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2015-2017年禽腺病毒的分离鉴定及分别表达禽腺病毒penton和fiber2蛋白重组新城疫病毒的构建

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
符号说明第10-12页
综述第12-25页
    1 心包积液综合征第12-13页
        1.1 流行病学第12页
        1.2 临床症状及病理变化第12-13页
        1.3 病原学第13页
    2 腺病毒第13-16页
        2.1 禽腺病毒第14页
        2.2 病毒的增殖第14页
        2.3 病毒基因组第14页
        2.4 蛋白及功能第14-16页
        2.5 腺病毒的免疫抑制性第16页
    3 诊断方法第16-17页
        3.1 血清学诊断技术第16-17页
        3.2 分子生物学诊断技术第17页
    4 预防控制第17-20页
        4.1 灭活疫苗第17-18页
        4.2 减毒活疫苗第18-19页
        4.3 亚单位疫苗第19-20页
    参考文献第20-25页
第一章 I群禽腺病毒的分离鉴定第25-46页
    1 材料第25页
        1.1 主要材料第25页
        1.2 主要仪器第25页
        1.3 分子生物学软件第25页
    2 方法第25-29页
        2.1 LMH细胞的培养第26页
        2.2 禽腺病毒的分离第26页
        2.3 禽腺病毒TCID_(50)的测定与传代第26页
        2.4 禽腺病毒鉴定引物的设计第26-27页
        2.5 禽腺病毒基因组DNA的提取第27页
        2.6 hexon、penton和fiber2基因的PCR扩增第27-28页
        2.7 PCR结果的检测及目的片段的回收纯化第28页
        2.8 动物回归实验第28页
        2.9 致病性实验第28-29页
        2.10 禽腺病毒抗体中和试验测定方法第29页
    3 结果第29-42页
        3.1 LMH细胞的培养与病毒传代第29-30页
        3.2 分离株hexon、penton和fiber2基因PCR结果第30页
        3.3 禽腺病毒的鉴定第30-32页
        3.4 hexon基因序列分析第32-35页
        3.5 penton基因序列分析第35-38页
        3.6 fiber2基因序列分析第38-41页
        3.7 动物回归实验第41-42页
        3.8 禽腺病毒分离株的致病性试验第42页
        3.9 阳性血清中和效价第42页
    4 讨论第42-44页
    参考文献第44-46页
第二章 表达血清4型禽腺病毒penton和fiber-2基因重组新城疫病毒的构建及鉴定第46-66页
    1 材料第46-47页
        1.1 病毒、质粒、菌株、细胞株第46页
        1.2 实验试剂及实验动物第46-47页
        1.3 主要仪器及分子生物学软件第47页
    2 方法第47-58页
        2.1 禽腺病毒毒株的扩增第47页
        2.2 病毒基因组DNA的提取第47页
        2.3 基因组全长cDNA克隆pNDV/NAI4的构建第47-51页
        2.4 基因组全长cDNA隆pNDV/rAI4-penton的构建第51-54页
        2.5 基因组全长cDNA克隆pNDV/rAI4-fiber2的构建第54-56页
        2.6 重组病毒的拯救及鉴定第56-57页
        2.7 重组病毒在鸡胚上的生长特性第57页
        2.8 通过Western blot检测外源蛋白的表达第57页
        2.9 重组病毒MDT的测定第57-58页
        2.10 重组病毒的免疫保护试验第58页
    3 结果第58-62页
        3.1 重组病毒的拯救及鉴定第58页
        3.2 重组病毒的生长曲线第58-59页
        3.3 Western blot鉴定外源蛋白的表达第59-60页
        3.4 重组病毒相关生物学特性第60页
        3.5 重组病毒的免疫保护实验第60-61页
        3.6 重组病毒免疫后的抗体水平第61-62页
    4 讨论第62-64页
    参考文献第64-66页
全文总结第66-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间发表的学术论文第68-69页

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