| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-44页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一章 多能性干细胞与细胞核重编程 | 第14-27页 |
| ·各种组织来源的多能性干细胞 | 第14-18页 |
| ·胚胎来源的多能性干细胞(ESCs) | 第14-16页 |
| ·原始生殖嵴来源的多能性干细胞(PGCs/EGCs) | 第16-17页 |
| ·雄性生殖腺来源的多能性干细胞(mGSCs) | 第17-18页 |
| ·细胞核重编程研究方法及进展 | 第18-22页 |
| ·体细胞核移植 | 第18页 |
| ·体细胞与胚胎干细胞融合诱导重编程 | 第18-19页 |
| ·细胞提取物诱导重编程 | 第19-20页 |
| ·转录因子诱导重编程 | 第20-22页 |
| ·细胞核重编程与表观遗传修饰 | 第22-25页 |
| ·重编程过程基因组的去甲基化 | 第22-23页 |
| ·重编程过程X染色体的重新激活 | 第23-24页 |
| ·重编程过程组蛋白修饰的重塑 | 第24-25页 |
| ·家畜多能性干细胞建系影响因素 | 第25-26页 |
| ·原代多能干细胞分离与鉴别 | 第25页 |
| ·培养条件的优化 | 第25-26页 |
| ·家畜多能性干细胞研究意义 | 第26-27页 |
| 第二章 诱导性多能干细胞研究进展 | 第27-44页 |
| ·诱导多能性干细胞研究概述 | 第27-28页 |
| ·多能性干细胞的诱导方法 | 第28-29页 |
| ·诱导方法的优化 | 第29-34页 |
| ·减少致癌和突变风险 | 第29-32页 |
| ·重编程效率的提高 | 第32-34页 |
| ·诱导性多能干细胞鉴定方法 | 第34页 |
| ·诱导性多能干细胞重编程分子机理 | 第34-41页 |
| ·转录因子及调控网络在重编程中的功能 | 第34-39页 |
| ·表观遗传状态的改变 | 第39-40页 |
| ·重编程过程分析 | 第40-41页 |
| ·诱导性多能干细胞在医学研究和疾病治疗中的应用 | 第41-43页 |
| ·多能性干细胞应用前景 | 第43-44页 |
| 试验研究 | 第44-104页 |
| 第三章 牛OCT4与C-MYC基因克隆及逆转录病毒表达载体构建 | 第44-54页 |
| ·材料与方法 | 第44-47页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-47页 |
| ·结果 | 第47-51页 |
| ·牛Oct4和c-Myc基因的克隆 | 第47页 |
| ·牛Oct4和c-Myc基因的扩增与鉴定 | 第47-49页 |
| ·逆转录病毒真核表达载体的构建与鉴定 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 第四章 感染性重组逆转录病毒的包装与鉴定 | 第54-63页 |
| ·材料与方法 | 第54-57页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·方法 | 第55-57页 |
| ·结果 | 第57-61页 |
| ·G418对RetroPack PT67细胞与NIH3T3细胞最小致死量 | 第57-58页 |
| ·脂质体介导重组质粒转染PT67细胞稳定产毒株的建立 | 第58-59页 |
| ·产毒细胞株和病毒上清中外源基因的表达 | 第59-60页 |
| ·病毒颗粒电镜检测 | 第60页 |
| ·重组逆转录病毒滴度测定 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第五章 四个转录因子组合诱导成年牛皮肤成纤维细胞重编程为IPS细胞 | 第63-87页 |
| ·材料与方法 | 第64-71页 |
| ·材料 | 第64-65页 |
| ·方法 | 第65-71页 |
| ·结果 | 第71-83页 |
| ·牛皮肤成纤维细胞的分离培养和鉴定 | 第71-72页 |
| ·病毒感染牛成纤维细胞与克隆的获得 | 第72-73页 |
| ·牛iPS细胞克隆传代、冻存与复苏 | 第73-75页 |
| ·iPS细胞生物学特性鉴定 | 第75-83页 |
| ·讨论 | 第83-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 第六章 牛IPS细胞多分化潜能的检测 | 第87-96页 |
| ·材料与方法 | 第87-89页 |
| ·材料 | 第87-88页 |
| ·方法 | 第88-89页 |
| ·结果 | 第89-94页 |
| ·牛iPS细胞体外自由分化 | 第89-91页 |
| ·牛iPS细胞体外定向诱导分化为心肌细胞 | 第91-92页 |
| ·牛iPS细胞体外定向诱导分化为神经细胞 | 第92页 |
| ·畸胎瘤形成与检测 | 第92-94页 |
| ·讨论 | 第94-95页 |
| ·小结 | 第95-96页 |
| 第七章 减少转录因子数量对诱导牛IPS细胞效果的影响 | 第96-104页 |
| ·材料与方法 | 第96-97页 |
| ·材料 | 第96页 |
| ·方法 | 第96-97页 |
| ·结果 | 第97-101页 |
| ·三因子组合诱导多能性细胞的获得 | 第97页 |
| ·二因子和一因子组合诱导多能性干细胞 | 第97-98页 |
| ·三因子诱导获得干细胞的生物学特征鉴定 | 第98-101页 |
| ·讨论 | 第101-102页 |
| ·小结 | 第102-104页 |
| 结论 | 第104-105页 |
| 创新之处和进一步研究的课题 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-121页 |
| 附录 | 第121-126页 |
| 缩略词 | 第126-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 作者简介 | 第129页 |
