| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 柚类(Citrus grandis(L.)Osbeck)资源的研究概况 | 第11-14页 |
| 1.1.1 柚类资源栽培历史与品种分布 | 第11页 |
| 1.1.2 柚类的生物、生态学性状 | 第11-12页 |
| 1.1.3 柚的起源与演化 | 第12页 |
| 1.1.4 柚的多样性研究 | 第12-14页 |
| 1.2 柚皮苷的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.1 柚皮苷在柚中的生物合成途径 | 第15页 |
| 1.2.2 柚皮苷在柑橘果实中的含量及分布 | 第15-16页 |
| 1.2.3 柚皮苷的生物活性 | 第16-17页 |
| 1.2.4 柚皮苷的应用 | 第17-18页 |
| 1.3 鼠李糖基转移酶基因的研究进展 | 第18-19页 |
| 第2章 引言 | 第19-21页 |
| 2.1 研究背景 | 第19页 |
| 2.2 研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2.3 研究的技术路线 | 第20-21页 |
| 第3章 梁平柚Cm1,2RhaT基因的克隆与序列分析 | 第21-33页 |
| 3.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 3.1.2 菌株和载体 | 第21页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第21页 |
| 3.1.5 自配的主要试剂 | 第21-22页 |
| 3.2 实验方法 | 第22-26页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第22页 |
| 3.2.2 梁平柚叶片DNA的提取 | 第22页 |
| 3.2.3 梁平柚叶片RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第22-24页 |
| 3.2.4 Cm1,2RhaT基因的获得 | 第24-26页 |
| 3.2.5 Cm1,2RhaT基因cDNA的生物信息学分析 | 第26页 |
| 3.3 结果与分析 | 第26-33页 |
| 3.3.1 梁平柚Cm1,2RhaT基因编码框全长cDNA的克隆 | 第26-27页 |
| 3.3.2 梁平柚Cm1,2RhaT基因cDNA序列特征 | 第27页 |
| 3.3.3 Cm1,2RhaT基因编码蛋白的同源比对 | 第27-28页 |
| 3.3.4 Cm1,2RhaT与具有糖基转移基团的基因的氨基酸聚类分析 | 第28-29页 |
| 3.3.5 Cm1,2RhaT基因编码蛋白的结构特征 | 第29-33页 |
| 第4章 梁平柚Cm1,2RhaT基因原核表达载体的构建及目的蛋白的融合表达 | 第33-47页 |
| 4.1 实验材料和试剂 | 第33-34页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第33页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 4.1.3 主要设备 | 第33页 |
| 4.1.4 自配的主要试剂 | 第33-34页 |
| 4.2 实验方法 | 第34-40页 |
| 4.2.1 梁平柚Cm1,2RhaT基因原核表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 4.2.2 目的融合蛋白的诱导表达 | 第36-37页 |
| 4.2.3 SDS-PAGE电泳检测目的融合蛋白的表达 | 第37-38页 |
| 4.2.4 表达体系的优化 | 第38页 |
| 4.2.5 融合蛋白的pET28a-CmRhaT的分离纯化与复性 | 第38-39页 |
| 4.2.6 鼠李糖基转移酶酶学性质测定与分析 | 第39-40页 |
| 4.3 结果与分析 | 第40-47页 |
| 4.3.1 梁平柚Cm1,2RhaT基因原核表达载体的构建 | 第40-42页 |
| 4.3.2 pET28a-CmRhaT在BL21(DE3)中的表达 | 第42页 |
| 4.3.3 表达体系的优化 | 第42-44页 |
| 4.3.4 重组融合蛋白的分离、纯化与复性 | 第44-45页 |
| 4.3.5 鼠李糖基转移酶的融合蛋白的酶学性质测定与分析 | 第45-47页 |
| 第5章 鼠李糖基转移酶基因Cm1,2RhaT的基因表达分析 | 第47-53页 |
| 5.1 实验材料 | 第47页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第47页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第47页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第47页 |
| 5.2 实验方法 | 第47-48页 |
| 5.2.1 实验材料的采集 | 第47-48页 |
| 5.2.2 总RNA提取及cDNA第一链合成 | 第48页 |
| 5.3 Cm1,2RhaT表达特性分析 | 第48-49页 |
| 5.3.1 实时荧光定量PCR引物设计 | 第48页 |
| 5.3.2 实时荧光定量PCR引物的特异性性检测 | 第48-49页 |
| 5.3.3 定量标准品制备 | 第49页 |
| 5.3.4 Cm1,2RhaT表达的荧光定量分析 | 第49页 |
| 5.4 结果与分析 | 第49-53页 |
| 5.4.1 总RNA提取 | 第49页 |
| 5.4.2 Cm1,2RhaT表达特性分析 | 第49-51页 |
| 5.4.3 Cm1,2RhaT表达的荧光定量分析 | 第51-53页 |
| 第6章 讨论 | 第53-55页 |
| 6.1 关于Cm1,2RhaT基因的原核表达 | 第53页 |
| 6.2 鼠李糖基转移酶基因Cm1,2RhaT的基因表达分析 | 第53-55页 |
| 第7章 总结 | 第55-57页 |
| 7.1 结论 | 第55-56页 |
| 7.1.1 Cm1,2RhaT基因片段的克隆与编码蛋白的特性分析 | 第55页 |
| 7.1.2 Cm1,2RhaT基因的原核表达 | 第55-56页 |
| 7.1.3 Cm1,2RhaT基因的表达分析 | 第56页 |
| 7.2 本文新意 | 第56页 |
| 7.3 后续工作 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 缩略词表 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-69页 |
| 在校期间发表的文章和参与的项目 | 第69页 |
