| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第1章 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 RNAi研究概况 | 第12-14页 |
| 1.1.1 RNAi的发现 | 第12-13页 |
| 1.1.2 RNAi的原理 | 第13页 |
| 1.1.3 RNAi的应用 | 第13-14页 |
| 1.2 Argonaute蛋白家族研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 Argonaute蛋白家族 | 第14页 |
| 1.2.2 Argonaute蛋白结构 | 第14-16页 |
| 1.3 小分子RNA | 第16-19页 |
| 1.3.1 siRNA | 第17页 |
| 1.3.2 miRNA | 第17-18页 |
| 1.3.3 piRNA | 第18-19页 |
| 1.4 转录组学研究 | 第19-20页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 昆虫材料 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 主要耗材 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-42页 |
| 2.2.1 总RNA提取 | 第23-25页 |
| 2.2.2 总RNA质控 | 第25-26页 |
| 2.2.3 RT-PCR合成cDNA | 第26-27页 |
| 2.2.4 PCR反应 | 第27-28页 |
| 2.2.5 PCR产物纯化回收 | 第28-32页 |
| 2.2.6 TA克隆 | 第32页 |
| 2.2.7 RACE-ReadycDNA合成 | 第32-35页 |
| 2.2.8 RACEPCR反应 | 第35-38页 |
| 2.2.9 RACE产物的纯化回收 | 第38-39页 |
| 2.2.10 In-Fusion克隆 | 第39页 |
| 2.2.11 实时荧光定量PCR | 第39-41页 |
| 2.2.12 生物信息学及系统进化分析 | 第41-42页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第42-75页 |
| 3.1 引物设计 | 第42-44页 |
| 3.1.1 中间序列引物 | 第42-43页 |
| 3.1.2 RACE引物序列 | 第43页 |
| 3.1.3 实时荧光定量PCR引物序列 | 第43-44页 |
| 3.2 cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第44-52页 |
| 3.2.1 AGO1cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第44-47页 |
| 3.2.2 AGO2cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第47-50页 |
| 3.2.3 AGO3cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第50-52页 |
| 3.3 系统进化分析 | 第52-63页 |
| 3.3.1 AGO1分子进化分析 | 第52-54页 |
| 3.3.2 AGO2分子进化分析 | 第54-56页 |
| 3.3.3 AGO3分子进化分析 | 第56-58页 |
| 3.3.4 Argoanute蛋白家族的分子进化系统分析 | 第58-63页 |
| 3.4 荧光定量PCR结果分析讨论 | 第63-72页 |
| 3.4.1 ago1定量结果分析讨论 | 第63-65页 |
| 3.4.2 ago2定量结果分析讨论 | 第65-67页 |
| 3.4.3 ago3定量结果分析讨论 | 第67-69页 |
| 3.4.4 piwi在不同组织定量结果分析讨论 | 第69-70页 |
| 3.4.5 Argonaute蛋白家族成员在不同组织定量结果分析讨论 | 第70-71页 |
| 3.4.6 Argonaute蛋白家族成员在不同发育时期定量结果分析讨论 | 第71-72页 |
| 3.5 小结 | 第72-75页 |
| 结语 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-90页 |
| 附录 | 第90-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果 | 第95页 |
