| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第9-19页 |
| 1.1 引言 | 第9页 |
| 1.2 立题依据 | 第9-15页 |
| 1.2.1 宿主防卫反应及抗真菌 Toll 通路相关研究 | 第9-12页 |
| 1.2.2 真菌细胞壁的组成 | 第12-13页 |
| 1.2.3 真菌细胞壁与宿主免疫识别 | 第13-15页 |
| 1.2.4 真菌壳聚糖及相关研究进展 | 第15页 |
| 1.3 研究目的 | 第15-16页 |
| 1.4 研究内容和技术路线 | 第16-18页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第16-17页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第17-18页 |
| 1.5 本研究创新之处 | 第18-19页 |
| 2 东亚飞蝗感知蝗绿僵菌细胞壁成分物质的分析 | 第19-39页 |
| 2.1 主要材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第19页 |
| 2.1.2 供试昆虫 | 第19页 |
| 2.1.3 主要实验试剂和试剂盒 | 第19-20页 |
| 2.1.4 主要培养基及溶液 | 第20页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.1.6 主要使用软件 | 第20-21页 |
| 2.2 主要方法 | 第21-31页 |
| 2.2.1 多糖悬液的制备 | 第21页 |
| 2.2.2 供试东亚飞蝗的接种 | 第21页 |
| 2.2.3 东亚飞蝗脂肪体 RNA 的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.4 反转录 PCR | 第22-23页 |
| 2.2.5 半定量及定量 PCR 检测 Toll 通路相关基因表达情况 | 第23-25页 |
| 2.2.6 半定量及定量 PCR 检测大分子壳聚糖是否降解为小分子 | 第25页 |
| 2.2.7 海带多糖和壳聚糖的 FITC 标记 | 第25-27页 |
| 2.2.8 东亚飞蝗接种荧光标记多糖与血淋巴的提取 | 第27页 |
| 2.2.9 接种东亚飞蝗血淋巴的荧光观察 | 第27页 |
| 2.2.10 壳聚糖 beads 的制备及柱装填 | 第27页 |
| 2.2.11 东亚飞蝗体表蛋白的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.12 东亚飞蝗体表蛋白与壳聚糖的亲和层析 | 第28-31页 |
| 2.3 结果与分析 | 第31-35页 |
| 2.3.1 多糖点滴东亚飞蝗后东亚飞蝗脂肪体 Toll 通路基因的上调表达 | 第31-32页 |
| 2.3.2 大分子壳聚糖并未广泛降解 | 第32-33页 |
| 2.3.3 FITC 标记海带多糖和壳聚糖发现海带多糖和小分子壳聚糖能渗透进入东亚飞蝗血淋巴 | 第33-34页 |
| 2.3.4 亲和层析鉴定东亚飞蝗体表是否有与壳聚糖亲和的蛋白 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-39页 |
| 3 蝗绿僵菌壳聚糖的提取鉴定及其与东亚飞蝗血细胞互作 | 第39-57页 |
| 3.1 主要材料 | 第39-40页 |
| 3.1.1 供试菌株和昆虫 | 第39页 |
| 3.1.2 主要实验试剂和试剂盒 | 第39页 |
| 3.1.3 主要培养基及溶液 | 第39页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 3.1.5 主要使用软件 | 第40页 |
| 3.2 主要方法 | 第40-45页 |
| 3.2.1 东亚飞蝗血清的制备 | 第40页 |
| 3.2.2 蝗绿僵菌细胞壁物质壳聚糖的检测 | 第40页 |
| 3.2.3 蝗绿僵菌菌丝壳聚糖的提取 | 第40-41页 |
| 3.2.4 提取的蝗绿僵菌菌丝壳聚糖与商业壳聚糖进行傅里叶红外变换光谱（FT-IR）比对 | 第41页 |
| 3.2.5 提取的蝗绿僵菌菌丝壳聚糖与商业壳聚糖进行 X-射线衍射（XRD）比对 | 第41-42页 |
| 3.2.6 提取的蝗绿僵菌菌丝壳聚糖与商业壳聚糖进行1H 核磁共振（1NMR）比对 | 第42-43页 |
| 3.2.7 壳聚糖溶液的制备 | 第43页 |
| 3.2.8 东亚飞蝗血淋巴在壳聚糖诱导后的酚氧化酶（PO）活性检测 | 第43-44页 |
| 3.2.9 东亚飞蝗血淋巴在壳聚糖诱导后反应活性氧（ROS）活性检测 | 第44页 |
| 3.2.10 壳聚糖与东亚飞蝗血细胞的互作 | 第44-45页 |
| 3.2.11 壳聚糖配比加入蝗绿僵菌孢悬液对东亚飞蝗的毒力测试 | 第45页 |
| 3.3 结果与分析 | 第45-54页 |
| 3.3.1 检测壳聚糖是否为蝗绿僵菌的细胞壁成分 | 第45-46页 |
| 3.3.2 蝗绿僵菌壳聚糖的产量 | 第46-47页 |
| 3.3.3 提取的蝗绿僵菌菌丝壳聚糖与商业壳聚糖进行傅里叶红外变换光谱（FT-IR）比对 | 第47页 |
| 3.3.4 提取的蝗绿僵菌菌丝壳聚糖与商业壳聚糖进行 X-射线衍射（XRD）比对 | 第47-48页 |
| 3.3.5 提取的蝗绿僵菌菌丝壳聚糖与商业壳聚糖进行1H 核磁共振（1NMR）比对 | 第48-49页 |
| 3.3.6 壳聚糖能激活血淋巴的酚氧化酶（phenoloxidase, PO）信号 | 第49-51页 |
| 3.3.7 东亚飞蝗血淋巴在壳聚糖诱导后反应活性氧（ROS）活性检测 | 第51-52页 |
| 3.3.8 壳聚糖与血细胞的互作及共定位 | 第52-53页 |
| 3.3.9 壳聚糖配比加入蝗绿僵菌孢悬液对东亚飞蝗的毒力测试 | 第53-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-57页 |
| 4 主要结论及后续工作 | 第57-59页 |
| 4.1 主要研究结论 | 第57-58页 |
| 4.2 后续实验建议 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
