摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
符号说明 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1.1 马尔堡病毒和埃博拉病毒 | 第10-14页 |
1.1.1 病原学 | 第10页 |
1.1.2 病毒结构与功能 | 第10-11页 |
1.1.3 流行病学 | 第11-12页 |
1.1.4 致病机制 | 第12-13页 |
1.1.5 临床症状 | 第13-14页 |
1.1.6 诊断治疗与预防 | 第14页 |
1.2 水疱性口炎病毒概述 | 第14-15页 |
1.3 马尔堡病毒和埃博拉病毒疫苗研究进展 | 第15-17页 |
1.3.1 重组水疱性口炎病毒载体疫苗 | 第15页 |
1.3.2 重组腺病毒载体疫苗 | 第15-16页 |
1.3.3 VP30缺失的EBOV疫苗 | 第16页 |
1.3.4 DNA疫苗 | 第16页 |
1.3.5 病毒样颗粒疫苗 | 第16页 |
1.3.6 灭活疫苗 | 第16-17页 |
1.3.7 亚单位疫苗 | 第17页 |
1.4 研究的目的和意义 | 第17-18页 |
第二章 马尔堡病毒和埃博拉病毒VSV载体疫苗构建及鉴定 | 第18-32页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 生物材料 | 第18-19页 |
2.1.2 试剂耗材 | 第19页 |
2.1.3 仪器设备 | 第19页 |
2.2 方法 | 第19-25页 |
2.2.1 载体构建与鉴定 | 第19-22页 |
2.2.2 病毒疫苗制备 | 第22页 |
2.2.3 病毒RT-PCR鉴定 | 第22-24页 |
2.2.4 蛋白免疫印记及间接免疫荧光鉴定病毒表达的目的蛋白 | 第24-25页 |
2.2.5 病毒滴度及体外生长曲线测定 | 第25页 |
2.3 病毒疫苗制备结果 | 第25-30页 |
2.3.1 载体构建及鉴定 | 第25-27页 |
2.3.2 病毒拯救结果 | 第27页 |
2.3.3 病毒RT-PCR的鉴定 | 第27-28页 |
2.3.4 目的蛋白WB及间接免疫荧光鉴定 | 第28-30页 |
2.3.5 病毒滴度及体外生长曲线测定 | 第30页 |
2.4 讨论与小结 | 第30-32页 |
第三章 马尔堡病毒和埃博拉病毒二价VSV载体疫苗初步评价 | 第32-44页 |
3.1 材料 | 第32页 |
3.1.1 生物材料 | 第32页 |
3.1.2 试剂耗材 | 第32页 |
3.1.3 仪器设备 | 第32页 |
3.2 方法 | 第32-35页 |
3.2.1 重组病毒免疫小鼠 | 第32-33页 |
3.2.2 重组病毒对小鼠体重的影响测定 | 第33页 |
3.2.3 表达埃博拉病毒GP截短体蛋白和马尔堡病毒GP截短体蛋白 | 第33-34页 |
3.2.4 免疫重组病毒的小鼠血清效价测定及IgG1、IgG2a测定 | 第34页 |
3.2.5 免疫重组病毒的小鼠脾细胞增殖试验及其IL-2和IFN-γ含量测定 | 第34-35页 |
3.3 结果 | 第35-43页 |
3.3.1 rVSVΔG-MGP-ZGP二价疫苗对免疫小鼠体重的影响 | 第35页 |
3.3.2 原核表达GP2Δ和GPΔTM蛋白的结果 | 第35-36页 |
3.3.3 免疫重组二价疫苗后小鼠血清效价测定 | 第36-40页 |
3.3.4 免疫重组二价疫苗小鼠血清IgG2a、IgG1比值 | 第40-41页 |
3.3.5 免疫重组二价疫苗小鼠脾细胞增殖试验 | 第41-42页 |
3.3.6 免疫重组二价疫苗小鼠IL-2、IFNγ含量的测定 | 第42-43页 |
3.4 讨论与小结 | 第43-44页 |
全文总结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-65页 |
附录 | 第65-68页 |
致谢 | 第68-70页 |