| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.1 生物药物的概况 | 第12-13页 |
| 1.2 白细胞介素 6 | 第13-16页 |
| 1.2.1 白细胞介素6的研究进展及结构 | 第13页 |
| 1.2.2 IL-6的生物活性 | 第13-14页 |
| 1.2.3 IL-6与炎症反应及肿瘤病变 | 第14-15页 |
| 1.2.4 IL-6在畜牧生产中及兽医临床中的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 细胞色素酶P450酶的概述 | 第16-19页 |
| 1.3.1 细胞色素P450酶的由来与分布 | 第16页 |
| 1.3.2 细胞色素P450酶的结构及其催化功能 | 第16-17页 |
| 1.3.3 细胞色素P450酶的分类 | 第17-18页 |
| 1.3.4 猪细胞色素P450酶与外源物质的代谢 | 第18页 |
| 1.3.5 猪CYP3A29是人CYP3A4的研究替代模型 | 第18-19页 |
| 1.3.6 猪CYP2C33是人CYP2C的研究替代模型 | 第19页 |
| 1.4 核受体PXR、CAR、RXRα及其与药物代谢之间的关系 | 第19-23页 |
| 1.4.1 核受体PXR与药物代谢 | 第19-20页 |
| 1.4.2 核受体CAR与药物代谢 | 第20-21页 |
| 1.4.3 核受体RXRα与药物代谢 | 第21-23页 |
| 2 本实验研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 3 材料与方法 | 第24-40页 |
| 3.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 3.1.1 载体、实验动物和细胞系 | 第24页 |
| 3.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第24-25页 |
| 3.1.3 主要溶液的配制 | 第25-26页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-40页 |
| 3.2.1 猪原代肝细胞分离培养方法 | 第26-28页 |
| 3.2.2 荧光定量的方法检测组织及细胞内细胞色素P450及核受体mRNA水平的变化 | 第28-30页 |
| 3.2.3 用Western blot检测组织及细胞内细胞色素P450及核受体蛋白质水平的变化 | 第30-32页 |
| 3.2.4 CYP2C33启动子的扩增及含CYP2C33启动子双荧光素酶报告质粒的构建 | 第32-35页 |
| 3.2.5 细胞转染 | 第35页 |
| 3.2.6 双荧光素酶报告试验 | 第35-36页 |
| 3.2.7 用 3′RACE及 5′RACE的方法扩增RXR-αmRAN全长 | 第36-38页 |
| 3.2.8 PXR,CAR,RXR-α超表达质粒的构建 | 第38-39页 |
| 3.2.9 RXRα，PXR，CAR的干扰实验 | 第39-40页 |
| 4 结果与分析 | 第40-53页 |
| 4.1 各种细胞色素P450在不同组织中的分布情况 | 第40页 |
| 4.2 猪原代肝细胞的分离与培养 | 第40-42页 |
| 4.2.1 猪原代肝细胞分离方法的确立 | 第40-42页 |
| 4.2.2 猪原代肝细胞及传代细胞中各种细胞色素P450及核受体的表达情况 | 第42页 |
| 4.3 IL-6对猪细胞色素P450表达的影响 | 第42-44页 |
| 4.3.1 IL-6对CYP3A29及CYP2C33表达的浓度梯度影响 | 第42-44页 |
| 4.3.2 IL-6对CYP2C33表达的时间梯度影响 | 第44页 |
| 4.4 IL-6 在转录水平对CYP2C33的表达进行调控 | 第44-47页 |
| 4.4.1 转录抑制实验研究IL-6对CYP2C33表达调控机制 | 第44-45页 |
| 4.4.2 CYP2C33启动子双荧光素酶报告质粒的构建及鉴定 | 第45-46页 |
| 4.4.3 IL-6对CYP2C33启动子活性的影响 | 第46-47页 |
| 4.5 IL-6 对与CYP2C33表达可能相关的核受体的PXR，CAR，RXRα表达的影响 | 第47-49页 |
| 4.5.1 IL-6对PXR，CAR，RXRα表达的浓度梯度影响 | 第47-48页 |
| 4.5.2 IL-6对PXR，CAR，RXRα表达的时间梯度影响 | 第48-49页 |
| 4.6 通过超表达和干扰实验，探讨相关核受体和药物代谢酶之间的关系 | 第49-53页 |
| 4.6.1 通过RACE的方法获得猪RXRα的全长mRNA序列 | 第49-50页 |
| 4.6.2 超表达以及干扰实验，探讨PXR，CAR，RXRα与CYP2C33之间的关系 | 第50-53页 |
| 5 讨论 | 第53-58页 |
| 5.1 各种细胞色素P450在猪不同组织中的分布 | 第53页 |
| 5.2 猪原代肝细胞的分离与培养 | 第53-54页 |
| 5.3 IL-6猪关键细胞色素P450表达的影响 | 第54-55页 |
| 5.4 IL-6通过转录水平对CYP2C33的表达进行调控 | 第55页 |
| 5.5 用IL-6刺激猪原代肝细胞和传代细胞后相关核受体的变化 | 第55-56页 |
| 5.6 通过超表达和干扰实验，探讨相关核受体和CYP2C33表达的关系 | 第56-58页 |
| 6 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
