| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-23页 |
| 1.1 多能性干细胞 | 第14-16页 |
| 1.1.1 胚胎癌细胞 | 第14页 |
| 1.1.2 小鼠胚胎干细胞 | 第14页 |
| 1.1.3 人胚胎干细胞 | 第14-15页 |
| 1.1.4 胚胎生殖细胞 | 第15页 |
| 1.1.5 外胚层干细胞 | 第15-16页 |
| 1.1.6 诱导性多潜能干细胞 | 第16页 |
| 1.2 兔多能性干细胞的研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1 兔多能性干细胞的调控通路 | 第16-17页 |
| 1.2.2 兔ESC的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2.3 兔i PSC的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.3 兔作为实验动物的研究价值 | 第20-21页 |
| 1.3.1 生物反应器 | 第20页 |
| 1.3.2 人类疾病模型动物 | 第20-21页 |
| 1.4 褪黑素作用简介 | 第21页 |
| 1.5 研究展望 | 第21-22页 |
| 1.6 本研究的立题依据及研究内容 | 第22-23页 |
| 1.6.1 立题依据 | 第22页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 兔类胚胎干细胞的分离培养 | 第23-36页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 材料 | 第23-25页 |
| 2.2.1 试验动物 | 第23页 |
| 2.2.2 主要试验试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.3 主要试验仪器设备 | 第24页 |
| 2.2.4 主要溶液配制 | 第24-25页 |
| 2.3 试验方法 | 第25-27页 |
| 2.3.1 小鼠胎儿成纤维细胞的制备 | 第25-26页 |
| 2.3.2 小鼠胎儿成纤维细胞的传代与冻存 | 第26页 |
| 2.3.3 饲养层细胞的制备 | 第26页 |
| 2.3.4 兔胚胎的获取 | 第26-27页 |
| 2.3.5 兔胚胎的处理和培养 | 第27页 |
| 2.3.6 兔类ESC的分离、培养和传代 | 第27页 |
| 2.3.7 褪黑素对兔囊胚、ICM和类ESC的影响 | 第27页 |
| 2.4 试验结果与分析 | 第27-33页 |
| 2.4.1 兔超数排卵结果 | 第27-28页 |
| 2.4.2 兔胚胎的收集与处理 | 第28-29页 |
| 2.4.3 褪黑素对兔囊胚和ICM的影响 | 第29-31页 |
| 2.4.4 褪黑素对兔类ESC的影响 | 第31-33页 |
| 2.5 讨论 | 第33-36页 |
| 第三章 兔类胚胎干细胞的鉴定 | 第36-51页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 材料 | 第36-37页 |
| 3.2.1 试验动物和细胞株 | 第36页 |
| 3.2.2 主要试验试剂 | 第36-37页 |
| 3.2.3 主要试验仪器设备 | 第37页 |
| 3.2.4 主要溶液配制 | 第37页 |
| 3.3 试验方法 | 第37-44页 |
| 3.3.1 兔类ESC碱性磷酸酶染色 | 第37-38页 |
| 3.3.2 兔类ESC免疫荧光染色 | 第38页 |
| 3.3.3 兔类ESC RT-PCR检测多能因子表达 | 第38-41页 |
| 3.3.4 兔类ESC q PCR检测多能因子表达 | 第41页 |
| 3.3.5 兔类ESC核型检测 | 第41-42页 |
| 3.3.6 兔类ESC体外分化能力检测 | 第42-43页 |
| 3.3.7 兔类ESC体内分化能力检测 | 第43-44页 |
| 3.4 试验结果与分析 | 第44-49页 |
| 3.4.1 兔类ESC多能性标志检测 | 第44-46页 |
| 3.4.2 兔类ESC核型分析 | 第46页 |
| 3.4.3 兔类ESC体外分化能力检测 | 第46-48页 |
| 3.4.4 兔类ESC体内分化能力检测 | 第48-49页 |
| 3.5 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 诱导兔胎儿成纤维细胞为多能性干细胞的初步研究 | 第51-64页 |
| 4.1 引言 | 第51页 |
| 4.2 材料 | 第51-52页 |
| 4.2.1 试验动物和细胞株 | 第51页 |
| 4.2.2 主要试验试剂 | 第51-52页 |
| 4.2.3 主要溶液配制 | 第52页 |
| 4.2.4 主要试验仪器设备 | 第52页 |
| 4.3 试验方法 | 第52-55页 |
| 4.3.1 兔胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第52页 |
| 4.3.2 兔胎儿成纤维细胞的鉴定 | 第52-53页 |
| 4.3.3 质粒扩增 | 第53-54页 |
| 4.3.4 质粒鉴定 | 第54页 |
| 4.3.5 转染 | 第54-55页 |
| 4.3.6 诱导兔胎儿成纤维细胞为iPS细胞 | 第55页 |
| 4.3.7 i PS克隆传代 | 第55页 |
| 4.3.8 i PS克隆碱性磷酸酶染色 | 第55页 |
| 4.4 试验结果与分析 | 第55-62页 |
| 4.4.1 兔胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第55-56页 |
| 4.4.2 兔胎儿成纤维细胞鉴定 | 第56-58页 |
| 4.4.3 质粒鉴定 | 第58-59页 |
| 4.4.4 细胞转染 | 第59-60页 |
| 4.4.5 细胞克隆的获取 | 第60-62页 |
| 4.5 讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 全文结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简历 | 第71页 |
