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共表达GFP和猪EGF重组嗜酸乳杆菌的构建及其生物学特性研究

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 绪论第18-28页
    1.1 研究目的和意义第18-19页
    1.2 国内外研究进展第19-26页
        1.2.1 概论第19-21页
        1.2.2 嗜酸乳杆菌的研究进展第21-23页
        1.2.3 重组乳酸菌的研究进展第23页
        1.2.4 GFP的研究进展第23-24页
        1.2.5 EGF的研究进展第24-25页
        1.2.6 pSET4s的简介及应用第25-26页
    1.3 小结与展望第26-27页
    1.4 研究目标和内容第27-28页
第二章 试验研究第28-85页
    试验一 pSET4s用于构建嗜酸乳杆菌基因重组菌可行性分析第28-35页
        1.1 材料与方法第28-33页
            1.1.1 试验材料第28-31页
            1.1.2 试验方法第31-33页
        1.2 结果与分析第33-34页
            1.2.1 pSET4s质粒转化入嗜酸乳杆菌的最佳转化条件第33页
            1.2.2 pSET4s温敏型穿梭质粒用于嗜酸乳杆菌基因重组的可行性研究第33-34页
        1.3 讨论第34页
        1.4 小结第34-35页
    试验二 共表达EGF和GFP的重组嗜酸乳杆菌的构建第35-59页
        2.1 材料与方法第35-51页
            2.1.1 试验材料第35-38页
            2.1.2 试验方法第38-51页
        2.2 结果与分析第51-57页
            2.2.1 嗜酸乳杆菌上下游同源臂的扩增及序列分析第51-53页
            2.2.2 EGF基因片段的PCR扩增第53页
            2.2.3 GFP基因片段的PCR扩增第53-54页
            2.2.4 EGF基因和GFP基因的拼接第54页
            2.2.5 重组质粒的酶切鉴定第54-56页
            2.2.6 重组嗜酸乳杆菌的PCR扩增第56页
            2.2.7 重组嗜酸乳杆菌的Southern杂交第56-57页
        2.3 讨论第57页
        2.4 小结第57-59页
    试验三 重组嗜酸乳杆菌的生物学特性研究第59-73页
        3.1 材料与方法第59-64页
            3.1.1 试验材料第59-61页
            3.1.2 试验方法第61-64页
        3.2 结果与分析第64-71页
            3.2.1 重组嗜酸乳杆菌的荧光显微镜观察第64-65页
            3.2.2 重组嗜酸乳杆菌诱导表达条件的摸索第65页
            3.2.3 重组嗜酸乳杆菌考马斯亮蓝检测和Western blot分析第65-67页
            3.2.4 重组嗜酸乳杆菌的EGF的ELISA检测第67页
            3.2.5 重组嗜酸乳杆菌的遗传稳定性研究第67页
            3.2.6 重组嗜酸乳杆菌生长特性的研究第67-69页
            3.2.7 重组嗜酸乳杆菌耐酸性的研究第69-70页
            3.2.8 重组嗜酸乳杆菌耐胆盐的研究第70-71页
        3.3 讨论第71-72页
        3.4 小结第72-73页
    试验四 重组嗜酸乳杆菌对小鼠肠道益生及修复作用的研究第73-85页
        4.1 材料与方法第73-76页
            4.1.1 试验材料第73页
            4.1.2 试验动物与设计第73-74页
            4.1.3 日粮组成第74-75页
            4.1.4 饲养管理第75页
            4.1.5 样品采集第75页
            4.1.6 测定指标与方法第75页
            4.1.7 数据与分析第75-76页
        4.2 结果与分析第76-81页
            4.2.1 0-7d小鼠小肠形态结构第76页
            4.2.2 0-15d小鼠小肠形态结构第76-81页
        4.3 讨论第81-84页
        4.4 小结第84-85页
第三章 结论和建议第85-86页
    1 主要结论第85页
    2 创新点第85页
    3 有待进一步研究的问题第85-86页
参考文献第86-92页
致谢第92-93页
硕士研究生期间研究成果第93页

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