| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-17页 |
| 1.1 乙酰胆碱酯酶研究进展 | 第11页 |
| 1.2 乙酰胆碱酯酶基因概述 | 第11-12页 |
| 1.3 转基因植物的研究现状 | 第12-13页 |
| 1.3.1 植物转基因技术概述 | 第12-13页 |
| 1.3.2 转基因植物遗传规律 | 第13页 |
| 1.4 RNAi研究进展 | 第13-15页 |
| 1.4.1 RNAi作用机理 | 第13-14页 |
| 1.4.2 昆虫RNAi导入方法 | 第14-15页 |
| 1.4.3 转基因植物的RNAi作用 | 第15页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第15-16页 |
| 1.6 实验设计与技术路线 | 第16-17页 |
| 第2章 转Haace1基因烟草的获得和分子检测 | 第17-26页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-20页 |
| 2.2.1 农杆菌转化 | 第18页 |
| 2.2.2 农杆菌介导获得再生苗 | 第18-19页 |
| 2.2.3 抗性植株的分子检测 | 第19-20页 |
| 2.2.4 转Haace1基因植株后代遗传规律 | 第20页 |
| 2.3 结果与分析 | 第20-24页 |
| 2.3.1 农杆菌LBA4404的转化 | 第20-21页 |
| 2.3.2 转基因植株的再生 | 第21页 |
| 2.3.3 抗性植株分析 | 第21-23页 |
| 2.3.4 转Haace1基因烟草后代遗传分析 | 第23-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-26页 |
| 第3章 转Haace1基因植株抗虫性分析 | 第26-33页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第26页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第26页 |
| 3.1.2 试剂与仪器 | 第26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-28页 |
| 3.2.1 转基因烟草饲喂实验 | 第26页 |
| 3.2.2 RT-qPCR检测基因沉默效率 | 第26-28页 |
| 3.2.3 叶片咬噬实验 | 第28页 |
| 3.3 结果与分析 | 第28-31页 |
| 3.3.1 棉铃虫总RNA的提取 | 第28页 |
| 3.3.2 转基因叶片饲喂后棉铃虫Haace1基因表达规律 | 第28-29页 |
| 3.3.3 叶片咬噬实验结果 | 第29-31页 |
| 3.4 讨论 | 第31-33页 |
| 第4章 酵母和大肠杆菌dsRNA表达载体的Feeding-basedRNAi分析 | 第33-42页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第33页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第33页 |
| 4.1.2 试剂与仪器 | 第33页 |
| 4.2 实验方法 | 第33-35页 |
| 4.2.1 酵母dsRNA表达体系的建立 | 第33-35页 |
| 4.2.2 昆虫试验 | 第35页 |
| 4.2.3 菌液的制备和处理 | 第35页 |
| 4.2.4 RT-qPCR检测基因沉默效率 | 第35页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第35-40页 |
| 4.3.1 酵母pYES2X-hpRNA-ace1f载体构建 | 第35-38页 |
| 4.3.2 昆虫试验结果 | 第38-40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
