| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 本文所用英文缩写词表 | 第14-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-36页 |
| 1.1 核酸适配体简介 | 第15-18页 |
| 1.2 核酸适配体筛选方法 | 第18-27页 |
| 1.2.1 经典的核酸适配体筛选方法 | 第18-20页 |
| 1.2.2 改进的核酸适配体筛选方法 | 第20-24页 |
| 1.2.3 cell-SELEX 核酸适配体筛选方法 | 第24-27页 |
| 1.3 核酸适配体在肿瘤细胞检测中的应用 | 第27-34页 |
| 1.3.1 基于核酸适配体分子探针构型变化或识别能力检测肿瘤细胞 | 第27-29页 |
| 1.3.2 基于核酸适配体和酶信号放大检测肿瘤细胞 | 第29-31页 |
| 1.3.3 基于核酸适配体和纳米材料检测肿瘤细胞 | 第31-34页 |
| 1.4 本论文的工作设想 | 第34-36页 |
| 第2章 人肝癌细胞株 HepG2 核酸适配体的筛选及应用 | 第36-55页 |
| 2.1 前言 | 第36-37页 |
| 2.2 实验部分 | 第37-43页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第37-39页 |
| 2.2.2 文库的设计和退火温度的优化 | 第39-40页 |
| 2.2.3 核酸适配体的筛选平台的建立 | 第40-43页 |
| 2.2.4 序列分析 | 第43页 |
| 2.2.5 核酸适配体的表征 | 第43页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第43-54页 |
| 2.3.1 筛选步骤的优化改进 | 第43-44页 |
| 2.3.2 退火温度的优化和筛选压力的变化 | 第44-46页 |
| 2.3.3 筛选进程表征和筛选结果 | 第46-48页 |
| 2.3.4 核酸适配体序列分析和挑选 | 第48-50页 |
| 2.3.5 核酸适配体的基本性能表征 | 第50-54页 |
| 2.4 小结 | 第54-55页 |
| 第3章 基于 SWCNT 吸附的高效核酸适配体筛选方法的建立及应用 | 第55-73页 |
| 3.1 前言 | 第55-56页 |
| 3.2 实验部分 | 第56-60页 |
| 3.2.1 试剂与仪器 | 第56-57页 |
| 3.2.2 SWCNT 的预处理与浓度优化 | 第57页 |
| 3.2.3 SWCNT 吸附的核酸适配体筛选 | 第57-59页 |
| 3.2.4 克隆测序及序列分析 | 第59-60页 |
| 3.2.5 核酸适配体的表征 | 第60页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第60-72页 |
| 3.3.1 实验原理 | 第60-62页 |
| 3.3.2 筛选条件优化 | 第62-63页 |
| 3.3.3 基于 SWCNT 吸附的核酸适配体筛选 | 第63-66页 |
| 3.3.4 核酸适配体序列分析和挑选 | 第66-68页 |
| 3.3.5 核酸适配体的基本性能表征 | 第68-72页 |
| 3.4 小结 | 第72-73页 |
| 第4章 肿瘤细胞核酸适配体的序列优化及应用 | 第73-83页 |
| 4.1 前言 | 第73页 |
| 4.2 实验部分 | 第73-76页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第73-75页 |
| 4.2.2 序列优化 | 第75页 |
| 4.2.3 流式细胞术表征优化后的核酸适配体序列 | 第75-76页 |
| 4.2.4 序列优化方法用于其他细胞核酸适配体的优化 | 第76页 |
| 4.2.5 核酸适配体用于肿瘤冰冻组织切片成像 | 第76页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第76-82页 |
| 4.3.1 序列优化 | 第76-79页 |
| 4.3.2 优化后序列亲和力表征 | 第79页 |
| 4.3.3 优化后序列特异性表征 | 第79-80页 |
| 4.3.4 优化后序列用于肿瘤冰冻组织切片成像 | 第80-81页 |
| 4.3.5 针对肝癌和鼻咽癌细胞的核酸适配体分子文库 | 第81-82页 |
| 4.4 小结 | 第82-83页 |
| 第5章 基于 GO 核酸适配体传感器的构建及应用于肿瘤细胞检测研究 | 第83-93页 |
| 5.1 前言 | 第83页 |
| 5.2 实验部分 | 第83-85页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第83-84页 |
| 5.2.2 实验的设计与可行性分析 | 第84页 |
| 5.2.3 实验条件的优化 | 第84页 |
| 5.2.4 检测 SMMC-7721 细胞和检测 Bel-7404 细胞 | 第84-85页 |
| 5.2.5 选择性考察 | 第85页 |
| 5.2.6 混合细胞的检测 | 第85页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第85-92页 |
| 5.3.1 实验原理 | 第85-86页 |
| 5.3.2 实验可行性分析 | 第86-87页 |
| 5.3.3 实验条件的优化 | 第87-89页 |
| 5.3.4 灵敏度考察 | 第89-90页 |
| 5.3.5 特异性考察 | 第90页 |
| 5.3.6 混合细胞的检测 | 第90-91页 |
| 5.3.7 基于 GO 的核酸适配体传感器的通用性考察 | 第91-92页 |
| 5.4 小结 | 第92-93页 |
| 第6章 基于 FRET 的裂开型核酸适配体传感器的构建及应用于肿瘤细胞检测研究 | 第93-104页 |
| 6.1 前言 | 第93页 |
| 6.2 实验部分 | 第93-95页 |
| 6.2.1 试剂与仪器 | 第93-94页 |
| 6.2.2 实验的设计与可行性 | 第94页 |
| 6.2.3 实验条件的优化 | 第94-95页 |
| 6.2.4 检测 SMMC-7721 细胞 | 第95页 |
| 6.2.5 选择性 | 第95页 |
| 6.2.6 混合细胞的检测 | 第95页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第95-103页 |
| 6.3.1 实验原理 | 第95-96页 |
| 6.3.2 实验可行性 | 第96-97页 |
| 6.3.3 实验条件的优化 | 第97-100页 |
| 6.3.4 灵敏度考察和人血清中肿瘤细胞的检测 | 第100-102页 |
| 6.3.5 特异性考察 | 第102页 |
| 6.3.6 混合细胞的检测 | 第102-103页 |
| 6.4 小结 | 第103-104页 |
| 结论 | 第104-106页 |
| 附篇 基于邻近效应和酶促荧光信号放大检测蛋白质的研究 | 第106-116页 |
| 参考文献 | 第116-135页 |
| 附录 攻读博士学位期间所发表的学术论文及专利 | 第135-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
