中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
英文缩略词对照表 | 第9-10页 |
1 绪论 | 第10-19页 |
1.1 排卵分子机制 | 第10-11页 |
1.1.1 排卵的激素控制 | 第10页 |
1.1.2 排卵的人工控制 | 第10页 |
1.1.3 控制排卵的关键基因 | 第10-11页 |
1.2 颗粒细胞对于排卵的重要作用 | 第11-12页 |
1.3 PGR对排卵的关键作用 | 第12-14页 |
1.4 MicroRNA在卵泡发育过程中的重要作用 | 第14-15页 |
1.5 miRNA介导E2/ER对PGR的调控 | 第15-17页 |
1.6 研究目的与意义 | 第17-19页 |
2 实验材料及方法 | 第19-36页 |
2.1 实验材料 | 第19-25页 |
2.1.1 实验动物与饲养管理 | 第19页 |
2.1.2 主要实验试剂与耗材 | 第19-20页 |
2.1.3 主要试剂盒 | 第20页 |
2.1.4 主要抗体 | 第20-21页 |
2.1.5 主要内切酶及载体 | 第21页 |
2.1.6 主要实验仪器 | 第21页 |
2.1.7 实验用部分溶液及其配制方法 | 第21-22页 |
2.1.8 定量引物及酶切引物设计 | 第22-24页 |
2.1.9 分析工具软件与网站 | 第24-25页 |
2.2 实验方法及步骤 | 第25-36页 |
2.2.1 小鼠的常规饲养 | 第25页 |
2.2.2 卵巢组织的分离及纯化 | 第25页 |
2.2.3 颗粒细胞分离纯化 | 第25-26页 |
2.2.4 细胞培养 | 第26页 |
2.2.5 质粒的提取 | 第26-27页 |
2.2.6 载体的构建 | 第27-30页 |
2.2.7 转染 | 第30-31页 |
2.2.8 荧光素酶报告实验 | 第31-32页 |
2.2.9 药物处理KGN细胞 | 第32页 |
2.2.10 RNA的提取及反转录 | 第32-33页 |
2.2.11 Western Blot分析蛋白表达 | 第33-35页 |
2.2.12 统计学分析 | 第35-36页 |
3 实验结果 | 第36-50页 |
3.1 miRNA调控PGR的表达 | 第36-41页 |
3.1.1 MiRNA靶位点预测 | 第36-37页 |
3.1.2 MiR-26a/b特异性结合pgr的 3’UTR序列 | 第37-38页 |
3.1.3 KGN细胞中,miR-26a/b调控PGR的表达 | 第38-40页 |
3.1.4 小结与讨论 | 第40-41页 |
3.2 KGN细胞中,miR-26a/b介导E2对PGR的调控 | 第41-47页 |
3.2.1 E2调控内源性miR-26a/b及pgr,ppar-γ 和adamts-1的表达 | 第41-43页 |
3.2.2 ER-β参与E2对miR-26a/b的调控 | 第43-45页 |
3.2.3 KGN细胞中,miR-26a/b介导E2对pgr,ppar-γ,adamts-1的调控 | 第45-46页 |
3.2.4 小结与讨论 | 第46-47页 |
3.3 体内实验证实E2调控miRNA-26a/b和pgr的表达 | 第47-50页 |
3.3.1 E2调控内源性miRNA-26a/b和PGR等基因的表达 | 第47-48页 |
3.3.3 小结与讨论 | 第48-50页 |
4 结论与展望 | 第50-56页 |
4.1 总结 | 第50-53页 |
4.2 讨论 | 第53-55页 |
4.3 后续实验研究及展望 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
附录 | 第64页 |
A 作者在攻读硕士学位期间所发表的文章目录 | 第64页 |