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19-去甲睾酮免疫学检测方法的建立及应用

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-16页
第一章 19–去甲类固醇激素的结构、性能及代谢规律第16-24页
   ·19–去甲类固醇激素的结构特点第17-18页
   ·19–去甲类固醇的医学作用第18-19页
     ·人类医学当中的应用第18页
     ·动物医学当中的应用第18-19页
   ·19-去甲类固醇的副作用第19-20页
   ·19–去甲类固醇的代谢特点第20-23页
     ·外源性代谢研究第20-21页
     ·内源性的证据和研究历程第21-23页
     ·代谢物形式第23页
   ·小结第23-24页
第二章 19–去甲类固醇激素检测方法研究进展第24-31页
   ·理化分析方法第24-26页
     ·气相色谱法(GC)第24页
     ·高效液相色谱法(HPLC)第24-25页
     ·薄层层析法(TLC)第25页
     ·毛细管电泳法(CE)第25页
     ·气相色谱–质谱法(GC–MS)第25-26页
     ·液相色谱-质谱法(LC-MS)第26页
   ·免疫学检测方法第26-28页
     ·放射性免疫分析法(RIA)第26-27页
     ·酶联免疫检测(ELISA)第27页
     ·化学发光免疫检测(CLISA)第27页
     ·免疫层析试纸条第27-28页
     ·生物传感器第28页
   ·展望第28-30页
     ·检测物质和体样的选择第28页
     ·检测方法第28-30页
       ·改进LC–MS 和GC–MS 检测的样品处理程序第29页
       ·改进免疫检测试纸条的性能,研制多残留检测试纸条第29页
       ·蛋白芯片技术第29-30页
   ·小结第30-31页
第三章 19–去甲睾酮人工抗原合成及免疫学鉴定第31-38页
   ·材料和方法第31-33页
     ·材料与试剂第31页
     ·仪器第31页
     ·方法第31-33页
   ·结果与分析第33-36页
     ·半抗原17β–19–NT 琥珀酸酯质谱图第33页
     ·半抗原核磁共振分析第33页
     ·人工抗原的红外光谱鉴定第33-34页
     ·人工抗原偶联率测定第34页
     ·抗体免疫学特性第34-36页
   ·讨论第36-37页
     ·半抗原改造与蛋白质偶联第36页
     ·NT pAb 特异性第36-37页
   ·小结第37-38页
第四章 19–去甲睾酮异源性icELISA 试剂盒的研制及应用第38-51页
   ·材料与方法第38-41页
     ·材料与试剂第38页
     ·仪器设备第38页
     ·人工抗原的合成第38-39页
     ·多克隆抗体的制备第39页
     ·间接ELISA 检测方法第39-40页
     ·间接竞争ELISA(icELISA)检测和标准曲线第40页
     ·理化因素对检测性能的影响第40页
     ·ELISA 试剂盒的配置及应用第40页
     ·NT-Kit 性能检测和优化第40-41页
   ·结果与分析第41-48页
     ·免疫原紫外图谱鉴定第41页
     ·免疫原红外图谱鉴定第41-42页
     ·抗体筛选和异源性检测方法第42-43页
     ·间接竞争ELISA 标准曲线的建立第43-44页
     ·理化因素对标准曲线的影响第44-46页
     ·NT–Kit 性能检测第46-48页
   ·讨论第48-49页
     ·异源性icELISA 检测方法第48-49页
     ·19-去甲睾酮不同检测方法的比较第49页
   ·小结第49-51页
第五章 19–去甲睾酮单克隆抗体的筛选及免疫学检测方法的优化第51-62页
   ·材料与方法第51-54页
     ·材料和试剂第51页
     ·缓冲液第51页
     ·仪器设备第51页
     ·载体蛋白的活化和人工抗原的合成第51-52页
     ·动物免疫第52页
     ·免疫次数对免疫效果的影响第52页
     ·ELISA 检测程序第52页
     ·19-去甲睾酮单克隆抗体的制备第52-53页
     ·ELISA 标准曲线的建立和优化第53页
     ·尿液基质的影响第53页
     ·LC-MS/MS 检测第53-54页
   ·结果与分析第54-59页
     ·不同免疫次数对抗体效价的影响第54页
     ·细胞融合备用鼠的选择第54-55页
     ·NT m Ab 的制备及性能鉴定第55页
     ·杂交瘤稳定性第55页
     ·亲和常数(Ka)第55-56页
     ·异源性icELISA 标准曲线的建立第56页
     ·抗体特异性第56-57页
     ·基质效应性第57-58页
     ·LC–MS/MS 检测结果第58-59页
     ·ELISA 与LC–MS/MS 相关性分析第59页
   ·讨论第59-61页
     ·载体蛋白的活化第59页
     ·小鼠强化免疫效果第59-60页
     ·异源性免疫学检测第60页
     ·单克隆抗体的优势第60页
     ·抗体亲和性第60页
     ·特异性第60-61页
   ·小结第61-62页
第六章 19–去甲睾酮直接竞争ELISA 检测方法的建立及应用第62-75页
   ·材料与方法第62-65页
     ·试剂和材料第62页
     ·酶标半抗原的合成第62页
     ·ELISA 检测程序第62-63页
     ·单克隆抗体的制备第63页
     ·有机溶剂对标准曲线的影响第63页
     ·样品前处理第63-64页
     ·试剂盒稳定性评估第64页
     ·GC-MS 验证实验第64-65页
   ·结果与分析第65-73页
     ·单克隆抗体的生产与特性第65页
     ·同源和异源检测实验第65-66页
     ·间接竞争(icELISA)和直接竞争(dcELISA)标准曲线第66-68页
     ·抗体特异性(CR)第68页
     ·有机溶剂对标准曲线的影响第68-69页
     ·样品前处理方式的选择第69-70页
     ·简单稀释法的验证第70-71页
     ·冻融实验第71页
     ·ELISA 试剂盒的保质期第71-72页
     ·ELISA 与GC-MS 检测的相关性第72-73页
   ·讨论第73页
     ·间接竞争和直接竞争ELISA 检测模式第73页
     ·样品前处理中酶解步骤的探讨第73页
   ·小结第73-75页
第七章 19–去甲睾酮胶体金免疫层析试纸条检测方法的建立第75-84页
   ·材料与方法第75-78页
     ·试剂和材料第75页
     ·主要仪器设备第75页
     ·胶体金溶液的制备第75页
     ·金标抗体的制备及条件优化第75-77页
     ·免疫层析试纸条的组装第77页
     ·检测程序和原理第77-78页
     ·待测样品预处理第78页
     ·试纸条检测性能第78页
   ·结果与分析第78-82页
     ·胶体金颗粒的质量第78-79页
     ·金标抗体最佳pH 值的确定第79页
     ·胶体金标记最佳抗体浓度第79页
     ·试纸条灵敏度测试第79-80页
     ·NT-strip 特异性鉴定第80-81页
     ·重复性与稳定性实验第81页
     ·真实样品检测第81-82页
   ·讨论第82-83页
     ·胶体金的制备第82-83页
     ·金标层析试纸的检测原理第83页
   ·小结第83-84页
第八章 动物组织中19–去甲睾酮残留GC–MS 检测方法的建立第84-91页
   ·材料与方法第84-85页
     ·试剂、材料和仪器第84页
     ·样品前处理第84页
     ·粗提产物的分离和净化第84-85页
     ·衍生化第85页
     ·GC-MS 分析第85页
     ·GC-MS 检测性能第85页
   ·结果与分析第85-90页
     ·类固醇激素的提取与纯化第85-86页
     ·类固醇激素衍生化第86-87页
     ·定量离子的选择第87-88页
     ·检测方法的评价第88-90页
   ·小结第90-91页
结论第91页
创新点第91页
进一步研究的内容第91-92页
参考文献第92-106页
致谢第106-107页
作者简介第107-108页

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