摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
1. 主要仪器与试剂 | 第8-10页 |
·主要仪器 | 第8-9页 |
·主要试剂 | 第9-10页 |
2. 材料与方法 | 第10-29页 |
·土样的采集 | 第10页 |
·采样地点及时间 | 第10页 |
·采样方法 | 第10页 |
·土样理化性质测定 | 第10-13页 |
·水分含量 | 第11页 |
·pH 值 | 第11-12页 |
·有机质含量 | 第12-13页 |
·土壤DNA 的提取及分析 | 第13-20页 |
·主要试剂配制 | 第13-14页 |
·直接法提取土壤DNA | 第14-16页 |
·(差速离心)间接法提取土壤DNA | 第16-17页 |
·粗提DNA 分析 | 第17-18页 |
·试剂盒提取土壤DNA | 第18-20页 |
·土壤 DNA 16S rDNA 的 PCR 扩增 | 第20-24页 |
·试剂 | 第21页 |
·PCR 反应体系 | 第21页 |
·加样方法 | 第21-22页 |
·PCR 反应条件(PCR 反应参数见表2) | 第22页 |
·PCR 产物琼脂糖凝胶电泳并胶回收 | 第22-24页 |
·土壤微生物基因组DNA PCR-RFLP 分析 | 第24页 |
·土壤微生物基因组PCR 产物的克隆 | 第24-29页 |
·感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
·转化感受态细胞 | 第25-26页 |
·质粒提取 | 第26-29页 |
3. 结果与讨论 | 第29-45页 |
·土样理化性质测定 | 第29页 |
·土壤DNA 提取方法的比较 | 第29-32页 |
·土样预处理与不预处理比较 | 第29-32页 |
·试剂盒提取法的结果分析 | 第32页 |
·土样DNA 的PCR 扩增结果 | 第32-33页 |
·PCR-RFLP 多样性分析 | 第33-34页 |
·土样DNA 的PCR 扩增产物胶回收产物的转化结果 | 第34-36页 |
·批量扩增结果 | 第34-35页 |
·PCR 产物的胶回收检测 | 第35页 |
·转化结果 | 第35-36页 |
·质粒提取结果 | 第36-37页 |
·质粒PCR 结果 | 第37页 |
·测序结果 | 第37-45页 |
·测序及系统树构建 | 第37-43页 |
·23 条 16S rDNA 序列 BLAST 比对结果 | 第43-45页 |
4. 结论 | 第45-46页 |
文献综述 | 第46-61页 |
1 宏基因组技术综述 | 第46-52页 |
·宏基因组学发展概况 | 第47页 |
·宏基因组学的基本研究方法 | 第47-49页 |
·宏基因文库的筛选 | 第49-51页 |
·宏基因组学的应用 | 第51页 |
·展望 | 第51-52页 |
2 16sRDNA 基因技术的发展及应用 | 第52-55页 |
·16sRDNA 基因技术的研究方法 | 第52-55页 |
·16SrDNA-DGGE 方法 | 第52-53页 |
·PCR-RLFP 方法 | 第53-54页 |
·建立 DNA 文库法 | 第54页 |
·传统培养法 | 第54-55页 |
·16S rRNA 基因技术的瓶颈 | 第55页 |
3 我国石漠化土壤研究现状 | 第55-61页 |
·石漠化的概念 | 第56页 |
·石漠化形成的因素 | 第56-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
致谢 | 第68页 |