| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-16页 |
| 第一章 19–去甲类固醇激素的结构、性能及代谢规律 | 第16-24页 |
| ·19–去甲类固醇激素的结构特点 | 第17-18页 |
| ·19–去甲类固醇的医学作用 | 第18-19页 |
| ·人类医学当中的应用 | 第18页 |
| ·动物医学当中的应用 | 第18-19页 |
| ·19-去甲类固醇的副作用 | 第19-20页 |
| ·19–去甲类固醇的代谢特点 | 第20-23页 |
| ·外源性代谢研究 | 第20-21页 |
| ·内源性的证据和研究历程 | 第21-23页 |
| ·代谢物形式 | 第23页 |
| ·小结 | 第23-24页 |
| 第二章 19–去甲类固醇激素检测方法研究进展 | 第24-31页 |
| ·理化分析方法 | 第24-26页 |
| ·气相色谱法(GC) | 第24页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC) | 第24-25页 |
| ·薄层层析法(TLC) | 第25页 |
| ·毛细管电泳法(CE) | 第25页 |
| ·气相色谱–质谱法(GC–MS) | 第25-26页 |
| ·液相色谱-质谱法(LC-MS) | 第26页 |
| ·免疫学检测方法 | 第26-28页 |
| ·放射性免疫分析法(RIA) | 第26-27页 |
| ·酶联免疫检测(ELISA) | 第27页 |
| ·化学发光免疫检测(CLISA) | 第27页 |
| ·免疫层析试纸条 | 第27-28页 |
| ·生物传感器 | 第28页 |
| ·展望 | 第28-30页 |
| ·检测物质和体样的选择 | 第28页 |
| ·检测方法 | 第28-30页 |
| ·改进LC–MS 和GC–MS 检测的样品处理程序 | 第29页 |
| ·改进免疫检测试纸条的性能,研制多残留检测试纸条 | 第29页 |
| ·蛋白芯片技术 | 第29-30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| 第三章 19–去甲睾酮人工抗原合成及免疫学鉴定 | 第31-38页 |
| ·材料和方法 | 第31-33页 |
| ·材料与试剂 | 第31页 |
| ·仪器 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-36页 |
| ·半抗原17β–19–NT 琥珀酸酯质谱图 | 第33页 |
| ·半抗原核磁共振分析 | 第33页 |
| ·人工抗原的红外光谱鉴定 | 第33-34页 |
| ·人工抗原偶联率测定 | 第34页 |
| ·抗体免疫学特性 | 第34-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·半抗原改造与蛋白质偶联 | 第36页 |
| ·NT pAb 特异性 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第四章 19–去甲睾酮异源性icELISA 试剂盒的研制及应用 | 第38-51页 |
| ·材料与方法 | 第38-41页 |
| ·材料与试剂 | 第38页 |
| ·仪器设备 | 第38页 |
| ·人工抗原的合成 | 第38-39页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第39页 |
| ·间接ELISA 检测方法 | 第39-40页 |
| ·间接竞争ELISA(icELISA)检测和标准曲线 | 第40页 |
| ·理化因素对检测性能的影响 | 第40页 |
| ·ELISA 试剂盒的配置及应用 | 第40页 |
| ·NT-Kit 性能检测和优化 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-48页 |
| ·免疫原紫外图谱鉴定 | 第41页 |
| ·免疫原红外图谱鉴定 | 第41-42页 |
| ·抗体筛选和异源性检测方法 | 第42-43页 |
| ·间接竞争ELISA 标准曲线的建立 | 第43-44页 |
| ·理化因素对标准曲线的影响 | 第44-46页 |
| ·NT–Kit 性能检测 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·异源性icELISA 检测方法 | 第48-49页 |
| ·19-去甲睾酮不同检测方法的比较 | 第49页 |
| ·小结 | 第49-51页 |
| 第五章 19–去甲睾酮单克隆抗体的筛选及免疫学检测方法的优化 | 第51-62页 |
| ·材料与方法 | 第51-54页 |
| ·材料和试剂 | 第51页 |
| ·缓冲液 | 第51页 |
| ·仪器设备 | 第51页 |
| ·载体蛋白的活化和人工抗原的合成 | 第51-52页 |
| ·动物免疫 | 第52页 |
| ·免疫次数对免疫效果的影响 | 第52页 |
| ·ELISA 检测程序 | 第52页 |
| ·19-去甲睾酮单克隆抗体的制备 | 第52-53页 |
| ·ELISA 标准曲线的建立和优化 | 第53页 |
| ·尿液基质的影响 | 第53页 |
| ·LC-MS/MS 检测 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-59页 |
| ·不同免疫次数对抗体效价的影响 | 第54页 |
| ·细胞融合备用鼠的选择 | 第54-55页 |
| ·NT m Ab 的制备及性能鉴定 | 第55页 |
| ·杂交瘤稳定性 | 第55页 |
| ·亲和常数(Ka) | 第55-56页 |
| ·异源性icELISA 标准曲线的建立 | 第56页 |
| ·抗体特异性 | 第56-57页 |
| ·基质效应性 | 第57-58页 |
| ·LC–MS/MS 检测结果 | 第58-59页 |
| ·ELISA 与LC–MS/MS 相关性分析 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·载体蛋白的活化 | 第59页 |
| ·小鼠强化免疫效果 | 第59-60页 |
| ·异源性免疫学检测 | 第60页 |
| ·单克隆抗体的优势 | 第60页 |
| ·抗体亲和性 | 第60页 |
| ·特异性 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第六章 19–去甲睾酮直接竞争ELISA 检测方法的建立及应用 | 第62-75页 |
| ·材料与方法 | 第62-65页 |
| ·试剂和材料 | 第62页 |
| ·酶标半抗原的合成 | 第62页 |
| ·ELISA 检测程序 | 第62-63页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第63页 |
| ·有机溶剂对标准曲线的影响 | 第63页 |
| ·样品前处理 | 第63-64页 |
| ·试剂盒稳定性评估 | 第64页 |
| ·GC-MS 验证实验 | 第64-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-73页 |
| ·单克隆抗体的生产与特性 | 第65页 |
| ·同源和异源检测实验 | 第65-66页 |
| ·间接竞争(icELISA)和直接竞争(dcELISA)标准曲线 | 第66-68页 |
| ·抗体特异性(CR) | 第68页 |
| ·有机溶剂对标准曲线的影响 | 第68-69页 |
| ·样品前处理方式的选择 | 第69-70页 |
| ·简单稀释法的验证 | 第70-71页 |
| ·冻融实验 | 第71页 |
| ·ELISA 试剂盒的保质期 | 第71-72页 |
| ·ELISA 与GC-MS 检测的相关性 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73页 |
| ·间接竞争和直接竞争ELISA 检测模式 | 第73页 |
| ·样品前处理中酶解步骤的探讨 | 第73页 |
| ·小结 | 第73-75页 |
| 第七章 19–去甲睾酮胶体金免疫层析试纸条检测方法的建立 | 第75-84页 |
| ·材料与方法 | 第75-78页 |
| ·试剂和材料 | 第75页 |
| ·主要仪器设备 | 第75页 |
| ·胶体金溶液的制备 | 第75页 |
| ·金标抗体的制备及条件优化 | 第75-77页 |
| ·免疫层析试纸条的组装 | 第77页 |
| ·检测程序和原理 | 第77-78页 |
| ·待测样品预处理 | 第78页 |
| ·试纸条检测性能 | 第78页 |
| ·结果与分析 | 第78-82页 |
| ·胶体金颗粒的质量 | 第78-79页 |
| ·金标抗体最佳pH 值的确定 | 第79页 |
| ·胶体金标记最佳抗体浓度 | 第79页 |
| ·试纸条灵敏度测试 | 第79-80页 |
| ·NT-strip 特异性鉴定 | 第80-81页 |
| ·重复性与稳定性实验 | 第81页 |
| ·真实样品检测 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-83页 |
| ·胶体金的制备 | 第82-83页 |
| ·金标层析试纸的检测原理 | 第83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 第八章 动物组织中19–去甲睾酮残留GC–MS 检测方法的建立 | 第84-91页 |
| ·材料与方法 | 第84-85页 |
| ·试剂、材料和仪器 | 第84页 |
| ·样品前处理 | 第84页 |
| ·粗提产物的分离和净化 | 第84-85页 |
| ·衍生化 | 第85页 |
| ·GC-MS 分析 | 第85页 |
| ·GC-MS 检测性能 | 第85页 |
| ·结果与分析 | 第85-90页 |
| ·类固醇激素的提取与纯化 | 第85-86页 |
| ·类固醇激素衍生化 | 第86-87页 |
| ·定量离子的选择 | 第87-88页 |
| ·检测方法的评价 | 第88-90页 |
| ·小结 | 第90-91页 |
| 结论 | 第91页 |
| 创新点 | 第91页 |
| 进一步研究的内容 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 作者简介 | 第107-108页 |