| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-15页 |
| 1.1 链霉菌 | 第11-12页 |
| 1.1.1 链霉菌简介 | 第11页 |
| 1.1.2 链霉菌的生长发育 | 第11-12页 |
| 1.1.3 链霉菌的次级代谢产物 | 第12页 |
| 1.2 双组份信号转导系统 | 第12-14页 |
| 1.2.1 双组份信号转导系统的简介 | 第12-13页 |
| 1.2.2 非典型双组份信号系统的简介 | 第13-14页 |
| 1.3 与链霉菌生长发育和次级代谢物合成相关基因的简介 | 第14页 |
| 1.4 立题依据与研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 M145菌株的部分TCS突变菌株构建与表型分析 | 第15-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-20页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第15-17页 |
| 2.1.2 引物 | 第17-18页 |
| 2.1.3 培养基及培养条件 | 第18-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-23页 |
| 2.2.1 天蓝色链霉菌的培养及菌种的保藏 | 第20页 |
| 2.2.2 天蓝色链霉菌基因组的提取 | 第20页 |
| 2.2.3 缺失突变菌株的构建 | 第20-23页 |
| 2.2.4 天蓝色链霉菌的表型分析 | 第23页 |
| 2.3 实验结果 | 第23-29页 |
| 2.3.1 Southern blotting筛选基因阳性克隆 | 第23-24页 |
| 2.3.2 缺失突变菌株的验证 | 第24-26页 |
| 2.3.3 天蓝色链霉菌的表型分析 | 第26-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 sco1135基因对M145菌株孢子生长的影响 | 第31-41页 |
| 3.1 实验材料 | 第31-33页 |
| 3.1.1 菌株及质粒 | 第31-32页 |
| 3.1.2 引物 | 第32-33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 sco1135 回补菌株的构建 | 第33-34页 |
| 3.2.2 回补菌株的表型分析 | 第34页 |
| 3.2.3 qRT-PCR分析孢子生长相关基因的表达 | 第34-35页 |
| 3.3 实验结果 | 第35-40页 |
| 3.3.1 sco1135回补菌株的构建 | 第35-37页 |
| 3.3.2 △sco1135和△sco1135com的表型分析 | 第37-38页 |
| 3.3.3 孢子形成相关基因转录水平的定量分析 | 第38-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 sco1135基因对M145菌株次级代谢产物合成的影响 | 第41-48页 |
| 4.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 4.1.1 菌株 | 第41页 |
| 4.1.2 引物 | 第41-42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.2.1 ACT、RED产量和菌体生长曲线的定量测定 | 第42-43页 |
| 4.2.2 天蓝色链霉菌中钙依赖性抗生素（CDA）的检测 | 第43页 |
| 4.2.3 qRT-PCR分析ACT和CDA合成基因的表达 | 第43页 |
| 4.3 实验结果 | 第43-46页 |
| 4.3.1 ACT、RED和菌体干重的定量测定 | 第43-45页 |
| 4.3.2 sco1135对CDA合成的调控 | 第45页 |
| 4.3.3 ACT和CDA合成相关基因转录水平的定量分析 | 第45-46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 SCO1135基因的异源表达和纯化 | 第48-55页 |
| 5.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 5.1.1 菌株和质粒 | 第48页 |
| 5.1.2 引物 | 第48-49页 |
| 5.1.3 试剂 | 第49页 |
| 5.2 实验方法 | 第49-52页 |
| 5.2.1 sco1135表达载体的构建 | 第49-50页 |
| 5.2.2 sco1135蛋白的诱导表达 | 第50页 |
| 5.2.3 sco1135蛋白的分析 | 第50-51页 |
| 5.2.4 目的蛋白的纯化 | 第51-52页 |
| 5.3 实验结果 | 第52-53页 |
| 5.3.1 sco1135蛋白表达载体的构建 | 第52-53页 |
| 5.3.2 sco1135蛋白的纯化 | 第53页 |
| 5.4 讨论 | 第53-55页 |
| 第六章 总结与展望 | 第55-57页 |
| 6.1 总结 | 第55页 |
| 6.2 展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 附录 | 第63页 |
