| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 第一章文献综述 | 第13-29页 |
| 1 前言 | 第13-14页 |
| 2 门静脉血氨 | 第14-19页 |
| 2.1 门静脉血氨的来源 | 第14-18页 |
| 2.1.1 肠道微生物分解循环血液中的尿素 | 第14-16页 |
| 2.1.2 肠道微生物分解日粮蛋白质 | 第16页 |
| 2.1.3 肠道上皮细胞利用谷氨酰胺 | 第16-18页 |
| 2.2 门静脉血氨的影响因素 | 第18-19页 |
| 3 肝脏氨代谢理论 | 第19-24页 |
| 3.1 肝脏的基本结构 | 第19-20页 |
| 3.2 经典的氨代谢通路 | 第20-22页 |
| 3.2.1 门静脉周—尿素循环 | 第20-21页 |
| 3.2.2 肝静脉周—谷氨酰胺循环 | 第21-22页 |
| 3.3 肝脏尿素合成的调控 | 第22-24页 |
| 4 肝脏氨代谢与氨基酸代谢之间的关系 | 第24-25页 |
| 5 血插管技术和组学技术在营养代谢研究中的应用 | 第25-28页 |
| 5.1 血插管技术在动物营养研究中的应用 | 第26-27页 |
| 5.2 代谢组学在动物营养研究中的应用 | 第27-28页 |
| 6 本研究的目的与意义 | 第28-29页 |
| 第二章仔猪肝脏门静脉灌注技术的建立 | 第29-38页 |
| 1 前言 | 第29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-34页 |
| 2.1 试验动物 | 第29-30页 |
| 2.2 试验材料 | 第30页 |
| 2.2.1 药品与耗材 | 第30页 |
| 2.2.2 手术器械包 | 第30页 |
| 2.3 仔猪门静脉-肝静脉血管插管的安装 | 第30-32页 |
| 2.4 门静脉灌注技术 | 第32-34页 |
| 2.4.1 NH_4Cl灌注浓度的确定 | 第32-33页 |
| 2.4.2 NH_4Cl溶液的配制 | 第33页 |
| 2.4.3 门静脉灌注 | 第33页 |
| 2.4.4 样品采样 | 第33-34页 |
| 2.5 肝静脉血浆尿素浓度的测定 | 第34页 |
| 2.6 数据分析 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-36页 |
| 3.1 门静脉灌注技术 | 第34-35页 |
| 3.2 门静脉灌注NH_4Cl浓度对尿素的影响 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第三章门静脉血氨对仔猪肝脏氨基酸代谢的影响 | 第38-60页 |
| 1 前言 | 第38-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-48页 |
| 2.1 试验动物 | 第39页 |
| 2.2 试验材料 | 第39页 |
| 2.3 仔猪门静脉-肝静脉血管插管的安装 | 第39页 |
| 2.4 门静脉灌注NH_4Cl实验 | 第39页 |
| 2.5 基于GC-MS的代谢组学分析 | 第39-40页 |
| 2.5.1 血浆预处理 | 第39-40页 |
| 2.5.2 GC-MS分析 | 第40页 |
| 2.6 数字基因表达谱分析（RNA-seq(quantification)） | 第40-42页 |
| 2.6.1 总RNA的提取 | 第40页 |
| 2.6.2 Ion Proton测序 | 第40-41页 |
| 2.6.3 测序数据 | 第41页 |
| 2.6.4 基因注释 | 第41-42页 |
| 2.6.5 差异表达基因的筛选 | 第42页 |
| 2.7 荧光定量PCR验证 | 第42-44页 |
| 2.7.1 cDNA的制备 | 第43页 |
| 2.7.2 定量PCR检测 | 第43-44页 |
| 2.8 肝脏酶活性测定 | 第44页 |
| 2.9 仔猪原代肝细胞的分离与培养 | 第44-47页 |
| 2.9.1 相关试剂的配制 | 第44-45页 |
| 2.9.2 仔猪原代肝细胞的分离 | 第45-46页 |
| 2.9.3 仔猪原代肝细胞的培养 | 第46-47页 |
| 2.10 实验处理 | 第47页 |
| 2.10.1 GC-MS分析尿素和天冬氨酸中~(15)N同位素 | 第47页 |
| 2.10.2 GC-MS分析 | 第47页 |
| 2.10.3 同位素分析 | 第47页 |
| 2.11 数据分析 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-55页 |
| 3.1 样品GC-MS分析 | 第48-50页 |
| 3.2 不同浓度的NH_4Cl对肝脏血清代谢产物的影响 | 第50页 |
| 3.3 不同浓度的NH_4Cl对肝脏基因表达的影响 | 第50-53页 |
| 3.4 荧光定量PCR对测序结果的验证 | 第53-54页 |
| 3.5 不同浓度的NH_4Cl对肝脏代谢酶活性的影响 | 第54-55页 |
| 3.6 尿素和天冬氨酸中~(15)N丰度 | 第55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 5 小结 | 第58-60页 |
| 本研究的小结、创新点及尚未解决的问题 | 第60-61页 |
| 1 小结 | 第60页 |
| 2 创新点 | 第60页 |
| 3 待解决的问题 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-71页 |
| 附录 研究生在读期间发表的主要研究论文 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
