摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第18-28页 |
1.1 研究目的和意义 | 第18-19页 |
1.2 国内外研究进展 | 第19-26页 |
1.2.1 概论 | 第19-21页 |
1.2.2 嗜酸乳杆菌的研究进展 | 第21-23页 |
1.2.3 重组乳酸菌的研究进展 | 第23页 |
1.2.4 GFP的研究进展 | 第23-24页 |
1.2.5 EGF的研究进展 | 第24-25页 |
1.2.6 pSET4s的简介及应用 | 第25-26页 |
1.3 小结与展望 | 第26-27页 |
1.4 研究目标和内容 | 第27-28页 |
第二章 试验研究 | 第28-85页 |
试验一 pSET4s用于构建嗜酸乳杆菌基因重组菌可行性分析 | 第28-35页 |
1.1 材料与方法 | 第28-33页 |
1.1.1 试验材料 | 第28-31页 |
1.1.2 试验方法 | 第31-33页 |
1.2 结果与分析 | 第33-34页 |
1.2.1 pSET4s质粒转化入嗜酸乳杆菌的最佳转化条件 | 第33页 |
1.2.2 pSET4s温敏型穿梭质粒用于嗜酸乳杆菌基因重组的可行性研究 | 第33-34页 |
1.3 讨论 | 第34页 |
1.4 小结 | 第34-35页 |
试验二 共表达EGF和GFP的重组嗜酸乳杆菌的构建 | 第35-59页 |
2.1 材料与方法 | 第35-51页 |
2.1.1 试验材料 | 第35-38页 |
2.1.2 试验方法 | 第38-51页 |
2.2 结果与分析 | 第51-57页 |
2.2.1 嗜酸乳杆菌上下游同源臂的扩增及序列分析 | 第51-53页 |
2.2.2 EGF基因片段的PCR扩增 | 第53页 |
2.2.3 GFP基因片段的PCR扩增 | 第53-54页 |
2.2.4 EGF基因和GFP基因的拼接 | 第54页 |
2.2.5 重组质粒的酶切鉴定 | 第54-56页 |
2.2.6 重组嗜酸乳杆菌的PCR扩增 | 第56页 |
2.2.7 重组嗜酸乳杆菌的Southern杂交 | 第56-57页 |
2.3 讨论 | 第57页 |
2.4 小结 | 第57-59页 |
试验三 重组嗜酸乳杆菌的生物学特性研究 | 第59-73页 |
3.1 材料与方法 | 第59-64页 |
3.1.1 试验材料 | 第59-61页 |
3.1.2 试验方法 | 第61-64页 |
3.2 结果与分析 | 第64-71页 |
3.2.1 重组嗜酸乳杆菌的荧光显微镜观察 | 第64-65页 |
3.2.2 重组嗜酸乳杆菌诱导表达条件的摸索 | 第65页 |
3.2.3 重组嗜酸乳杆菌考马斯亮蓝检测和Western blot分析 | 第65-67页 |
3.2.4 重组嗜酸乳杆菌的EGF的ELISA检测 | 第67页 |
3.2.5 重组嗜酸乳杆菌的遗传稳定性研究 | 第67页 |
3.2.6 重组嗜酸乳杆菌生长特性的研究 | 第67-69页 |
3.2.7 重组嗜酸乳杆菌耐酸性的研究 | 第69-70页 |
3.2.8 重组嗜酸乳杆菌耐胆盐的研究 | 第70-71页 |
3.3 讨论 | 第71-72页 |
3.4 小结 | 第72-73页 |
试验四 重组嗜酸乳杆菌对小鼠肠道益生及修复作用的研究 | 第73-85页 |
4.1 材料与方法 | 第73-76页 |
4.1.1 试验材料 | 第73页 |
4.1.2 试验动物与设计 | 第73-74页 |
4.1.3 日粮组成 | 第74-75页 |
4.1.4 饲养管理 | 第75页 |
4.1.5 样品采集 | 第75页 |
4.1.6 测定指标与方法 | 第75页 |
4.1.7 数据与分析 | 第75-76页 |
4.2 结果与分析 | 第76-81页 |
4.2.1 0-7d小鼠小肠形态结构 | 第76页 |
4.2.2 0-15d小鼠小肠形态结构 | 第76-81页 |
4.3 讨论 | 第81-84页 |
4.4 小结 | 第84-85页 |
第三章 结论和建议 | 第85-86页 |
1 主要结论 | 第85页 |
2 创新点 | 第85页 |
3 有待进一步研究的问题 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
硕士研究生期间研究成果 | 第93页 |