摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第9-14页 |
1.1 化学发光酶免疫分析技术 | 第10-11页 |
1.1.1 化学发光酶免疫分析中的发光剂 | 第10-11页 |
1.1.2 化学发光酶免疫分析中的酶 | 第11页 |
1.2 增强化学发光免疫分析 | 第11-14页 |
第二章 竞争化学发光酶免疫分析法用于转基因小鼠中β-防御素-2的检测 | 第14-39页 |
2.1 前言 | 第14-20页 |
2.1.1 哺乳动物防御素简介 | 第14页 |
2.1.2 哺乳动物防御素的分类 | 第14-15页 |
2.1.3 哺乳动物防御素的作用机制及生物学活性 | 第15-16页 |
2.1.4 猪β-防御素的研究进展 | 第16-18页 |
2.1.5 目的和意义 | 第18-20页 |
2.2 实验材料 | 第20-21页 |
2.2.1 实验主要仪器 | 第20页 |
2.2.2 实验主要试剂 | 第20-21页 |
2.2.3 主要溶液配制 | 第21页 |
2.2.4 抗pBD-2单克隆抗体的制备 | 第21页 |
2.2.5 pBD-2转基因小鼠的构建 | 第21页 |
2.3 实验方法 | 第21-27页 |
2.3.1 实验原理 | 第21-24页 |
2.3.2 合成pBD-2短肽的包被 | 第24页 |
2.3.3 免疫反应步骤 | 第24页 |
2.3.4 免疫反应条件的优化 | 第24-25页 |
2.3.5 化学发光反应底物的优化 | 第25页 |
2.3.6 pBD-2检测标准曲线的绘制 | 第25页 |
2.3.7 小鼠组织样品的处理 | 第25-26页 |
2.3.8 小鼠组织中pBD-2含量蛋白水平的测定 | 第26页 |
2.3.9 转基因pBD-2小鼠的实时定量RT-PCR分析 | 第26-27页 |
2.4 结果与分析 | 第27-37页 |
2.4.1 免疫反应工作条件的优化 | 第27-28页 |
2.4.2 化学发光底物鲁米诺浓度优化 | 第28-29页 |
2.4.3 化学发光底物PIP浓度优化 | 第29-30页 |
2.4.4 化学发光底物过氧化氢浓度优化 | 第30-31页 |
2.4.5 化学发光底物pH优化 | 第31-32页 |
2.4.6 标准曲线和重复性 | 第32-33页 |
2.4.7 实际样品加标回收率的测定 | 第33-35页 |
2.4.8 检测转基因小鼠中pBD-2含量 | 第35-37页 |
2.5 讨论与小结 | 第37-39页 |
第三章 芽孢@胶体金功能微球的制备及用于猪传染性胸膜肺炎检测的研究 | 第39-57页 |
3.1 前言 | 第39-42页 |
3.2 实验材料 | 第42-43页 |
3.2.1 实验主要仪器 | 第42页 |
3.2.2 实验主要试剂与耗材 | 第42页 |
3.2.3 实验主要溶液配制 | 第42-43页 |
3.3 实验方法 | 第43-45页 |
3.3.1 胶体金的制备 | 第44页 |
3.3.2 枯草芽孢杆菌芽孢的培养 | 第44页 |
3.3.3 枯草芽孢杆菌芽孢的预处理 | 第44页 |
3.3.4 芽孢@胶体金功能微球的制备 | 第44页 |
3.3.5 芽孢表面胶体金装载量的研究 | 第44-45页 |
3.3.6 芽孢@胶体金功能微球用于免疫检测 | 第45页 |
3.4. 实验结果分析 | 第45-55页 |
3.4.1 胶体金的制备 | 第45-46页 |
3.4.2 枯草芽孢杆菌芽孢计数 | 第46页 |
3.4.3 枯草芽孢杆菌芽孢的预处理 | 第46-48页 |
3.4.4 芽孢@胶体金功能微球的制备 | 第48页 |
3.4.5 芽孢表面胶体金装载量的研究 | 第48-50页 |
3.4.6 BCA法测定ApxIVA抗原蛋白浓度 | 第50-51页 |
3.4.7 包被液对芽孢@胶体金微球吸附抗原的影响 | 第51-53页 |
3.4.8 芽孢@胶体金微球免疫体系封闭剂的选择 | 第53-54页 |
3.4.9 芽孢@胶体金微球功能微球用于免疫检测 | 第54-55页 |
3.5 讨论与小结 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
研究生期间发表的论文 | 第66页 |