| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 前言 | 第11-33页 |
| 1.1 A群链球菌 | 第11-16页 |
| 1.1.1 A群链球菌和表面毒力因子 | 第11-12页 |
| 1.1.2 A群链球菌表面的胶原样蛋白 | 第12-16页 |
| 1.1.2.1 胶原蛋白和胶原样蛋白 | 第12-14页 |
| 1.1.2.2 胶原样蛋白的结构比较 | 第14-15页 |
| 1.1.2.3 编码胶原样蛋白的基因 | 第15-16页 |
| 1.1.2.4 胶原样蛋白的功能研究 | 第16页 |
| 1.2 B族清道夫受体的结构以及功能 | 第16-22页 |
| 1.2.1 CD36的结构 | 第18页 |
| 1.2.2 CD36的分布与功能 | 第18-20页 |
| 1.2.3 CD36与动脉粥样硬化 | 第20-22页 |
| 1.2.3.1 CD36摄取Ox-LDL形成动脉粥样硬化的反应机制 | 第20-21页 |
| 1.2.3.2 CD36吞噬过量ox-LDL形成泡沫细胞 | 第21-22页 |
| 1.2.3.3 CD36与炎症的关联 | 第22页 |
| 1.3 血浆中脂蛋白的作用 | 第22-30页 |
| 1.3.1 血浆中脂蛋白的分类 | 第22-24页 |
| 1.3.1.1 密度梯度超速离心法分类 | 第22-24页 |
| 1.3.1.2 电泳迁移率分类法 | 第24页 |
| 1.3.1.3 依据载脂蛋白的组成区分血浆脂蛋白颗粒 | 第24页 |
| 1.3.2 LDL的结构和功能 | 第24-30页 |
| 1.3.2.1 LDL的结构 | 第24-26页 |
| 1.3.2.2 LDL的生理功能 | 第26页 |
| 1.3.2.3 LDL的抗感染功能 | 第26-27页 |
| 1.3.2.4 氧化LDL的抗感染功能 | 第27-29页 |
| 1.3.2.5 LDL致动脉粥样硬化 | 第29-30页 |
| 1.4 调理素 | 第30-32页 |
| 1.5 立题依据 | 第32页 |
| 1.6 研究内容 | 第32-33页 |
| 2 实验材料 | 第33-38页 |
| 2.1 主要仪器设备 | 第33页 |
| 2.2 主要试剂 | 第33-38页 |
| 2.2.1 化学试剂 | 第33-34页 |
| 2.2.2 抗体 | 第34-35页 |
| 2.2.3 试剂盒和标准品 | 第35页 |
| 2.2.4 填料及纯化缓冲液 | 第35页 |
| 2.2.5 化学贮存液的配制 | 第35-38页 |
| 2.2.5.1 常用溶液 | 第35-36页 |
| 2.2.5.2 培养基的配制 | 第36-37页 |
| 2.2.5.3 电泳试剂的配制 | 第37-38页 |
| 2.2.6 菌株 | 第38页 |
| 2.2.7 细胞株 | 第38页 |
| 2.2.8 PCR引物 | 第38页 |
| 3 实验方法 | 第38-48页 |
| 3.1 RT-PCR验证AM41型GAS和CM41型GAS菌株表面是否表达Scl1 | 第38-40页 |
| 3.1.1 提取两株GAS的总RNA | 第38-39页 |
| 3.1.2 RT-PCR后得到AM41型GAS和CM41型GAS两株菌的cDNA | 第39-40页 |
| 3.2 ELISA检测AM41型GAS、CM41型GAS、M28型GAS和M6型GAS与LDL的结合 | 第40-41页 |
| 3.3 重组Scl1的表达与纯化 | 第41-44页 |
| 3.3.1 工程菌培养 | 第41页 |
| 3.3.2 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第41-42页 |
| 3.3.3 重组Scl1的纯化 | 第42-43页 |
| 3.3.4 重组Scl1内毒素的去除 | 第43页 |
| 3.3.5 蛋白浓度的测定 | 第43-44页 |
| 3.3.6 ELISA检测重组Scl1与LDL的结合 | 第44页 |
| 3.4 U937单核/巨噬细胞的培养及荧光标记 | 第44-45页 |
| 3.4.1 U937单核细胞的培养 | 第44页 |
| 3.4.2 U937巨噬细胞的培养 | 第44-45页 |
| 3.4.3 荧光染色U937单核细胞 | 第45页 |
| 3.5 四株GAS的培养与荧光染色标记 | 第45页 |
| 3.5.1 四株不同血清型GAS的培养 | 第45页 |
| 3.5.2 荧光标记A群链球菌 | 第45页 |
| 3.6 LDL介导U937单核细胞吞噬GAS的试验 | 第45-47页 |
| 3.6.1 LDL介导U937单核细胞吞噬GAS | 第45-46页 |
| 3.6.2 LDL介导U937单核细胞吞噬GAS试验的荧光照相 | 第46页 |
| 3.6.3 不同浓度的LDL介导U937单核细胞吞噬GAS的试验 | 第46-47页 |
| 3.7 Anti-CD36单克隆抗体对LDL介导吞噬实验的影响 | 第47页 |
| 3.8 重组Scl1对LDL介导吞噬的影响 | 第47页 |
| 3.9 血液调理吞噬实验 | 第47-48页 |
| 3.10 LDL介导U937巨噬细胞吞噬AM41型GAS和CM41型GAS两株菌的试验 | 第48页 |
| 4 结果 | 第48-68页 |
| 4.1 RT-PCR检测AM41型和CM41型GAS是否表达Scl1的实验结果 | 第48-49页 |
| 4.2 ELISA检测四株GAS是否与LDL结合的实验结果 | 第49-50页 |
| 4.3 重组Scl1的表达和纯化的实验结果 | 第50-53页 |
| 4.3.1 重组Scl1的表达 | 第50-51页 |
| 4.3.2 重组Scl1的纯化 | 第51页 |
| 4.3.3 重组Scl1的内毒素含量测定结果 | 第51-52页 |
| 4.3.4 重组Scl1的含量测定结果 | 第52-53页 |
| 4.4 ELISA检测rScl1与LDL的结合的实验结果 | 第53页 |
| 4.5 LDL介导U937单核细胞吞噬GAS的实验结果 | 第53-59页 |
| 4.6 不同浓度的LDL介导U937单核细胞吞噬GAS的实验结果 | 第59-61页 |
| 4.7 Anti-CD36单克隆抗体抑制LDL调理吞噬实验的实验结果 | 第61-64页 |
| 4.8 重组Scl1抑制LDL调理吞噬实验的实验结果 | 第64-65页 |
| 4.9 血液调理吞噬实验的实验结果 | 第65-67页 |
| 4.10 LDL介导U937巨噬细胞吞噬GAS的实验结果 | 第67-68页 |
| 5 小结与讨论 | 第68-72页 |
| 5.1 小结 | 第68-69页 |
| 5.2 讨论 | 第69-72页 |
| 5.2.1 GAS与LDL/OxLDL相互作用的探讨 | 第69页 |
| 5.2.2 吞噬细胞表面CD36与LDL相互作用的探讨 | 第69-70页 |
| 5.2.3 LDL/OxLDL与其它细菌的相互作用的探讨 | 第70-71页 |
| 5.2.4 LDL作为调理素的广谱性 | 第71-72页 |
| 6 结论 | 第72页 |
| 7 展望 | 第72-73页 |
| 论文创新点 | 第73页 |
| 课题研究意义 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-85页 |
| 作者简介 | 第85页 |
