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脂肽高产菌株的ARTP诱变选育、发酵优化及鉴定

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
1 前言第12-22页
    1.1 脂肽的结构和性质第12-14页
        1.1.1 脂肽的结构第12-14页
        1.1.2 脂肽的性质第14页
    1.2 脂肽的应用第14-17页
        1.2.1 在农业方面的应用第14-15页
        1.2.2 在环保方面的应用第15页
        1.2.3 在微生物采油方面的应用第15页
        1.2.4 在功能食品方面的应用第15-16页
        1.2.5 在养殖业饲料抗生素添加剂方面的应用第16页
        1.2.6 在化妆品日化方面的应用第16页
        1.2.7 在特种功能材料方面的应用第16-17页
        1.2.8 在医药方面的应用第17页
    1.3 脂肽的生产方法第17-19页
        1.3.1 微生物发酵法第17-18页
        1.3.2 脂肽的合成菌株第18页
        1.3.3 脂肽生物合成相关基因及脂肽合成酶体系第18页
        1.3.4 脂肽的发酵生产工艺第18-19页
    1.4 脂肽的分离纯化第19-20页
    1.5 本文研究背景依据及内容第20-22页
        1.5.1 研究背景第20页
        1.5.2 研究内容第20-22页
2 材料和方法第22-34页
    2.1 实验材料第22-24页
        2.1.1 菌种第22页
        2.1.2 培养基配方第22页
        2.1.3 主要试剂第22-23页
        2.1.4 主要仪器设备第23-24页
    2.2 实验方法第24-34页
        2.2.1 菌种培养和保藏方法第24-25页
        2.2.2 显微观察菌株的形态第25页
        2.2.3 脂肽的检测方法第25-26页
        2.2.4 ARTP诱变选育第26-27页
        2.2.5 枯草芽孢杆菌合成脂肽类摇瓶发酵优化第27-29页
        2.2.6 脂肽的 ?KTA purifier 10.纯化与LC/MS液质分析第29-30页
        2.2.7 脂肽类冻干粉的MALDI-TOF-MS鉴定第30-34页
3 结果与讨论第34-54页
    3.1 出发菌株的优化实验第34-37页
        3.1.1 碳源、氮源、磷源对出发菌株合成脂肽发酵摇瓶的影响第34-35页
        3.1.2 接种方式对出发菌株合成脂肽发酵摇瓶的影响第35页
        3.1.3 pH、吐温 80、转速、温度对出发菌株合成脂肽发酵摇瓶的影响第35-36页
        3.1.4 谷氨酸钠对出发菌株合成脂肽发酵摇瓶的影响第36-37页
        3.1.5 小结第37页
    3.2 ARTP诱变选育第37-42页
        3.2.1 ARTP诱变处理时间对出发菌株的影响第39-40页
        3.2.2 菌落形态与脂肽表面活性的相关性第40页
        3.2.3 Bacillus Subtilis SF90菌株的遗传稳定性实验第40-41页
        3.2.4 Bacillus Subtilis SF90菌株与出发菌株的比较第41-42页
        3.2.5 小结第42页
    3.3. 金属元素对Bacillus subtilis SF90菌株合成脂肽的影响第42-47页
        3.3.1 金属元素母液的配置第42-43页
        3.3.2 单因素实验第43-44页
        3.3.3 单因素最适浓度的实验结果第44-45页
        3.3.4 微量金属元素的L9(34)正交实验第45-47页
        3.3.5 优化调控培养条件的验证第47页
    3.4 抗生素对Bacillus subtilis SF90菌株发酵过程的影响第47-51页
        3.4.1 测试Bacillus subtilis SF90对抗生素浓度的耐受性第47-48页
        3.4.2 Spec、Gm、Kna对Bacillus subtilis SF90菌株摇瓶发酵的影响第48-49页
        3.4.3 Spec,Gm对Bacillus subtilis SF90菌株摇瓶发酵的影响第49-50页
        3.4.4 Spec,Gm的交互实验对脂肽合成的影响第50-51页
        3.4.5 SEC电镜观察Spec最适浓度下的菌体形态第51页
    3.5 小结第51-52页
    3.6 摇瓶发酵过程生长趋势与 5L罐放大实验第52-54页
4 理化性质与鉴定第54-66页
    4.1 脂肽类生物表面活性剂的理化性质实验第54-56页
    4.2 脂肽的抑菌实验第56-57页
        4.2.1 测试菌株与培养第56页
        4.2.2 实验方法与结果第56-57页
    4.3 脂肽的鉴定第57-64页
        4.3.1 脂肽的 ?KTA purifier 10.分离纯化第57-58页
        4.3.2 脂肽的LC-MS实验第58-59页
        4.3.3 脂肽的MALDI-TOF-MS实验第59-64页
    4.4 小结第64-66页
5 结论与创新第66-68页
6 展望第68-70页
参考文献第70-77页
致谢第77-79页

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