| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 缩略词 | 第10-11页 |
| 1 绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 引言 | 第11-12页 |
| 1.2 研究背景 | 第12-17页 |
| 1.2.1 莱氏野村菌概况 | 第12页 |
| 1.2.2 微菌核研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.3 生防真菌抗逆生物学 | 第13-15页 |
| 1.2.4 sod基因的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3 研究目的 | 第17页 |
| 1.4 研究内容 | 第17-18页 |
| 1.5 技术路线 | 第18-19页 |
| 1.6 本研究的创新之处 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 菌株和载体 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.2 研究方法 | 第22-33页 |
| 2.2.1 菌种活化与孢悬液的制备 | 第22页 |
| 2.2.2 微菌核的诱导培养 | 第22-23页 |
| 2.2.3 莱氏野村菌基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.4 莱氏野村菌RNA提取及反转录 | 第24-25页 |
| 2.2.5 Nrsod1和Nrsod2基因的克隆 | 第25-26页 |
| 2.2.6 Nrsod1和Nrsod2左右臂序列的扩增 | 第26页 |
| 2.2.7 Nrsod1和Nrsod2基因生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 2.2.8 大肠杆菌感受态细胞制备与转化 | 第27-28页 |
| 2.2.9 农杆菌感受态细胞制备与转化 | 第28页 |
| 2.2.10 Nrsod1和Nrsod2基因敲除载体构建 | 第28-29页 |
| 2.2.11 农杆菌介导的莱氏野村菌遗传转化 | 第29页 |
| 2.2.12 突变体初步筛选 | 第29-30页 |
| 2.2.13 敲除突变株表型分析 | 第30-32页 |
| 2.2.14 实时荧光定量PCR | 第32页 |
| 2.2.15 毒力测定 | 第32页 |
| 2.2.16 数据统计及显著性分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-53页 |
| 3.1 Nrsod1和Nrsod2基因克隆与分析 | 第33-36页 |
| 3.1.1 Nrsod1和Nrsod2基因克隆 | 第33页 |
| 3.1.2 Nrsod1和Nrsod2基因生物信息学分析 | 第33-35页 |
| 3.1.3 同源比对及系统进化分析 | 第35-36页 |
| 3.2 敲除载体构建与突变菌株筛选验证 | 第36-40页 |
| 3.2.1 敲除载体构建 | 第36-39页 |
| 3.2.2 突变菌株筛选验证 | 第39-40页 |
| 3.3 基因敲除对莱氏野村菌性状及功能的影响 | 第40-51页 |
| 3.3.1 莱氏野村菌在培养条件下生长发育基本情况分析 | 第40-43页 |
| 3.3.2 胁迫条件下菌株表型分析 | 第43-46页 |
| 3.3.3 △Nrsod1和△Nrsod2基因对微菌核形成的影响 | 第46-48页 |
| 3.3.4 Nrsod1和Nrsod2基因表达模式分析 | 第48-51页 |
| 3.4 Nrsod1和Nrsod2基因对毒力的影响分析 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-57页 |
| 5 主要结论与后续工作 | 第57-59页 |
| 5.1 主要研究结论 | 第57页 |
| 5.2 后续工作建议 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附件 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 附录 | 第67页 |
| A. 作者在攻读硕士学位期间发表论文目录 | 第67页 |
| B. 作者在攻读硕士学位期间参与科研项目 | 第67页 |
