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农产品中呕吐毒素的酶联免疫检测方法的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
1 前言第9-22页
   ·真菌毒素污染现状及引起的食品安全问题第9-10页
   ·真菌类生物毒素简介第10-15页
     ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇第10-12页
     ·其他真菌毒素第12-15页
   ·呕吐毒素检测方法简介及其研究进展第15-16页
     ·薄层色谱法第15页
     ·高效液相色谱法第15页
     ·气相色谱法第15-16页
     ·酶联免疫检测法第16页
   ·酶联免疫分析方法简介第16-20页
     ·酶联免疫分析方法原理第16-17页
     ·酶联免疫分析方法的主要类型第17页
     ·酶联免疫方法的建立第17-19页
     ·多克隆抗体简介第19页
     ·单克隆抗体简介第19页
     ·酶联免疫分析方法在食品检测中的应用第19-20页
   ·本课题的研究意义第20-21页
   ·本课题的研究内容第21-22页
     ·半抗原的合成及完全抗原的制备第21页
     ·抗体的制备第21页
     ·呕吐毒素直接竞争ELISA方法的建立第21页
     ·高效液相色谱法与ELISA方法的一致性验证第21-22页
2 材料与方法第22-32页
   ·实验材料第22-24页
     ·主要药品和试剂第22-23页
     ·仪器及材料第23页
     ·待测样品第23页
     ·常用溶液的配制第23-24页
   ·实验方法第24-32页
     ·呕吐毒素半抗原的合成第24-25页
     ·人工免疫原(DON-BSA)的制备第25页
     ·包被抗原(DON-OVA)的制备第25页
     ·抗体的制备第25-28页
     ·酶标抗原的制备第28页
     ·直接竞争酶联免疫检测方法的建立第28-29页
     ·呕吐毒素直接竞争ELISA检测方法性能指标的评价第29-30页
     ·样品基质影响的消除第30-31页
     ·仪器分析法确证第31页
     ·呕吐毒素直接竞争ELISA稳定性实验第31-32页
3 结果与讨论第32-51页
   ·呕吐毒素半抗原的合成第32-33页
     ·呕吐毒素合成方法的选择第32页
     ·半抗原3-HS-DON偶联物的表征第32-33页
   ·人工免疫原的制备第33页
   ·抗体的制备第33-35页
     ·抗血清效价的测定第33-35页
     ·抗体的纯化以及抗体浓度的测定第35页
   ·直接竞争酶联免疫检测方法的建立第35-39页
     ·抗体包被量和酶标抗原稀释比例的优化第36页
     ·直接竞争ELISA标准品稀释液离子强度的优化第36-37页
     ·直接竞争ELISA标样稀释液pH值的优化第37-38页
     ·有机溶剂对直接竞争ELISA反应体系的影响第38页
     ·呕吐毒素直接竞争ELISA标准曲线的绘制第38-39页
   ·呕吐毒素直接竞争ELISA检测方法性能指标的评价第39-41页
     ·呕吐毒素抗体特异性的测定第39-40页
     ·ELISA方法的检测限与灵敏度第40页
     ·ELISA方法的精密度第40-41页
   ·样品基质影响及消除第41-44页
     ·谷物及其制品中基质影响的消除第42-43页
     ·牛奶、牛肉及饲料样品中基质影响的消除第43-44页
   ·样品添加回收实验第44-45页
   ·样品的检出限第45-46页
   ·高效液相色谱法检测呕吐毒素第46-49页
     ·高效液相色谱检测呕吐毒素标准曲线的建立第46-47页
     ·样品处理第47-48页
     ·呕吐毒素直接竞争ELISA检测结果与仪器分析结果的一致性第48-49页
   ·呕吐毒素直接竞争ELISA稳定性实验第49-51页
     ·抗体稳定性实验第49-50页
     ·酶标抗原稳定性实验第50-51页
4 结论第51-52页
5 展望第52-53页
6 参考文献第53-59页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第59-60页
8 致谢第60页

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