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猪源IFITM3抗乙型脑炎病毒和伪狂犬病毒的效果和机制研究

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略语表(Abbreviation)第12-14页
1 文献综述第14-25页
    1.1 日本乙型脑炎简介第14-16页
    1.2 伪狂犬病简介第16-18页
    1.3 IFITM蛋白介绍第18-20页
    1.4 IFITM3的抗病毒研究进展第20-23页
        1.4.1 IFITM3抑制西尼罗河病毒和登革热病毒的早期复制第20页
        1.4.2 IFITM蛋白抑制甲型流感病毒和黄病毒在进入时的感染第20-21页
        1.4.3 IFITM抑制流感病毒和黄病毒属病毒感染的可能机制第21-22页
        1.4.4 IFITM3抑制VSV G蛋白介导的病毒的进入过程第22-23页
    1.5 小结第23-25页
2 研究目的和意义第25-26页
3 材料与方法第26-42页
    3.1 实验材料第26-29页
        3.1.1 毒株、细胞与菌株第26页
        3.1.2 质粒第26页
        3.1.3 工具酶及主要试剂第26-27页
        3.1.4 培养基及其配制第27-28页
        3.1.5 主要缓冲液与相关试剂及其配制第28-29页
        3.1.6 实验动物第29页
    3.2 实验方法第29-42页
        3.2.1 样品基因组DNA的提取第29-30页
        3.2.2 样品总RNA的提取第30-31页
        3.2.3 样品总RNA的RT-PCR第31页
        3.2.4 目的基因的PCR扩增检测第31-32页
        3.2.5 PCR产物的电泳检测第32页
        3.2.6 目的基因的实时荧光定量PCR扩增检测第32-33页
        3.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)第33页
        3.2.8 质粒的制备第33-35页
        3.2.9 蛋白免疫印迹(Western blot)检测目的蛋白的表达第35-37页
        3.2.10 细胞的传代第37页
        3.2.11 病毒的扩增第37-38页
        3.2.12 病毒毒价的测定第38页
        3.2.13 病毒的吸附与进入实验第38-40页
        3.2.14 小鼠的半数致死量(MLD_(50))的测定第40-41页
        3.2.15 小鼠攻毒试验第41页
        3.2.16 实验丢弃物的无害化处理第41页
        3.2.17 统计学方法第41-42页
4 结果与分析第42-58页
    4.1 细胞水平评价sIFITM3对JEV复制的影响及机制研究第42-46页
        4.1.1 过表达sIFITM3对JEV增殖的影响第42-43页
        4.1.2 沉默sIFITM3对JEV增殖的影响第43-44页
        4.1.3 sIFITM3抑制JEV增殖的机制探讨第44-46页
    4.2 细胞水平评价sIFITM3对PRV复制的影响及机制研究第46-49页
        4.2.1 细胞水平过表达sIFITM3对PRV增殖的影响第46-47页
        4.2.2 沉默sIFITM3对PRV增殖的影响第47-48页
        4.2.3 sIFITM3抑制PRV增殖的机制探讨第48-49页
    4.3 过表达sIFITM3转基因小鼠的构建以及抗JEV和PRV的初步研究第49-58页
        4.3.1 过表达sIFITM3转基因小鼠构建第49-54页
        4.3.2 sIFITM3对JEV在转基因小鼠模型上增殖的抑制第54-56页
        4.3.3 sIFITM3对PRV在sIFITM 3转基因小鼠模型上增殖的抑制第56-58页
5 讨论与结论第58-61页
    5.1 讨论第58-60页
        5.1.1 sIFITM3抑制JEV的增殖及其相关机制的初步研究第58-59页
        5.1.2 sIFITM3抑制PRV的增殖及其相关机制的初步研究第59页
        5.1.3 过量表达sIFITM3转基因小鼠的构建第59页
        5.1.4 sIFITM3在机体水平上对JEV和PRV增殖的影响第59-60页
    5.2 结论第60-61页
参考文献第61-67页
致谢第67页

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