| 致谢 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第17-19页 |
| 1 引言 | 第19-33页 |
| 1.1 砷概况 | 第19-23页 |
| 1.1.1 砷的来源 | 第19页 |
| 1.1.2 砷的形态及毒性 | 第19-20页 |
| 1.1.3 砷的生物毒性效应 | 第20-21页 |
| 1.1.3.1 砷的毒性作用机制 | 第20页 |
| 1.1.3.2 砷对人和动物的毒性效应 | 第20-21页 |
| 1.1.3.3 砷对植物的毒性效应 | 第21页 |
| 1.1.4 我国水体砷污染现状 | 第21-23页 |
| 1.2 砷的代谢 | 第23-28页 |
| 1.2.1 砷的吸收 | 第23-24页 |
| 1.2.2 砷的甲基转化 | 第24-28页 |
| 1.2.2.1 砷甲基化相关酶类 | 第24-25页 |
| 1.2.2.2 无机砷甲基转化研究进展 | 第25-28页 |
| 1.2.3 砷的排出 | 第28页 |
| 1.3 重金属在水生生物中的累积 | 第28-30页 |
| 1.3.1 重金属的生物累积特征 | 第28-29页 |
| 1.3.2 重金属生物累积的亚细胞分布 | 第29-30页 |
| 1.4 抗氧化酶系的应答在生态毒理学中的应用 | 第30-32页 |
| 1.5 组织病理分析在海洋生态毒理学中的应用 | 第32-33页 |
| 2 本论文的研究内容、意义及技术路线 | 第33-35页 |
| 2.1 研究内容与意义 | 第33-34页 |
| 2.2 技术路线 | 第34-35页 |
| 3 菲律宾蛤仔组织中砷的富集转化和亚细胞分布 | 第35-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-37页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第35-36页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-38页 |
| 3.2.1 菲律宾蛤仔肝胰腺与鳃组织中总砷含量测定 | 第37页 |
| 3.2.2 菲律宾蛤仔肝胰腺与鳃组织不同赋存形态砷含量分析 | 第37-38页 |
| 3.2.3 亚细胞组分分布 | 第38页 |
| 3.2.4 数据统计分析 | 第38页 |
| 3.3 实验结果 | 第38-44页 |
| 3.3.1 肝胰腺和鳃组织中总砷的富集 | 第38-40页 |
| 3.3.2 肝胰腺和鳃组织中不同赋存形态砷的含量 | 第40-42页 |
| 3.3.3 肝胰腺和鳃组织中总砷的亚细胞分布 | 第42-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-47页 |
| 3.4.1 肝胰腺和鳃组织中总砷的富集 | 第44-45页 |
| 3.4.2 肝胰腺和鳃组织中不同赋存形态砷的含量 | 第45-46页 |
| 3.4.3 肝胰腺和鳃组织中总砷的亚细胞分布 | 第46-47页 |
| 3.5 小结 | 第47-48页 |
| 4 无机砷甲基化关键酶GSTΩ 基因的重组表达及功能验证 | 第48-67页 |
| 4.1 实验材料 | 第49-52页 |
| 4.1.1 实验样品 | 第49页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第49-51页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第51-52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-61页 |
| 4.2.1 无机砷甲基化关键酶GSTΩ 基因的扩增与原核表达 | 第52-58页 |
| 4.2.1.1 菲律宾蛤仔总RNA的提取及cDNA的合成 | 第52-53页 |
| 4.2.1.2 砷甲基化关键酶GSTΩ 基因的扩增与克隆 | 第53-54页 |
| 4.2.1.3 GSTΩ 重组片段转化表达菌BL21(DE3)与检测 | 第54-56页 |
| 4.2.1.4 重组GSTΩ 蛋白的SDS-PAGE凝胶电泳及其抗体的Western blot检测 | 第56-58页 |
| 4.2.2 GSTΩ 基因重组蛋白的活性检测 | 第58-59页 |
| 4.2.3 GSTΩ 重组片段在大肠杆菌突变体Escherichia coli AW3110(DE3)中的功能验证 | 第59-61页 |
| 4.3 实验结果 | 第61-63页 |
| 4.3.1 GSTΩ 基因的重组表达 | 第61-62页 |
| 4.3.2 重组GSTΩ 蛋白的活性检测 | 第62-63页 |
| 4.3.3 砷超敏感菌株中验证GSTΩ 基因的功能 | 第63页 |
| 4.4 讨论 | 第63-65页 |
| 4.4.1 无机砷甲基化关键酶GSTΩ 基因的扩增与原核表达 | 第63-64页 |
| 4.4.2 重组GSTΩ 蛋白的活性检测 | 第64页 |
| 4.4.3 砷超敏感菌株中验证GSTΩ 基因的功能 | 第64-65页 |
| 4.5 小结 | 第65-67页 |
| 5 砷甲基化关键基因GSTΩ 对无机砷胁迫的分子响应 | 第67-81页 |
| 5.1 实验材料 | 第67-69页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第67-68页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第68-69页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第69页 |
| 5.2 实验方法 | 第69-73页 |
| 5.2.1 实时定量PCR检测无机砷暴露后组织中GSTΩ 转录水平表达量变化 | 第69-70页 |
| 5.2.2 无机砷暴露后组织中GSTΩ 蛋白表达分布检测 | 第70-72页 |
| 5.2.3 无机砷暴露后组织中GSTΩ 酶活力变化 | 第72-73页 |
| 5.2.4 数据统计分析 | 第73页 |
| 5.3 实验结果 | 第73-77页 |
| 5.3.1 无机砷暴露后GSTΩ 转录水平表达量变化 | 第73-75页 |
| 5.3.2 无机砷暴露后组织中GSTΩ 蛋白表达分布变化 | 第75-77页 |
| 5.3.3 无机砷暴露后组织中GSTΩ 酶活力变化 | 第77页 |
| 5.4 讨论 | 第77-80页 |
| 5.4.1 无机砷暴露后GSTΩ 转录水平表达量变化 | 第77-79页 |
| 5.4.2 无机砷暴露后组织中GSTΩ 蛋白表达分布变化 | 第79页 |
| 5.4.3 无机砷暴露后组织中GSTΩ 酶活力变化 | 第79-80页 |
| 5.5 小结 | 第80-81页 |
| 6 无机砷暴露后菲律宾蛤仔的病理生理响应 | 第81-95页 |
| 6.1 实验材料 | 第81-83页 |
| 6.1.1 实验动物 | 第81-82页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第82页 |
| 6.1.3 实验仪器 | 第82-83页 |
| 6.2 实验方法 | 第83-84页 |
| 6.2.1 砷暴露下菲律宾蛤仔体内抗氧化防御系统的测定 | 第83页 |
| 6.2.2 砷暴露下菲律宾蛤仔的组织病理变化 | 第83-84页 |
| 6.3 实验结果 | 第84-91页 |
| 6.3.1 无机砷暴露后不同组织GSH含量、GR和总GST活力变化 | 第84-87页 |
| 6.3.2 砷暴露下菲律宾蛤仔的组织病理变化 | 第87-91页 |
| 6.4 讨论 | 第91-94页 |
| 6.4.1 无机砷暴露后不同组织GSH含量、GR和总GST活力变化 | 第91-93页 |
| 6.4.2 砷暴露下菲律宾蛤仔的组织病理变化 | 第93-94页 |
| 6.5 小结 | 第94-95页 |
| 7 结论与研究展望 | 第95-97页 |
| 7.1 本研究的主要结论 | 第95页 |
| 7.2 本研究的主要创新点 | 第95-96页 |
| 7.3 需进一步解决的问题 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-119页 |
| 作者简介 | 第119-120页 |
| 硕士期间发表论文 | 第120页 |
