| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 主要英文缩略词索引 | 第15-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-25页 |
| 一、高糖高脂研究现状及其危害 | 第16-17页 |
| 二、2 型糖尿病及其微血管并发症 | 第17-18页 |
| 三、miRNA与糖脂代谢异常相关性疾病 | 第18-25页 |
| 3.1 miRNA与高糖高脂 | 第19-20页 |
| 3.2 miRNA与2型糖尿病及其微血管并发症 | 第20-22页 |
| 3.3 循环miRNA参与糖脂代谢异常的发生发展 | 第22-25页 |
| 3.3.1 循环miRNA-一类新型生物标志物 | 第22-23页 |
| 3.3.2 循环miRNA与高糖高脂 | 第23-24页 |
| 3.3.3 循环miRNA与2型糖尿病及其微血管并发症 | 第24-25页 |
| 第二章 高糖高脂人群血清miRNA表达谱测定及临床价值研究 | 第25-38页 |
| 一、引言 | 第25页 |
| 二、实验材料与方法 | 第25-29页 |
| 2.1 研究对象 | 第25-26页 |
| 2.2 仪器及试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.1 本课题所用主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.2.2 本课题所用主要化学试剂 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.3.1 标本收集与保存 | 第27页 |
| 2.3.2 生化指标测定 | 第27页 |
| 2.3.3 血清miRNA提取 | 第27-28页 |
| 2.3.4 Exiqon microRNA芯片技术初筛血清miRNA表达谱 | 第28页 |
| 2.3.5 实时荧光定量PCR | 第28-29页 |
| 三、统计学分析 | 第29-30页 |
| 四、实验结果 | 第30-37页 |
| 4.1 本部分研究对象的临床基本信息 | 第30页 |
| 4.2 基因芯片样本RNA提取结果 | 第30-31页 |
| 4.3 血清miRNA基因芯片结果 | 第31-33页 |
| 4.4 运用qRT-PCR对基因芯片及文献检索miRNA的验证结果 | 第33-35页 |
| 4.5 血清miR-33a用于高糖、高脂和高糖高脂患者诊断的ROC曲线 | 第35-36页 |
| 4.6 逻辑回归分析 | 第36-37页 |
| 五、讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 2型糖尿病及其微血管并发症患者血清miRNA水平测定及临床价值研究 | 第38-56页 |
| 一、引言 | 第38页 |
| 二、实验材料与方法 | 第38-40页 |
| 2.1 研究对象 | 第38-39页 |
| 2.2 仪器及试剂 | 第39页 |
| 2.3 研究方法 | 第39-40页 |
| 2.3.1 血清标本处理、RNA提取、逆转录和血清miRNA实时荧光定量PCR检测 | 第39页 |
| 2.3.2 血清exosome的提取 | 第39页 |
| 2.3.3 Exosomal和exosome-free RNA的提取 | 第39-40页 |
| 2.3.4 实时荧光定量PCR检测Exosome和exosome-free中miRNA | 第40页 |
| 三、统计学分析 | 第40页 |
| 四、实验结果 | 第40-51页 |
| 4.1 miR-16，miR-126 和mi R-221 实验结果 | 第40-43页 |
| 4.1.1 患者及对照临床资料及血生化指标测定结果 | 第40-41页 |
| 4.1.2 T2DM和T2DMC患者血清mi R-16，miR-126 和miR-221 水平检测 | 第41页 |
| 4.1.3 血清miR-16，miR-126 和miR-221 用于T2DM、T2DMC患者诊断的ROC曲线分析 | 第41-42页 |
| 4.1.4 逻辑回归分析 | 第42页 |
| 4.1.5 血清miRNA水平与生化指标相关性分析 | 第42-43页 |
| 4.2 miR-7 实验结果 | 第43-51页 |
| 4.2.1 本部分研究对象的临床资料及血生化指标测定结果 | 第43-44页 |
| 4.2.2 T2DM和T2DMC患者血清miR-7 水平 | 第44-45页 |
| 4.2.3 血清miR-7 存在形式 | 第45-47页 |
| 4.2.4 T2DM和T2DMC患者游离mi R-7 和exosome mi R-7 变化 | 第47-48页 |
| 4.2.5 药物治疗对血清miR-7 水平影响 | 第48-49页 |
| 4.2.6 血清miR-7 和exosome free miR-7 对于T2DM、T2DMC临床价值 | 第49页 |
| 4.2.7 循环miR-7 对T2DM及T2DMC患者诊断价值 | 第49-50页 |
| 4.2.8 循环miR-7 水平与生化指标的相关性分析 | 第50-51页 |
| 五、讨论 | 第51-56页 |
| 第四章 miR-661 参与高糖高脂诱导内皮细胞损伤分子机制研究 | 第56-67页 |
| 一、引言 | 第56-57页 |
| 二、实验材料与方法 | 第57-61页 |
| 2.1 实验细胞 | 第57页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第57-58页 |
| 2.3 细胞培养 | 第58-59页 |
| 2.3.1 细胞所需的培养液及条件 | 第58页 |
| 2.3.2 细胞复苏 | 第58-59页 |
| 2.3.3 细胞冻存 | 第59页 |
| 2.3.3 细胞传代 | 第59页 |
| 2.3.4 高糖高脂诱导血管内皮细胞损伤模型构建 | 第59页 |
| 2.4 细胞RNA的提取 | 第59-60页 |
| 2.5 细胞蛋白的提取（常用6孔板）： | 第60页 |
| 2.6 Western Blot技术检测PGC-1α 蛋白表达水平 | 第60-61页 |
| 三、统计学分析 | 第61页 |
| 四、实验结果 | 第61-65页 |
| 4.1 生物信息学预测结果 | 第61-62页 |
| 4.2 细胞模型构建 | 第62-63页 |
| 4.3 HAEC中miRNA的检测 | 第63-64页 |
| 4.4 HAEC中PGC-1α 蛋白的检测 | 第64-65页 |
| 4.5 荧光素酶实验结果 | 第65页 |
| 五、讨论 | 第65-67页 |
| 全文小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-80页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
