摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第12-14页 |
1 文献综述 | 第14-25页 |
1.1 日本乙型脑炎简介 | 第14-16页 |
1.2 伪狂犬病简介 | 第16-18页 |
1.3 IFITM蛋白介绍 | 第18-20页 |
1.4 IFITM3的抗病毒研究进展 | 第20-23页 |
1.4.1 IFITM3抑制西尼罗河病毒和登革热病毒的早期复制 | 第20页 |
1.4.2 IFITM蛋白抑制甲型流感病毒和黄病毒在进入时的感染 | 第20-21页 |
1.4.3 IFITM抑制流感病毒和黄病毒属病毒感染的可能机制 | 第21-22页 |
1.4.4 IFITM3抑制VSV G蛋白介导的病毒的进入过程 | 第22-23页 |
1.5 小结 | 第23-25页 |
2 研究目的和意义 | 第25-26页 |
3 材料与方法 | 第26-42页 |
3.1 实验材料 | 第26-29页 |
3.1.1 毒株、细胞与菌株 | 第26页 |
3.1.2 质粒 | 第26页 |
3.1.3 工具酶及主要试剂 | 第26-27页 |
3.1.4 培养基及其配制 | 第27-28页 |
3.1.5 主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第28-29页 |
3.1.6 实验动物 | 第29页 |
3.2 实验方法 | 第29-42页 |
3.2.1 样品基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
3.2.2 样品总RNA的提取 | 第30-31页 |
3.2.3 样品总RNA的RT-PCR | 第31页 |
3.2.4 目的基因的PCR扩增检测 | 第31-32页 |
3.2.5 PCR产物的电泳检测 | 第32页 |
3.2.6 目的基因的实时荧光定量PCR扩增检测 | 第32-33页 |
3.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第33页 |
3.2.8 质粒的制备 | 第33-35页 |
3.2.9 蛋白免疫印迹(Western blot)检测目的蛋白的表达 | 第35-37页 |
3.2.10 细胞的传代 | 第37页 |
3.2.11 病毒的扩增 | 第37-38页 |
3.2.12 病毒毒价的测定 | 第38页 |
3.2.13 病毒的吸附与进入实验 | 第38-40页 |
3.2.14 小鼠的半数致死量(MLD_(50))的测定 | 第40-41页 |
3.2.15 小鼠攻毒试验 | 第41页 |
3.2.16 实验丢弃物的无害化处理 | 第41页 |
3.2.17 统计学方法 | 第41-42页 |
4 结果与分析 | 第42-58页 |
4.1 细胞水平评价sIFITM3对JEV复制的影响及机制研究 | 第42-46页 |
4.1.1 过表达sIFITM3对JEV增殖的影响 | 第42-43页 |
4.1.2 沉默sIFITM3对JEV增殖的影响 | 第43-44页 |
4.1.3 sIFITM3抑制JEV增殖的机制探讨 | 第44-46页 |
4.2 细胞水平评价sIFITM3对PRV复制的影响及机制研究 | 第46-49页 |
4.2.1 细胞水平过表达sIFITM3对PRV增殖的影响 | 第46-47页 |
4.2.2 沉默sIFITM3对PRV增殖的影响 | 第47-48页 |
4.2.3 sIFITM3抑制PRV增殖的机制探讨 | 第48-49页 |
4.3 过表达sIFITM3转基因小鼠的构建以及抗JEV和PRV的初步研究 | 第49-58页 |
4.3.1 过表达sIFITM3转基因小鼠构建 | 第49-54页 |
4.3.2 sIFITM3对JEV在转基因小鼠模型上增殖的抑制 | 第54-56页 |
4.3.3 sIFITM3对PRV在sIFITM 3转基因小鼠模型上增殖的抑制 | 第56-58页 |
5 讨论与结论 | 第58-61页 |
5.1 讨论 | 第58-60页 |
5.1.1 sIFITM3抑制JEV的增殖及其相关机制的初步研究 | 第58-59页 |
5.1.2 sIFITM3抑制PRV的增殖及其相关机制的初步研究 | 第59页 |
5.1.3 过量表达sIFITM3转基因小鼠的构建 | 第59页 |
5.1.4 sIFITM3在机体水平上对JEV和PRV增殖的影响 | 第59-60页 |
5.2 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67页 |