摘要 | 第4-6页 |
Summary | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
1 兰州鲇简介以及相关的研究 | 第12-13页 |
1.1 鲇科鱼类的起源 | 第12页 |
1.2 兰州鲇简介 | 第12页 |
1.3 兰州鲇的相关研究 | 第12-13页 |
2 鱼类育种的研究现状及发展 | 第13-16页 |
2.1 常规育种技术 | 第13页 |
2.2 性别控制技术 | 第13-14页 |
2.3 多倍体育种技术 | 第14页 |
2.4 分子育种技术 | 第14-15页 |
2.5 转基因技术 | 第15-16页 |
3 生长性状相关的两个候选基因 | 第16-25页 |
3.1 GH基因 | 第16-19页 |
3.1.1 GH基因的结构 | 第16页 |
3.1.2 GH基因的释放与转运 | 第16-17页 |
3.1.3 生长激素的生物学功能 | 第17-19页 |
3.1.3.1 对三大类营养物质的代谢的影响 | 第17-18页 |
3.1.3.2 对泌乳的影响 | 第18页 |
3.1.3.3 对生殖的影响 | 第18-19页 |
3.2 MSTN基因 | 第19-25页 |
3.2.1 MSTN基因的结构 | 第20页 |
3.2.2 MSTN基因的表达 | 第20-21页 |
3.2.3 作用机理 | 第21-22页 |
3.2.4 研究MSTN基因的意义 | 第22页 |
3.2.5 MSTN研究进展 | 第22-25页 |
第二章 试验研究 | 第25-46页 |
试验一 兰州鲇GH基因的克隆及序列分析 | 第25-37页 |
1 试验动物及数据采集 | 第25页 |
1.1 实验动物 | 第25页 |
1.2 生长数据采集及方法 | 第25页 |
2 主要仪器、试剂及配制方法 | 第25-27页 |
2.1 主要仪器 | 第25-26页 |
2.2 主要试剂 | 第26页 |
2.3 试剂配制 | 第26-27页 |
2.4 电泳的相关试剂 | 第27页 |
2.5 转化所用的相关试剂 | 第27页 |
3 实验方法及步骤 | 第27-30页 |
3.1 DNA的提取 | 第27-28页 |
3.2 DNA质量和浓度的检测 | 第28-29页 |
3.3 PCR反应体系 | 第29页 |
3.3.1 PCR反应体系 | 第29页 |
3.3.2 PCR反应程序 | 第29页 |
3.3.3 PCR扩增产物检测 | 第29页 |
3.4 PCR产物的回收及克隆测序 | 第29-30页 |
3.4.1 感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第29-30页 |
3.4.2 转化反应 | 第30页 |
3.5 序列分析 | 第30页 |
4 结果分析 | 第30-34页 |
4.1 兰州鲇GH基因的克隆、测序 | 第30-31页 |
4.2 兰州鲇GH基因结构分析 | 第31-32页 |
4.3 兰州鲇GH基因和其他物种GH基因序列的比较分析 | 第32-34页 |
5 讨论 | 第34-37页 |
5.1 GH基因的结构特征 | 第34-35页 |
5.2 兰州鲇与其他物种GH基因编码区核苷酸序列的比较 | 第35页 |
5.3 GH基因系统发育分析 | 第35-37页 |
试验二 兰州鲇GH基因和MSTN基因多态性和生长相关性研究 | 第37-46页 |
1 实验材料 | 第37页 |
1.1 试验样品采集和相关数据的测定 | 第37页 |
1.2 生长数据采集及方法 | 第37页 |
2 实验方法 | 第37-39页 |
2.1 兰州鲇基因组DNA的提取与检测 | 第37页 |
2.3 引物的设计 | 第37-38页 |
2.3.1 兰州鲇GH基因筛选引物的设计 | 第37-38页 |
2.3.2 兰州鲇MSTN基因筛选引物的设计 | 第38页 |
2.4 GH基因和MSTN基因扩增结果 | 第38页 |
2.5 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第38-39页 |
2.5.1 12~15%聚丙烯酰胺凝胶制备及电泳 | 第38页 |
2.5.2 非变性的丙烯酰胺凝胶的制备 | 第38-39页 |
2.5.3 PCR产物变性及上样 | 第39页 |
2.5.4 银染显色 | 第39页 |
3 统计方法 | 第39-40页 |
3.1 等位基因频率(Allele frequencies) | 第39-40页 |
4 结果分析 | 第40-43页 |
4.1 兰州鲇GH基因PCR扩增结果 | 第40-41页 |
4.2 兰州鲇GH基因的多态性及生长相关行分析 | 第41页 |
4.3 SNPs检测与兰州鲇生长相关性状关联的分析 | 第41-42页 |
4.3.1 GH基因的SNPs测序结果 | 第41-42页 |
4.3.2 GH基因多态性与兰州鲇生长性状的相关性分析 | 第42页 |
4.4 兰州鲇MSTN基因的多态性检测及其生长相关性分析 | 第42-43页 |
4.4.1 SSCP检测结果 | 第42页 |
4.4.2 MSTN基因的SNPs测序结果 | 第42页 |
4.4.3 MSTN等位基因及基因频率 | 第42-43页 |
4.4.4 MSTN基因多态性与兰州鲇生长性状的相关性分析 | 第43页 |
5 讨论 | 第43-46页 |
5.1 GH基因多态性与生长性状相关性分析 | 第43-45页 |
5.2 MSTN基因多态性与生长性状相关性分析 | 第45-46页 |
第三章 结论 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
个人简介 | 第54-55页 |
导师简介 | 第55-57页 |