| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 文献综述 | 第15-35页 |
| 第一章 血吸虫病研究进展 | 第15-24页 |
| ·血吸虫的生活史 | 第15-16页 |
| ·血吸虫病的流行病学和病理变化 | 第16-17页 |
| ·抗血吸虫病药物及候选疫苗的研究 | 第17-18页 |
| ·相关药物开发 | 第17页 |
| ·候选疫苗分子及其保护性分析 | 第17-18页 |
| ·血吸虫虫体细胞的分离培养 | 第18-19页 |
| ·血吸虫病的诊断和其它共生性疾病之间的关系 | 第19-20页 |
| ·血吸虫病的诊断 | 第19-20页 |
| ·血吸虫病和其它病原的共生性 | 第20页 |
| ·血吸虫感染终末宿主免疫学变化 | 第20-21页 |
| ·日本血吸虫蛋白功能域的研究 | 第21-22页 |
| ·日本血吸虫Wnt 信号通路成员的研究 | 第22页 |
| ·RNAi 技术在血吸虫基因功能研究中的应用 | 第22-24页 |
| 第二章 Wnt 信号通路和RNA 干扰技术研究进展 | 第24-35页 |
| ·Wnt 信号通路 | 第24-31页 |
| ·Wnt 家族蛋白的生物学特征 | 第24-25页 |
| ·Wnt 信号通路及其调控 | 第25-28页 |
| ·Wnt 信号通路的生物学作用 | 第28-30页 |
| ·Wnt 信号通路在癌症和遗传性疾病中的作用 | 第30-31页 |
| ·RNA 干扰技术 | 第31-35页 |
| ·RNAi 现象的发现 | 第31页 |
| ·RNAi 的生物学原理 | 第31-33页 |
| ·RNAi 技术及其应用 | 第33-35页 |
| 试验研究 | 第35-96页 |
| 第三章 日本血吸虫Wnt4 基因结构特征及转录水平分析 | 第35-49页 |
| ·材料和方法 | 第35-42页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-42页 |
| ·结果 | 第42-46页 |
| ·基因组DNA 的抽提和GenomeWalkerTM 文库的构建 | 第42-43页 |
| ·Wnt4 基因结构分析 | 第43页 |
| ·实时定量引物对的特异性扩增 | 第43-44页 |
| ·标准曲线的构建 | 第44-45页 |
| ·不同发育阶段虫体Wnt4 基因的转录水平 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| ·Wnt 家族蛋白结构特征 | 第46页 |
| ·日本血吸虫发育特征 | 第46-47页 |
| ·实时定量PCR 技术 | 第47页 |
| ·Wnt4 信号分子转录水平的变化 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第四章 日本血吸虫Wnt4 蛋白的组织定位 | 第49-61页 |
| ·材料和方法 | 第49-54页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·方法 | 第50-54页 |
| ·结果 | 第54-59页 |
| ·pET28a-Wnt4-156 重组质粒的构建 | 第54-55页 |
| ·pET28a-Wnt4-156 重组质粒的诱导表达和蛋白纯化 | 第55页 |
| ·抗Wnt4 血清制备及效价测定 | 第55-56页 |
| ·13 日龄童虫蛋白抽提及浓度测定 | 第56页 |
| ·抗Wnt4 血清和虫体天然蛋白的结合特异性 | 第56-57页 |
| ·Wnt4 蛋白在不同日龄虫体的组织定位 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·Wnt 家族蛋白的分泌特征 | 第59页 |
| ·不同物种Wnt4 蛋白分子的生物学作用 | 第59页 |
| ·Western blotting 验证抗血清的特异性 | 第59-60页 |
| ·日本血吸虫Wn4 蛋白的组织定位 | 第60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 第五章 日本血吸虫Wnt4 信号分子的作用通路 | 第61-74页 |
| ·材料和方法 | 第61-66页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·方法 | 第62-66页 |
| ·结果 | 第66-72页 |
| ·siRNA 的稳定性分析 | 第66页 |
| ·siRNA 进入虫体的效率 | 第66-67页 |
| ·有效干扰siRNA 的筛选 | 第67-68页 |
| ·浸泡法和电击法对Wnt4 基因抑制效果的比较 | 第68-69页 |
| ·不同剂量的siRNA 对Wnt4 基因抑制效果的比较 | 第69-70页 |
| ·Wnt4 基因抑制组虫体下游基因的表达变化 | 第70页 |
| ·Western blotting 分析试验组虫体Wnt4 和β-catenin 蛋白水平变化 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-73页 |
| ·Wnt 家族蛋白的分类特征 | 第72页 |
| ·RNAi 技术在血吸虫研究中的应用 | 第72页 |
| ·siRNA 进入虫体的途径 | 第72-73页 |
| ·日本血吸虫Wnt4 分子的作用通路 | 第73页 |
| ·小结 | 第73-74页 |
| 第六章 Wnt4 信号分子在虫体生长发育中的作用 | 第74-80页 |
| ·材料和方法 | 第74-76页 |
| ·材料 | 第74页 |
| ·方法 | 第74-76页 |
| ·结果 | 第76-78页 |
| ·尾蚴断尾率检查和新转化童虫向宿主体内导入 | 第76页 |
| ·虫体收集及雌、雄虫体长度的测量 | 第76-77页 |
| ·小鼠肝脏虫卵计数 | 第77页 |
| ·试验组和对照组虫体Wnt4 和β-catenin 基因mRNA 水平的变化 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-79页 |
| ·RNAi 技术在新转化童虫中的应用 | 第78页 |
| ·尾蚴的收集和体外转化 | 第78-79页 |
| ·Wnt4 基因抑制虫体生物学指标的变化 | 第79页 |
| ·小结 | 第79-80页 |
| 第七章 日本血吸虫β-连环蛋白基因cDNA 序列扩增及转录分析 | 第80-96页 |
| ·材料和方法 | 第80-86页 |
| ·材料 | 第80-81页 |
| ·方法 | 第81-86页 |
| ·结果 | 第86-93页 |
| ·7 日龄童虫RNA 的抽提 | 第86页 |
| ·β-catenin 基因cDNA 序列的获得 | 第86-87页 |
| ·β-catenin 基因cDNA 序列的特异PCR 扩增 | 第87页 |
| ·β-catenin 基因的生物信息学分析 | 第87-91页 |
| ·不同发育阶段虫体β-catenin 基因转录水平的分析 | 第91页 |
| ·重组质粒的构建和诱导表达 | 第91-92页 |
| ·抗β-catenin 血清、抗α-tubulin 血清和虫体天然蛋白的结合特异性 | 第92-93页 |
| ·讨论 | 第93-95页 |
| ·β-catenin 分子的作用机制 | 第93-94页 |
| ·日本血吸虫RNA 的体内缺口现象 | 第94页 |
| ·β-catenin 基因cDNA 序列的扩增和结构特征 | 第94页 |
| ·β-catenin 家族蛋白的结构特征 | 第94-95页 |
| ·日本血吸虫β-catenin 分子转录水平的变化 | 第95页 |
| ·小结 | 第95-96页 |
| 结论 | 第96-97页 |
| 创新点 | 第97页 |
| 进一步研究内容 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-114页 |
| 缩略词表 | 第114-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 作者简介 | 第117页 |
