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拟南芥根干细胞发育以及向重力反应中AtIAA15的作用研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
目录第10-12页
第一章 前言第12-36页
    1 拟南芥生长素研究背景第12-17页
        1.1 生长素信号途径第12-13页
        1.2 生长素的极性运输第13-14页
        1.3 AUX/IAAs家族研究概况第14-17页
    2 拟南芥根的发育研究背景第17-26页
        2.1 拟南芥根的结构简介第17-18页
        2.2 拟南芥根的根发育的调控机制第18-26页
    3 根的向重力性研究背景介绍第26-29页
        3.1 淀粉平衡石理论第26-27页
        3.2 生长素极性运输与向重力性反应第27-28页
        3.3 参与向重力性反应的其他信号第28-29页
    4 侧根发育的调控机制第29-35页
        4.1 生长素与侧根发生第30-32页
        4.2 影响侧根发生的其他因素第32-35页
    5 本研究的目的和意义第35-36页
第二章 材料与方法第36-54页
    1 拟南芥生长条件第36页
    2 RNA的提取第36-38页
    3 反转录RNA合成cDNA第一链第38-39页
    4 植物基因组提取第39页
    5 平末端载体制备第39-40页
    6 从琼脂糖凝胶中回收DNA,DNA片段和载体的连接第40-41页
        6.1 从琼脂糖凝胶中回收DNA第40页
        6.2 回收得到的平末端片段连接平术端载体第40-41页
    7 大肠杆菌感受态的制备以及连接产物的转化第41-42页
        7.1 大肠杆菌感受态的制备(Inoue法)第41页
        7.2 连接产物的转化第41-42页
    8 菌落PCR及电泳第42-43页
    9 质粒提取与序列测定第43-44页
    10 Artificial microRNA原理及载体第44-46页
        10.1 AtIAA15特异的amiRNA引物的设计及amiRNA的获得第45页
        10.2 置换PCR第45-46页
    11 植物转化载体的选择及拟南芥的转化第46-48页
        11.1 超表达和抑制表达载体的构建第46-47页
        11.2 农杆菌感受态的制备,转化以及植物转化第47-48页
    12 超表达株系和抑制表达株系的定量PCR检测第48-49页
    13 GUS染色第49页
    14 酵母双杂交第49-52页
        14.1 酵母双杂交载体第49-51页
        14.2 酵母转化第51页
        14.3 酵母mating第51-52页
        14.4 酵母LacZ报告基因的检测第52页
    15 显微观察及图像处理第52-54页
第三章 结果第54-80页
    1 超表达AtIAA15的构建及转化第54-55页
        1.1 PCR扩增得到AtIAA15的cDNA片段第54页
        1.2 pCAMBIA1301SIAA15和pCAMBIA1301SamiIAA15构建的获得及拟南芥转化第54-55页
    2 转基因株系的基因组鉴定第55-56页
    3 转基因株系定量PCR验证表达量第56-58页
    4 转基因株系表型分析第58-73页
        4.1 向重力性表型分析第60-63页
        4.2 分生区长度测量实验第63-65页
        4.3 突变体中生长素标记株系DR5::GUS的表达第65-66页
        4.4 突变体中有丝分裂标记株系CycB1;1:GUS的表达第66-67页
        4.5 突变体中的生长素稳态平衡相关基因的定量PCR分析及极性运输载体的显微观察第67-71页
        4.6 突变体中根干细胞槽的变化第71-73页
    5 拟南芥AtIAA15基因表达模式第73-77页
    6 拟南芥AtIAA15下游ARFs靶基因的鉴定第77-80页
第四章 讨论第80-98页
    1 突变体中生长素极性运输对分生区长度的影响第85-86页
    2 突变体中生长素极性运输对向重力性的影响第86-90页
    3 超表达AtIAA15对根干细胞发育的影响第90-98页
参考文献第98-111页
在读期间发表和投稿的论文第111-112页
致谢第112页

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