摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第一章 绪论 | 第10-28页 |
1.1 核酸适配体及其在肿瘤细胞检测中的应用 | 第10-14页 |
1.1.1 核酸适配体概述 | 第10-11页 |
1.1.2 核酸适配体在肿瘤细胞检测中的应用 | 第11-14页 |
1.2 常见核酸等温扩增技术及其应用 | 第14-23页 |
1.2.1 环介导的核酸等温扩增技术(LAMP) | 第14-19页 |
1.2.2 等温指数扩增技术(EXPAR) | 第19-22页 |
1.2.3 滚环扩增技术(RCA)及其应用 | 第22-23页 |
1.3 检测急性淋巴白血病细胞的重要性和常规方法 | 第23-25页 |
1.3.1 检测急性淋巴白血病的重要性 | 第24页 |
1.3.2 急性淋巴白血病细胞常规检测办法 | 第24-25页 |
1.4 本文研究内容以及创新性 | 第25-28页 |
第二章 基于核酸适配体的环介导等温扩增(LAMP)法检测CCRF-CEM细胞的研究 | 第28-38页 |
2.1 引言 | 第28-29页 |
2.2 实验部分 | 第29-33页 |
2.2.1 实验材料和仪器 | 第29-31页 |
2.2.2 实验前准备工作 | 第31页 |
2.2.3 细胞培养 | 第31-33页 |
2.3 实验过程 | 第33-34页 |
2.3.1 CCRF-CEM细胞的计数 | 第33页 |
2.3.2 CCRF-CEM细胞与模板链共同孵育 | 第33页 |
2.3.3 清洗掉未被结合上的Aptamer | 第33页 |
2.3.4 梯度稀释 | 第33-34页 |
2.3.5 进行环介导等温扩增(LAMP)反应 | 第34页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第34-37页 |
2.4.1 实验原理 | 第34-35页 |
2.4.2 LAMP反应检测模板链(双茎环DNA链) | 第35页 |
2.4.3 基于核酸适配体等温扩增反应检测CCRF-CEM细胞 | 第35-36页 |
2.4.4 基于核酸适配体等温扩增实验检测CCRF-CEM细胞的干扰性实验 | 第36-37页 |
2.5 实验小结 | 第37-38页 |
第三章 基于磁分离技术的恒温指数扩增(EXPAR)法检测CCRF-CEM的研究 | 第38-56页 |
3.1 前言 | 第38-39页 |
3.2 实验准备部分 | 第39-40页 |
3.2.1 实验材料和仪器设备 | 第39页 |
3.2.2 实验中所需寡核苷酸序列 | 第39-40页 |
3.3 实验方法 | 第40-42页 |
3.3.1 细胞相关知识和细胞计数 | 第40页 |
3.3.2 基于磁分离技术的EXPAR扩增反应的实验过程 | 第40-41页 |
3.3.3 利用荧光成像技术和流式细胞计数技术来验证核酸适配体sgc8c与不同种类的肿瘤细胞之间的结合亲和力 | 第41-42页 |
3.4 实验结果和讨论 | 第42-53页 |
3.4.1 实验原理 | 第42-43页 |
3.4.2 EXPAR扩增反应条件优化及性能分析 | 第43-48页 |
3.4.3 EXPAR反应检测cDNA的线性和灵敏度 | 第48-49页 |
3.4.4 基于磁分离技术的恒温扩增反应检测CCRF-CEM细胞 | 第49-50页 |
3.4.5 基于磁分离技术的恒温扩增反应实验的特异性 | 第50-53页 |
3.5 实验小结 | 第53-56页 |
结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
攻读学位期间成果 | 第70页 |