| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略语表 | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-16页 |
| 1. 核盘菌及菌核病 | 第10-11页 |
| 2. 菌核病的防治 | 第11页 |
| 3. 草酸是抗菌核病转基因育种的重要靶标 | 第11-14页 |
| 3.1 草酸是核盘菌致病过程中重要的致病因子 | 第11-12页 |
| 3.2 草酸在植物中的生物学意义 | 第12-13页 |
| 3.3 代谢草酸的酶类 | 第13-14页 |
| 3.3.1 草酸氧化酶 | 第13页 |
| 3.3.2 乙酰CoA脱羧酶 | 第13页 |
| 3.3.3 草酸脱羧酶 | 第13-14页 |
| 3.4 草酸降解酶在转基因中的研究进展 | 第14页 |
| 4. 本研究的目的意义 | 第14-16页 |
| 第二章 核盘菌草酸脱羧酶基因抗菌核病潜能评价体系的建立 | 第16-38页 |
| 1 材料与方法 | 第16-29页 |
| 1.1 核盘菌中的草酸脱羧酶基因 | 第16-17页 |
| 1.2 酶与引物设计 | 第17页 |
| 1.3 核盘菌草酸脱羧酶基因的克隆及组成型表达载体的构建 | 第17-22页 |
| 1.3.1 菌丝的培养与收集 | 第18页 |
| 1.3.2 RNArose抽提总RNA | 第18页 |
| 1.3.3 RT-PCR克隆草酸脱羧酶基因编码区全长 | 第18-19页 |
| 1.3.4 草酸脱羧酶基因编码区全长的纯化回收 | 第19页 |
| 1.3.5 草酸脱羧酶基因编码区全长连接T载体与转化大肠杆菌 | 第19-20页 |
| 1.3.6 碱裂解法抽提质粒T-OXDC | 第20页 |
| 1.3.7 大豆DNA的抽提 | 第20页 |
| 1.3.8 异黄酮合成酶Ⅰ非编码区的克隆 | 第20-21页 |
| 1.3.9 草酸脱羧酶组成型表达载体的组建 | 第21-22页 |
| 1.4 核盘菌草酸脱羧酶基因病毒介导表达载体的构建 | 第22-23页 |
| 1.5 农杆菌的电击转化 | 第23-24页 |
| 1.6 拟南芥草酸脱羧酶组成型表达的建立 | 第24-25页 |
| 1.6.1 拟南芥的种植 | 第24页 |
| 1.6.2 拟南芥的转化 | 第24-25页 |
| 1.6.3 拟南芥转化子的鉴定 | 第25页 |
| 1.6.4 拟南芥转化子的抗病性评价 | 第25页 |
| 1.7 大豆的转化 | 第25-28页 |
| 1.7.1 培养基的配制 | 第25-27页 |
| 1.7.2 大豆品种的选择 | 第27页 |
| 1.7.3 大豆转化基本步骤 | 第27-28页 |
| 1.8 大豆、油菜草酸脱羧酶病毒介导表达的建立 | 第28页 |
| 1.8.1 植株与农杆菌的的准备 | 第28页 |
| 1.8.2 大豆、油菜的处理 | 第28页 |
| 1.8.3 病毒介导表达oxdc的大豆与油菜抗病性评价 | 第28页 |
| 1.9 甲酸对植物的毒性 | 第28-29页 |
| 1.10 甲酸对核盘菌的毒性 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-37页 |
| 2.1 核盘菌草酸脱羧酶基因的克隆 | 第29-30页 |
| 2.2 拟南芥转化子的鉴定与抗病性评价 | 第30-32页 |
| 2.3 大豆的转化 | 第32-33页 |
| 2.4 病毒介导表达oxdc的大豆与油菜的抗病性评价 | 第33-34页 |
| 2.4.1 大豆的抗病性评价 | 第33-34页 |
| 2.4.2 油菜的抗病性评价 | 第34页 |
| 2.5 甲酸对植物的毒性 | 第34-35页 |
| 2.6 甲酸对核盘菌的毒性 | 第35-37页 |
| 3 结论与展望 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 附录 | 第43-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
