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探究颗粒细胞中miR-26a/b介导雌激素调控孕酮受体的分子机制

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
英文缩略词对照表第9-10页
1 绪论第10-19页
    1.1 排卵分子机制第10-11页
        1.1.1 排卵的激素控制第10页
        1.1.2 排卵的人工控制第10页
        1.1.3 控制排卵的关键基因第10-11页
    1.2 颗粒细胞对于排卵的重要作用第11-12页
    1.3 PGR对排卵的关键作用第12-14页
    1.4 MicroRNA在卵泡发育过程中的重要作用第14-15页
    1.5 miRNA介导E2/ER对PGR的调控第15-17页
    1.6 研究目的与意义第17-19页
2 实验材料及方法第19-36页
    2.1 实验材料第19-25页
        2.1.1 实验动物与饲养管理第19页
        2.1.2 主要实验试剂与耗材第19-20页
        2.1.3 主要试剂盒第20页
        2.1.4 主要抗体第20-21页
        2.1.5 主要内切酶及载体第21页
        2.1.6 主要实验仪器第21页
        2.1.7 实验用部分溶液及其配制方法第21-22页
        2.1.8 定量引物及酶切引物设计第22-24页
        2.1.9 分析工具软件与网站第24-25页
    2.2 实验方法及步骤第25-36页
        2.2.1 小鼠的常规饲养第25页
        2.2.2 卵巢组织的分离及纯化第25页
        2.2.3 颗粒细胞分离纯化第25-26页
        2.2.4 细胞培养第26页
        2.2.5 质粒的提取第26-27页
        2.2.6 载体的构建第27-30页
        2.2.7 转染第30-31页
        2.2.8 荧光素酶报告实验第31-32页
        2.2.9 药物处理KGN细胞第32页
        2.2.10 RNA的提取及反转录第32-33页
        2.2.11 Western Blot分析蛋白表达第33-35页
        2.2.12 统计学分析第35-36页
3 实验结果第36-50页
    3.1 miRNA调控PGR的表达第36-41页
        3.1.1 MiRNA靶位点预测第36-37页
        3.1.2 MiR-26a/b特异性结合pgr的 3’UTR序列第37-38页
        3.1.3 KGN细胞中,miR-26a/b调控PGR的表达第38-40页
        3.1.4 小结与讨论第40-41页
    3.2 KGN细胞中,miR-26a/b介导E2对PGR的调控第41-47页
        3.2.1 E2调控内源性miR-26a/b及pgr,ppar-γ 和adamts-1的表达第41-43页
        3.2.2 ER-β参与E2对miR-26a/b的调控第43-45页
        3.2.3 KGN细胞中,miR-26a/b介导E2对pgr,ppar-γ,adamts-1的调控第45-46页
        3.2.4 小结与讨论第46-47页
    3.3 体内实验证实E2调控miRNA-26a/b和pgr的表达第47-50页
        3.3.1 E2调控内源性miRNA-26a/b和PGR等基因的表达第47-48页
        3.3.3 小结与讨论第48-50页
4 结论与展望第50-56页
    4.1 总结第50-53页
    4.2 讨论第53-55页
    4.3 后续实验研究及展望第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-64页
附录第64页
    A 作者在攻读硕士学位期间所发表的文章目录第64页

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