摘要 | 第4-8页 |
ABSTRACT | 第8-12页 |
目录 | 第13-16页 |
符号说明 | 第16-17页 |
1 绪论 | 第17-20页 |
2 ABRA在大鼠中枢神经系统的分布及定位 | 第20-38页 |
2.1 材料与方法 | 第20-28页 |
2.1.1 试剂及设备 | 第20-23页 |
2.1.2 实验动物分组 | 第23页 |
2.1.3 取材、保存与切片 | 第23页 |
2.1.4 ABRA、α-actinin、F-actin和NeuN的免疫荧光染色 | 第23-24页 |
2.1.5 RT-PCR | 第24-25页 |
2.1.6 蛋白质免疫印迹(western blot) | 第25-27页 |
2.1.7 结果观察 | 第27页 |
2.1.8 数据分析 | 第27-28页 |
2.2 实验结果 | 第28-36页 |
2.2.1 ABRA在大鼠大脑皮质的表达 | 第28页 |
2.2.2 ABRA在大鼠海马区的表达 | 第28页 |
2.2.3 ABRA在大鼠基底节区的表达 | 第28-29页 |
2.2.4 ABRA在大鼠小脑的表达 | 第29页 |
2.2.5 ABRA在大鼠脊髓的表达 | 第29页 |
2.2.6 结果特异性的鉴定 | 第29-36页 |
2.3 讨论 | 第36-38页 |
2.3.1 结果的特异性 | 第36页 |
2.3.2 ABRA在中枢神经系统的分布 | 第36-38页 |
3 ABRA在不同年龄阶段大鼠大脑皮质、海马、脊髓的表达变化 | 第38-53页 |
3.1 材料和方法 | 第38-41页 |
3.1.1 试剂及设备 | 第38-40页 |
3.1.2 实验动物分组及动物模型 | 第40页 |
3.1.3 取材、保存与切片 | 第40页 |
3.1.4 ABRA、NeuN的免疫荧光染色 | 第40-41页 |
3.1.5 Western blot检测ABRA在不同年龄大鼠大脑皮质、海马与脊髓的表达 | 第41页 |
3.1.6 结果观察 | 第41页 |
3.1.7 数据分析 | 第41页 |
3.2 实验结果 | 第41-51页 |
3.2.1 ABRA在不同年龄阶段大鼠大脑皮质的表达变化 | 第41-42页 |
3.2.2 ABRA在不同年龄阶段大鼠海马的表达变化 | 第42页 |
3.2.3 ABRA在不同年龄阶段脊髓中的表达变化 | 第42-51页 |
3.3 讨论 | 第51-53页 |
3.3.1 不同年龄阶段大鼠大脑皮质和海马中ABRA的表达变化 | 第51页 |
3.3.2 不同年龄阶段脊髓中ABRA的表达变化 | 第51-53页 |
4 shRNA干扰ABRA对大鼠原代培养海马神经元突起生长的影响 | 第53-74页 |
4.1 材料和方法 | 第53-62页 |
4.1.1 实验试剂、材料和设备 | 第53-56页 |
4.1.2 主要溶液配制 | 第56页 |
4.1.3 原代SD胎鼠海马神经元培养 | 第56-57页 |
4.1.4 海马神经元鉴定 | 第57-58页 |
4.1.5 shRNA设计与合成 | 第58页 |
4.1.6 化学合成shRNA阳离子脂质体法转染原代培养的大鼠海马神经元 | 第58-59页 |
4.1.7 转染荧光对照shRNA测定转染效率 | 第59页 |
4.1.8 荧光定量PCR检测干扰效率 | 第59-61页 |
4.1.9 Western blot检测干扰效率 | 第61页 |
4.1.10 结果观察 | 第61页 |
4.1.11 统计学分析 | 第61-62页 |
4.2 实验结果 | 第62-70页 |
4.2.1 海马神经元的培养与鉴定 | 第62页 |
4.2.2 ABRA在海马神经元的表达与定位 | 第62-63页 |
4.2.3 免疫荧光对照shRNA测定转染效率 | 第63页 |
4.2.4 细胞转染shRNA后各组ABRA mRNA表达水平 | 第63页 |
4.2.5 细胞转染shRNA后各组ABRA蛋白表达水平 | 第63-64页 |
4.2.6 细胞转染shRNA后各组神经元形态与轴突长度、树突总长度、分支点密度的变化 | 第64-70页 |
4.3 讨论 | 第70-74页 |
4.3.1 SD胎鼠原代海马神经元的分离培养 | 第70-71页 |
4.3.2 shRNA转染方法的探讨 | 第71-72页 |
4.3.3 ABRA对大鼠海马神经元突起生长的调节 | 第72-74页 |
5 结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-82页 |
综述 | 第82-104页 |
参考文献 | 第95-104页 |
攻读学位期间主要的研究成果目录 | 第104-105页 |
致谢 | 第105页 |