腺纤维化中的作用第81-102页
    5.1 材料第81-82页
        5.1.1 S.aureus第81页
        5.1.2 实验动物第81页
        5.1.3 主要试剂第81-82页
        5.1.4 主要仪器第82页
    5.2 方法第82-83页
        5.2.2 应用qPCR法检测TLR2、TLR4、α-SMA、COLIα1mRNA的相对表达水平第82-83页
        5.2.3 应用Westernblot法检测TLR2、TLR4、α-SMA、COLIα1蛋白表达水平及NF-κBp65、AP-1c-jun蛋白磷酸化和非磷酸化水平第83页
    5.3 数据分析与处理第83页
    5.4 结果第83-100页
        5.4.1 小鼠乳腺组织中TLR2、TLR4、α-SMA、COLIα1表达的结果第83-95页
        5.4.2 S.aureus对小鼠乳腺组织中NF-κBp65蛋白表达的影响第95-97页
        5.4.3 S.aureus对小鼠乳腺组织中AP-1c-jun蛋白表达的影响第97-100页
    5.5 讨论第100-102页
    5.6 小结第102页
6 PI3K/Akt信号通路在乳腺纤维化中的研究第102-140页
    6.1 材料第102-103页
        6.1.1 奶牛乳腺成纤维细胞第102页
        6.1.2 主要试剂第102-103页
        6.1.3 主要设备第103页
    6.2 方法第103-110页
        6.2.1 TGF-β1、PDGF-BB、bFGF细胞处理液的制备第103-104页
        6.2.2 TGF-β1、PDGF-BB、bFGF作用乳腺成纤维细胞后对PI3K和AKT表达的影响第104-107页
        6.2.3 不同浓度的LY294002抑制剂,对奶牛乳腺成纤维细胞中p-Akt蛋白表达的影响第107-108页
        6.2.4 LY294002抑制剂作用后,TGF-β1、bFGF、PDGF-BB对乳腺成纤维细胞中α-SMA和COLⅠα1表达的影响第108-110页
    6.3 数据分析与处理第110页
    6.4 结果第110-139页
        6.4.1 TGF-β1、bFGF、PDGF-BB对乳腺成纤维细胞后PI3K和Akt表达的影响第110-116页
        6.4.2 不同浓度的LY294002抑制剂对奶牛乳腺成纤维细胞中p-Akt蛋白表达的影响第116-117页
        6.4.3 抑制剂LY294002作用后,TGF-β1、bFGF、PDGF-BB对乳腺成纤维细胞中α-SMA和COLⅠα1表达的影响第117-139页
    6.5 讨论第139-140页
    6.6 小结第140页
7 全文讨论第140-142页
8 全文结论第142-143页
9 创新点第143-145页
致谢第145-146页
参考文献第146-160页
作者简介第160页

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