摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-16页 |
第一章 19–去甲类固醇激素的结构、性能及代谢规律 | 第16-24页 |
·19–去甲类固醇激素的结构特点 | 第17-18页 |
·19–去甲类固醇的医学作用 | 第18-19页 |
·人类医学当中的应用 | 第18页 |
·动物医学当中的应用 | 第18-19页 |
·19-去甲类固醇的副作用 | 第19-20页 |
·19–去甲类固醇的代谢特点 | 第20-23页 |
·外源性代谢研究 | 第20-21页 |
·内源性的证据和研究历程 | 第21-23页 |
·代谢物形式 | 第23页 |
·小结 | 第23-24页 |
第二章 19–去甲类固醇激素检测方法研究进展 | 第24-31页 |
·理化分析方法 | 第24-26页 |
·气相色谱法(GC) | 第24页 |
·高效液相色谱法(HPLC) | 第24-25页 |
·薄层层析法(TLC) | 第25页 |
·毛细管电泳法(CE) | 第25页 |
·气相色谱–质谱法(GC–MS) | 第25-26页 |
·液相色谱-质谱法(LC-MS) | 第26页 |
·免疫学检测方法 | 第26-28页 |
·放射性免疫分析法(RIA) | 第26-27页 |
·酶联免疫检测(ELISA) | 第27页 |
·化学发光免疫检测(CLISA) | 第27页 |
·免疫层析试纸条 | 第27-28页 |
·生物传感器 | 第28页 |
·展望 | 第28-30页 |
·检测物质和体样的选择 | 第28页 |
·检测方法 | 第28-30页 |
·改进LC–MS 和GC–MS 检测的样品处理程序 | 第29页 |
·改进免疫检测试纸条的性能,研制多残留检测试纸条 | 第29页 |
·蛋白芯片技术 | 第29-30页 |
·小结 | 第30-31页 |
第三章 19–去甲睾酮人工抗原合成及免疫学鉴定 | 第31-38页 |
·材料和方法 | 第31-33页 |
·材料与试剂 | 第31页 |
·仪器 | 第31页 |
·方法 | 第31-33页 |
·结果与分析 | 第33-36页 |
·半抗原17β–19–NT 琥珀酸酯质谱图 | 第33页 |
·半抗原核磁共振分析 | 第33页 |
·人工抗原的红外光谱鉴定 | 第33-34页 |
·人工抗原偶联率测定 | 第34页 |
·抗体免疫学特性 | 第34-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
·半抗原改造与蛋白质偶联 | 第36页 |
·NT pAb 特异性 | 第36-37页 |
·小结 | 第37-38页 |
第四章 19–去甲睾酮异源性icELISA 试剂盒的研制及应用 | 第38-51页 |
·材料与方法 | 第38-41页 |
·材料与试剂 | 第38页 |
·仪器设备 | 第38页 |
·人工抗原的合成 | 第38-39页 |
·多克隆抗体的制备 | 第39页 |
·间接ELISA 检测方法 | 第39-40页 |
·间接竞争ELISA(icELISA)检测和标准曲线 | 第40页 |
·理化因素对检测性能的影响 | 第40页 |
·ELISA 试剂盒的配置及应用 | 第40页 |
·NT-Kit 性能检测和优化 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-48页 |
·免疫原紫外图谱鉴定 | 第41页 |
·免疫原红外图谱鉴定 | 第41-42页 |
·抗体筛选和异源性检测方法 | 第42-43页 |
·间接竞争ELISA 标准曲线的建立 | 第43-44页 |
·理化因素对标准曲线的影响 | 第44-46页 |
·NT–Kit 性能检测 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·异源性icELISA 检测方法 | 第48-49页 |
·19-去甲睾酮不同检测方法的比较 | 第49页 |
·小结 | 第49-51页 |
第五章 19–去甲睾酮单克隆抗体的筛选及免疫学检测方法的优化 | 第51-62页 |
·材料与方法 | 第51-54页 |
·材料和试剂 | 第51页 |
·缓冲液 | 第51页 |
·仪器设备 | 第51页 |
·载体蛋白的活化和人工抗原的合成 | 第51-52页 |
·动物免疫 | 第52页 |
·免疫次数对免疫效果的影响 | 第52页 |
·ELISA 检测程序 | 第52页 |
·19-去甲睾酮单克隆抗体的制备 | 第52-53页 |
·ELISA 标准曲线的建立和优化 | 第53页 |
·尿液基质的影响 | 第53页 |
·LC-MS/MS 检测 | 第53-54页 |
·结果与分析 | 第54-59页 |
·不同免疫次数对抗体效价的影响 | 第54页 |
·细胞融合备用鼠的选择 | 第54-55页 |
·NT m Ab 的制备及性能鉴定 | 第55页 |
·杂交瘤稳定性 | 第55页 |
·亲和常数(Ka) | 第55-56页 |
·异源性icELISA 标准曲线的建立 | 第56页 |
·抗体特异性 | 第56-57页 |
·基质效应性 | 第57-58页 |
·LC–MS/MS 检测结果 | 第58-59页 |
·ELISA 与LC–MS/MS 相关性分析 | 第59页 |
·讨论 | 第59-61页 |
·载体蛋白的活化 | 第59页 |
·小鼠强化免疫效果 | 第59-60页 |
·异源性免疫学检测 | 第60页 |
·单克隆抗体的优势 | 第60页 |
·抗体亲和性 | 第60页 |
·特异性 | 第60-61页 |
·小结 | 第61-62页 |
第六章 19–去甲睾酮直接竞争ELISA 检测方法的建立及应用 | 第62-75页 |
·材料与方法 | 第62-65页 |
·试剂和材料 | 第62页 |
·酶标半抗原的合成 | 第62页 |
·ELISA 检测程序 | 第62-63页 |
·单克隆抗体的制备 | 第63页 |
·有机溶剂对标准曲线的影响 | 第63页 |
·样品前处理 | 第63-64页 |
·试剂盒稳定性评估 | 第64页 |
·GC-MS 验证实验 | 第64-65页 |
·结果与分析 | 第65-73页 |
·单克隆抗体的生产与特性 | 第65页 |
·同源和异源检测实验 | 第65-66页 |
·间接竞争(icELISA)和直接竞争(dcELISA)标准曲线 | 第66-68页 |
·抗体特异性(CR) | 第68页 |
·有机溶剂对标准曲线的影响 | 第68-69页 |
·样品前处理方式的选择 | 第69-70页 |
·简单稀释法的验证 | 第70-71页 |
·冻融实验 | 第71页 |
·ELISA 试剂盒的保质期 | 第71-72页 |
·ELISA 与GC-MS 检测的相关性 | 第72-73页 |
·讨论 | 第73页 |
·间接竞争和直接竞争ELISA 检测模式 | 第73页 |
·样品前处理中酶解步骤的探讨 | 第73页 |
·小结 | 第73-75页 |
第七章 19–去甲睾酮胶体金免疫层析试纸条检测方法的建立 | 第75-84页 |
·材料与方法 | 第75-78页 |
·试剂和材料 | 第75页 |
·主要仪器设备 | 第75页 |
·胶体金溶液的制备 | 第75页 |
·金标抗体的制备及条件优化 | 第75-77页 |
·免疫层析试纸条的组装 | 第77页 |
·检测程序和原理 | 第77-78页 |
·待测样品预处理 | 第78页 |
·试纸条检测性能 | 第78页 |
·结果与分析 | 第78-82页 |
·胶体金颗粒的质量 | 第78-79页 |
·金标抗体最佳pH 值的确定 | 第79页 |
·胶体金标记最佳抗体浓度 | 第79页 |
·试纸条灵敏度测试 | 第79-80页 |
·NT-strip 特异性鉴定 | 第80-81页 |
·重复性与稳定性实验 | 第81页 |
·真实样品检测 | 第81-82页 |
·讨论 | 第82-83页 |
·胶体金的制备 | 第82-83页 |
·金标层析试纸的检测原理 | 第83页 |
·小结 | 第83-84页 |
第八章 动物组织中19–去甲睾酮残留GC–MS 检测方法的建立 | 第84-91页 |
·材料与方法 | 第84-85页 |
·试剂、材料和仪器 | 第84页 |
·样品前处理 | 第84页 |
·粗提产物的分离和净化 | 第84-85页 |
·衍生化 | 第85页 |
·GC-MS 分析 | 第85页 |
·GC-MS 检测性能 | 第85页 |
·结果与分析 | 第85-90页 |
·类固醇激素的提取与纯化 | 第85-86页 |
·类固醇激素衍生化 | 第86-87页 |
·定量离子的选择 | 第87-88页 |
·检测方法的评价 | 第88-90页 |
·小结 | 第90-91页 |
结论 | 第91页 |
创新点 | 第91页 |
进一步研究的内容 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-106页 |
致谢 | 第106-107页 |
作者简介 | 第107-108页 |