摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第17-36页 |
1.1 引言 | 第17页 |
1.2 掌叶覆盆子的概况 | 第17-28页 |
1.2.1 掌叶覆盆子基本情况 | 第18-19页 |
1.2.2 覆盆子开发利用现状 | 第19页 |
1.2.3 覆盆子的有效成分及其生物活性 | 第19-26页 |
1.2.4 掌叶覆盆子的生理活性 | 第26-28页 |
1.3 天然产物中活性成分的提取与分离 | 第28-31页 |
1.3.1 挥发油 | 第28-29页 |
1.3.2 黄酮类化合物 | 第29页 |
1.3.3 皂苷类化合物 | 第29-30页 |
1.3.4 多糖类 | 第30-31页 |
1.3.5 生物碱 | 第31页 |
1.4 细胞凋亡 | 第31-32页 |
1.5 巨噬细胞与炎症 | 第32-33页 |
1.6 本课题选题依据和研究内容 | 第33-36页 |
1.6.1 选题依据 | 第33页 |
1.6.2 研究目标 | 第33页 |
1.6.3 研究内容 | 第33-34页 |
1.6.4 拟采取的研究方法和技术路线 | 第34-36页 |
第二章 覆盆子挥发油提取、分离鉴定及活性评价 | 第36-51页 |
2.1 前言 | 第36页 |
2.2 实验材料与仪器 | 第36-38页 |
2.2.1 原料与试剂 | 第36-37页 |
2.2.2 仪器与设备 | 第37-38页 |
2.3 实验方法 | 第38-41页 |
2.3.1 水蒸气蒸馏法(SDE)提取覆盆子挥发油 | 第38页 |
2.3.2 索氏乙醇提取法(SE-ETHANOL)和索氏乙醚提取法(SE-ETHER)提取覆盆子挥发油 | 第38页 |
2.3.3 气相色谱-质谱法分离鉴定覆盆子挥发油成分 | 第38-39页 |
2.3.4 经典途径抗补体活性 | 第39-40页 |
2.3.5 抗肿瘤活性 | 第40-41页 |
2.3.6 统计分析 | 第41页 |
2.4 结果与讨论 | 第41-50页 |
2.4.1 不同方法提取覆盆子挥发油化学成分分析 | 第41-48页 |
2.4.2 不同方法提取得到的覆盆子挥发油抗补体活性评价 | 第48-49页 |
2.4.3 不同方法提取得到的覆盆子挥发油抗肿瘤活性评价 | 第49-50页 |
2.5 本章小结 | 第50-51页 |
第三章 覆盆子乙醇提取四大类物质及其活性研究 | 第51-80页 |
3.1 前言 | 第51页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第51-54页 |
3.2.1 材料与试剂 | 第51-53页 |
3.2.2 仪器与设备 | 第53-54页 |
3.3 实验方法 | 第54-63页 |
3.3.1 四大类物质的提取 | 第54-56页 |
3.3.2 四大类物质的含量测定 | 第56-58页 |
3.3.3 抗氧化活性的测定 | 第58-60页 |
3.3.4 抗补体活性的测定 | 第60-61页 |
3.3.5 抗肿瘤活性 | 第61页 |
3.3.6 覆盆子黄酮提取工艺的研究与优化 | 第61页 |
3.3.7 覆盆子黄酮中主要化合物的分离及结构鉴定 | 第61-62页 |
3.3.8 流式细胞仪检测覆盆子黄酮主要化合物对肿瘤细胞凋亡的影响 | 第62-63页 |
3.3.9 统计分析 | 第63页 |
3.4 结果与讨论 | 第63-78页 |
3.4.1 覆盆子四大类物质的含量及提取率 | 第63-64页 |
3.4.2 覆盆子四大类物质的抗氧化评价 | 第64-66页 |
3.4.3 覆盆子四大类物质抗补体活性评价 | 第66-67页 |
3.4.4 覆盆子四大类物质抗肿瘤活性评价 | 第67页 |
3.4.5 覆盆子黄酮提取工艺的研究与优化 | 第67-76页 |
3.4.6 覆盆子黄酮中主要化合物的结构鉴定 | 第76-77页 |
3.4.7 椴树苷对人肺癌细胞A549凋亡的影响 | 第77-78页 |
3.5 本章小结 | 第78-80页 |
第四章 覆盆子中小分子活性物质的分离纯化、结构鉴定及活性评价 | 第80-105页 |
4.1 前言 | 第80页 |
4.2 实验材料与仪器 | 第80-82页 |
4.2.1 材料与试剂 | 第80-81页 |
4.2.2 仪器与设备 | 第81-82页 |
4.3 实验方法 | 第82-89页 |
4.3.1 覆盆子 95%乙醇粗提物的制备及其有机溶剂的分级萃取 | 第82-83页 |
4.3.2 抗氧化活性的测定 | 第83页 |
4.3.3 抗炎活性的测定 | 第83-85页 |
4.3.4 抗肿瘤活性的测定 | 第85-86页 |
4.3.5 化合物的分离与纯化 | 第86-89页 |
4.3.6 统计分析 | 第89页 |
4.4 结果与讨论 | 第89-104页 |
4.4.1 覆盆子乙醇粗提取物及4个极性部位的抗氧化活性评价 | 第89-92页 |
4.4.2 覆盆子乙醇粗提取物及4个极性部位的抗炎活性评价 | 第92-96页 |
4.4.3 覆盆子乙醇粗提取物及4个极性部位的抗肿瘤活性评价 | 第96-97页 |
4.4.4 覆盆子乙酸乙酯部位提取分离得到的单体化合物结构鉴定 | 第97-104页 |
4.5 本章小结 | 第104-105页 |
第五章 覆盆子黄酮苷类化合物抗炎机制作用研究 | 第105-119页 |
5.1 前言 | 第105页 |
5.2 实验材料与仪器 | 第105-107页 |
5.2.1 材料与试剂 | 第105-106页 |
5.2.2 仪器与设备 | 第106-107页 |
5.3 实验方法 | 第107-110页 |
5.3.1 细胞系及培养 | 第107页 |
5.3.2 MTT法检测覆盆子黄酮苷类化合物对巨噬细胞生长的影响 | 第107页 |
5.3.3 GRIESS法检测覆盆子黄酮苷类化合物对巨噬细胞释放NO的影响 | 第107页 |
5.3.4 RT-PCR法检测椴树苷对巨噬细胞MRNA表达的影响 | 第107页 |
5.3.5 WESTERN BOLT法检测椴树苷对巨噬细胞信号通路的影响 | 第107-110页 |
5.3.6 统计分析 | 第110页 |
5.4 结果与讨论 | 第110-118页 |
5.4.1 覆盆子黄酮苷类化合物对巨噬细胞生长的影响 | 第110-111页 |
5.4.2 覆盆子黄酮苷类化合物对LPS诱导的巨噬细胞释放NO的影响 | 第111-112页 |
5.4.3 椴树苷对LPS诱导的巨噬细胞相关基因表达的影响 | 第112-116页 |
5.4.4 椴树苷对LPS诱导的巨噬细胞MAPKS信号通路的影响 | 第116-118页 |
5.5 本章小结 | 第118-119页 |
第六章 覆盆子单体化合物的抗肿瘤活性及作用机制研究 | 第119-137页 |
6.1 前言 | 第119页 |
6.2 实验材料与仪器 | 第119-120页 |
6.2.1 材料与试剂 | 第119-120页 |
6.2.2 仪器与设备 | 第120页 |
6.3 实验方法 | 第120-124页 |
6.3.1 细胞系及培养 | 第120页 |
6.3.2 肿瘤细胞形态观察及生长抑制率的测定 | 第120页 |
6.3.3 流式细胞仪检测委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对肿瘤细胞凋亡的影响 | 第120-121页 |
6.3.4 流式细胞仪检测委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对肿瘤细胞周期的影响 | 第121页 |
6.3.5 委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对肿瘤细胞内活性氧ROS水平的影响 | 第121-122页 |
6.3.6 委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对肿瘤细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)的影响 | 第122-123页 |
6.3.7 委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对肿瘤细胞相关基因表达的影响 | 第123-124页 |
6.3.8 WESTERN BOLT法检测委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对肿瘤细胞信号通路的影响 | 第124页 |
6.3.9 统计分析 | 第124页 |
6.4 结果与讨论 | 第124-135页 |
6.4.1 覆盆子单体化合物抑制不同肿瘤细胞增殖的能力 | 第124-126页 |
6.4.2 委陵菜酸对MCF-7 细胞增殖抑制能力的影响及形态学观察 | 第126-127页 |
6.4.3 委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对MCF-7 细胞凋亡的影响 | 第127-128页 |
6.4.4 委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对MCF-7 细胞周期的影响 | 第128-129页 |
6.4.5 委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对MCF-7 细胞内活性氧ROS水平的影响 | 第129-130页 |
6.4.6 委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对MCF-7 细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm)的影响 | 第130-131页 |
6.4.7 委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对MCF-7 细胞相关基因表达的影响 | 第131-133页 |
6.4.8 委陵菜酸(TORMENTIC ACID)对MCF-7 细胞信号通路的影响 | 第133-134页 |
6.4.9 委陵菜酸(TORMENTIC ACID)抑制MCF-7 细胞增殖的信号转导通路 | 第134-135页 |
6.5 本章小结 | 第135-137页 |
第七章 覆盆子多糖分离纯化、结构鉴定及活性评价 | 第137-167页 |
7.1 前言 | 第137页 |
7.2 实验材料与仪器 | 第137-140页 |
7.2.1 材料与试剂 | 第137-139页 |
7.2.2 仪器与设备 | 第139-140页 |
7.3 实验方法 | 第140-145页 |
7.3.1 覆盆子果实、叶粗多糖的提取 | 第140页 |
7.3.2 覆盆子果实、叶粗多糖的脱色、脱蛋白以及醇沉 | 第140-141页 |
7.3.3 覆盆子果实、叶粗多糖抗氧化活性的测定 | 第141页 |
7.3.4 覆盆子果实、叶粗多糖抗肿瘤活性的测定 | 第141页 |
7.3.5 覆盆子果实、叶粗多糖抗炎活性的测定 | 第141页 |
7.3.6 总多糖含量的测定 | 第141页 |
7.3.7 覆盆子叶粗多糖提取工艺的研究与优化 | 第141-142页 |
7.3.8 覆盆子果实、叶粗多糖成分含量的测定 | 第142-143页 |
7.3.9 覆盆子果实、叶粗多糖的离子交换柱层析 | 第143-144页 |
7.3.10 覆盆子果实、叶粗多糖的紫外光谱扫描 | 第144页 |
7.3.11 覆盆子果实、叶粗多糖的红外光谱扫描 | 第144页 |
7.3.12 覆盆子果实、叶纯化多糖的分子量测定 | 第144页 |
7.3.13 覆盆子果实、叶纯化多糖的单糖组成分析 | 第144-145页 |
7.3.14 统计分析 | 第145页 |
7.4 结果与讨论 | 第145-165页 |
7.4.1 覆盆子果实、叶粗多糖的抗氧化比较 | 第145-146页 |
7.4.2 覆盆子果实、叶粗多糖对巨噬细胞生长的影响 | 第146-147页 |
7.4.3 覆盆子果实、叶粗多糖对LPS诱导的巨噬细胞释放NO的影响 | 第147-148页 |
7.4.4 覆盆子果实、叶粗多糖对LPS诱导的巨噬细胞形态的影响 | 第148-149页 |
7.4.5 覆盆子果实、叶粗多糖对LPS诱导的巨噬细胞相关基因表达的影响 | 第149-152页 |
7.4.6 覆盆子果实、叶粗多糖的抗肿瘤活性评价 | 第152-153页 |
7.4.7 覆盆子叶粗多糖(L-PS)提取工艺的研究与优化 | 第153-159页 |
7.4.8 覆盆子果实、叶粗多糖的理化性质研究 | 第159-161页 |
7.4.9 覆盆子果实、叶粗多糖的离子交换柱层析 | 第161页 |
7.4.10 覆盆子果实纯化多糖F-PS-3 和叶纯化多糖L-PS-1 的分子量测定 | 第161-163页 |
7.4.11 覆盆子果实纯化多糖F-PS-3 和叶纯化多糖L-PS-1 的单糖组成分析 | 第163-165页 |
7.5 本章小结 | 第165-167页 |
结论与展望 | 第167-171页 |
1. 结论 | 第167-169页 |
2. 创新点 | 第169-170页 |
3. 展望 | 第170-171页 |
参考文献 | 第171-188页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第188-191页 |
致谢 | 第191-193页 |
附件 | 第193页 |