| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-22页 |
| 1.1 卵泡发育 | 第11-14页 |
| 1.1.1 卵泡发育所受的调控 | 第11-13页 |
| 1.1.2 颗粒细胞、卵母细胞与卵泡发育 | 第13-14页 |
| 1.2 microRNAs | 第14-16页 |
| 1.2.1 microRNA的生物合成 | 第15页 |
| 1.2.2 microRNA的作用机制 | 第15-16页 |
| 1.3 microRNAs与卵巢 | 第16-22页 |
| 1.3.1 microRNAs在卵巢中的表达 | 第16-17页 |
| 1.3.2 microRNAs与卵泡发育 | 第17页 |
| 1.3.3 microRNAs与卵巢类固醇激素的合成 | 第17-18页 |
| 1.3.4 microRNAs与卵巢颗粒细胞 | 第18-19页 |
| 1.3.5 猪卵巢中microRNAs的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3.6 miR-130a/16/381在小鼠卵巢中的研究进展 | 第21-22页 |
| 2 目的与意义 | 第22-23页 |
| 3 材料与方法 | 第23-35页 |
| 3.1 材料 | 第23-25页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 3.1.3 主要溶液及缓冲液 | 第23-24页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 3.2 方法 | 第25-34页 |
| 3.2.1 猪卵泡颗粒细胞的分离、培养 | 第25页 |
| 3.2.2 猪卵泡颗粒细胞传代 | 第25-26页 |
| 3.2.3 猪卵巢颗粒细胞的转染 | 第26-27页 |
| 3.2.4 猪卵泡颗粒细胞miRNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第27-28页 |
| 3.2.5 猪卵泡颗粒细胞总RNA的提取和cDNA第一反应链的合成 | 第28-29页 |
| 3.2.6 猪卵巢颗粒细胞miRNA的表达量分析 | 第29-31页 |
| 3.2.7 猪卵巢颗粒细胞的增殖检测 | 第31页 |
| 3.2.8 猪卵巢颗粒细胞的细胞周期检测 | 第31-32页 |
| 3.2.9 猪卵巢颗粒细胞的凋亡检测 | 第32-33页 |
| 3.2.10 猪卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌水平检测 | 第33页 |
| 3.2.11 RT-PCR检测增殖、凋亡、激素合成相关基因表达情况 | 第33-34页 |
| 3.3 统计分析 | 第34-35页 |
| 4 实验结果 | 第35-46页 |
| 4.1 miRNA-130a/16/381在猪颗粒细胞中的表达 | 第35页 |
| 4.2 猪颗粒细胞一次传代直观图 | 第35-36页 |
| 4.3 miR-130a/16/381在猪卵巢颗粒细胞中的作用研究 | 第36-43页 |
| 4.3.1 miR-130a/16/381的成功转入颗粒细胞 | 第36-38页 |
| 4.3.2 miR-130a/16/381对猪卵巢颗粒细胞增殖的影响 | 第38页 |
| 4.3.3 miR-130a/16/381对猪卵巢颗粒细胞周期的影响 | 第38-40页 |
| 4.3.4 miR-130a/16/381对猪卵巢颗粒细胞凋亡的影响 | 第40-41页 |
| 4.3.5 miR-130a/16/381对猪卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌的影响 | 第41-43页 |
| 4.4 miR-130a/16/381对猪颗粒细胞增殖、凋亡及类固醇激素合成相关基因mRNA水平的影响 | 第43-46页 |
| 4.4.1 miR-130a/16/381对猪颗粒细胞增殖相关基因PCNA表达的影响 | 第43页 |
| 4.4.2 miR-130a/16/381对猪颗粒细胞凋亡相关基因Bax/Bcl-2表达的影响 | 第43-44页 |
| 4.4.3 miR-130a/16/381对猪颗粒细胞类固醇激素合成相关基因mRNA水平的影响 | 第44-46页 |
| 5 讨论 | 第46-51页 |
| 5.1 miRNAs在颗粒细胞中的表达 | 第46页 |
| 5.2 miRNAs影响颗粒细胞的增殖 | 第46-47页 |
| 5.3 miRNAs影响颗粒细胞中类固醇激素的分泌 | 第47-49页 |
| 5.4 miR-130a/16/381对猪/小鼠卵巢颗粒细胞生长与功能影响的异同分析 | 第49-51页 |
| 6 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
