摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第21-36页 |
1.1 S.aureus引起奶牛乳腺炎的现状 | 第21-24页 |
1.1.1 奶牛乳腺炎的原因 | 第21页 |
1.1.2 S.aureus的致病作用 | 第21-23页 |
1.1.3 S.aureus与奶牛乳腺炎 | 第23页 |
1.1.4 S.aureus诱导乳腺炎模型的研究 | 第23-24页 |
1.2 组织器官纤维化实验动物模型的研究现状 | 第24-27页 |
1.2.1 组织器官纤维化 | 第24-25页 |
1.2.3 肝肺纤维化模型的研究 | 第25-27页 |
1.3 TGF-β1、bFGF、PDGF-BB及其相应受体在组织器官纤维化中的作用 | 第27-31页 |
1.3.1 TGF-β1和TβRⅠ在纤维化中的作用 | 第27-29页 |
1.3.2 bFGF和FGFR2在纤维化中的作用 | 第29-30页 |
1.3.3 PDGF-BB和PDGFRβ在纤维化中的作用 | 第30-31页 |
1.4 信号通路在组织器官纤维化中的研究进展 | 第31-36页 |
1.4.1 TLRs信号通路在组织器官纤维化中的研究进展 | 第31-33页 |
1.4.2 NF-κB信号通路在组织器官纤维化中的研究进展 | 第33-34页 |
1.4.3 AP-1信号通路在组织器官纤维化中的研究进展 | 第34-35页 |
1.4.4 PI3K/Akt信号通路在组织器官纤维化中的研究进展 | 第35-36页 |
1.5 研究的目的和意义 | 第36页 |
2 奶牛乳腺炎和乳腺纤维化自然病例中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF的表达分布 | 第36-43页 |
2.1 材料 | 第36-37页 |
2.1.1 试验材料 | 第36-37页 |
2.1.2 主要试剂 | 第37页 |
2.1.3 主要仪器与设备 | 第37页 |
2.2 方法 | 第37-39页 |
2.2.1 自然病例奶牛乳腺组织的病理学观察 | 第37-38页 |
2.2.2 S.aureus的分离与鉴定 | 第38页 |
2.2.3 免疫组化法检测自然病例奶牛乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB、bFGF的表达定位 | 第38-39页 |
2.3 切片观察与处理 | 第39页 |
2.4 结果 | 第39-41页 |
2.4.1 自然病例奶牛乳腺炎乳腺组织病理变化 | 第39-40页 |
2.4.3 自然病例奶牛乳腺炎乳腺组织的细菌分离结果 | 第40页 |
2.4.4 自然病例乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF的免疫组化结果 | 第40-41页 |
2.5 讨论 | 第41-42页 |
2.6 小结 | 第42-43页 |
3 奶牛乳腺炎S.aureus诱导小鼠乳腺纤维化模型的建立 | 第43-49页 |
3.1 材料 | 第43页 |
3.1.1 S.aureus | 第43页 |
3.1.2 实验动物及动物福利 | 第43页 |
3.1.3 主要试剂 | 第43页 |
3.1.4 主要仪器 | 第43页 |
3.2 方法 | 第43-44页 |
3.2.1 S.aureus菌液的制备 | 第43-44页 |
3.2.2 小鼠乳腺纤维化模型的建立 | 第44页 |
3.3 切片观察与处理 | 第44页 |
3.4 结果 | 第44-48页 |
3.4.1 小鼠临床症状观察 | 第44-45页 |
3.4.2 病理组织学观察 | 第45-48页 |
3.5 讨论 | 第48-49页 |
3.6 小结 | 第49页 |
4 奶牛乳腺炎S.aureus对小鼠乳腺纤维化模型中TGF-β1、PDGF-BB、bFGF及其受体表达的影响 | 第49-81页 |
4.1 材料 | 第49-50页 |
4.1.1 S.aureus | 第49页 |
4.1.2 实验动物 | 第49页 |
4.1.3 主要试剂 | 第49-50页 |
4.1.4 主要设备 | 第50页 |
4.2 方法 | 第50-55页 |
4.2.1 10~8 cfu/mLS.aureus感染小鼠实验分组 | 第50-51页 |
4.2.2 小鼠乳腺病理组织学观察 | 第51页 |
4.2.3 应用免疫组化染色检测小鼠乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF与受体的表达分布 | 第51页 |
4.2.4 应用qPCR法检测小鼠乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF与受体mRNA的相对表达 | 第51-53页 |
4.2.5 应用Westernblot法检测小鼠乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF与受体蛋白的相对表达 | 第53-55页 |
4.3 数据分析与处理 | 第55页 |
4.4 结果 | 第55-79页 |
4.4.1 10~8 cfu/mLS.aureus感染小鼠乳腺的病理组织学观察结果 | 第55-57页 |
4.4.2 小鼠乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF及其受体的表达分布 | 第57-62页 |
4.4.3 奶牛乳腺炎S.aureus对小鼠乳腺组织中TGF-β1、PDGF-BB和bFGF及其受体表达的影响 | 第62-79页 |
4.5 讨论 | 第79-81页 |
4.6 小结 | 第81页 |
5 TLRs/NF-κB和TLRs/AP-1信号通路在奶牛乳腺炎S.aureus诱导小鼠乳腺纤维化中的作用 | 第81-102页 |
5.1 材料 | 第81-82页 |
5.1.1 S.aureus | 第81页 |
5.1.2 实验动物 | 第81页 |
5.1.3 主要试剂 | 第81-82页 |
5.1.4 主要仪器 | 第82页 |
5.2 方法 | 第82-83页 |
5.2.2 应用qPCR法检测TLR2、TLR4、α-SMA、COLIα1mRNA的相对表达水平 | 第82-83页 |
5.2.3 应用Westernblot法检测TLR2、TLR4、α-SMA、COLIα1蛋白表达水平及NF-κBp65、AP-1c-jun蛋白磷酸化和非磷酸化水平 | 第83页 |
5.3 数据分析与处理 | 第83页 |
5.4 结果 | 第83-100页 |
5.4.1 小鼠乳腺组织中TLR2、TLR4、α-SMA、COLIα1表达的结果 | 第83-95页 |
5.4.2 S.aureus对小鼠乳腺组织中NF-κBp65蛋白表达的影响 | 第95-97页 |
5.4.3 S.aureus对小鼠乳腺组织中AP-1c-jun蛋白表达的影响 | 第97-100页 |
5.5 讨论 | 第100-102页 |
5.6 小结 | 第102页 |
6 PI3K/Akt信号通路在乳腺纤维化中的研究 | 第102-140页 |
6.1 材料 | 第102-103页 |
6.1.1 奶牛乳腺成纤维细胞 | 第102页 |
6.1.2 主要试剂 | 第102-103页 |
6.1.3 主要设备 | 第103页 |
6.2 方法 | 第103-110页 |
6.2.1 TGF-β1、PDGF-BB、bFGF细胞处理液的制备 | 第103-104页 |
6.2.2 TGF-β1、PDGF-BB、bFGF作用乳腺成纤维细胞后对PI3K和AKT表达的影响 | 第104-107页 |
6.2.3 不同浓度的LY294002抑制剂,对奶牛乳腺成纤维细胞中p-Akt蛋白表达的影响 | 第107-108页 |
6.2.4 LY294002抑制剂作用后,TGF-β1、bFGF、PDGF-BB对乳腺成纤维细胞中α-SMA和COLⅠα1表达的影响 | 第108-110页 |
6.3 数据分析与处理 | 第110页 |
6.4 结果 | 第110-139页 |
6.4.1 TGF-β1、bFGF、PDGF-BB对乳腺成纤维细胞后PI3K和Akt表达的影响 | 第110-116页 |
6.4.2 不同浓度的LY294002抑制剂对奶牛乳腺成纤维细胞中p-Akt蛋白表达的影响 | 第116-117页 |
6.4.3 抑制剂LY294002作用后,TGF-β1、bFGF、PDGF-BB对乳腺成纤维细胞中α-SMA和COLⅠα1表达的影响 | 第117-139页 |
6.5 讨论 | 第139-140页 |
6.6 小结 | 第140页 |
7 全文讨论 | 第140-142页 |
8 全文结论 | 第142-143页 |
9 创新点 | 第143-145页 |
致谢 | 第145-146页 |
参考文献 | 第146-160页 |
作者简介 | 第160页 |