摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-19页 |
1.1 乳腺的发育及泌乳 | 第12页 |
1.2 奶牛乳脂的合成与分泌 | 第12-14页 |
1.2.1 乳脂的组成和来源 | 第12-13页 |
1.2.2 乳脂的合成与分泌 | 第13-14页 |
1.3 乳脂合成的调节 | 第14-16页 |
1.3.1 乳脂合成相关基因的研究 | 第14页 |
1.3.2 乳脂合成信号转导通路 | 第14-15页 |
1.3.3 分子营养学调控 | 第15-16页 |
1.4 诱导细胞凋亡的DFF45样效应因子C(CIDEC)的研究进展 | 第16-17页 |
1.4.1 CIDEC基因简介 | 第16页 |
1.4.2 CIDEC基因的生物学功能 | 第16-17页 |
1.4.3 CIDEC基因对脂类合成的调节 | 第17页 |
1.5 研究目的与意义 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-49页 |
2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第19-23页 |
2.1.1 实验动物的选取 | 第19页 |
2.1.2 主要实验试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第20-21页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第21-23页 |
2.2 奶牛乳腺组织中CIDEC的表达与定位研究 | 第23-33页 |
2.2.1 荧光定量PCR检测CIDEC基因在奶牛乳腺组织中表达 | 第23-25页 |
2.2.2 原位杂交检测CIDEC基因在奶牛乳腺组织中的表达 | 第25-30页 |
2.2.3 Western blot方法检测奶牛乳腺组织中CIDEC的表达 | 第30-32页 |
2.2.4 免疫荧光检测奶牛乳腺组织中CIDEC的表达部位 | 第32-33页 |
2.3 CIDEC对奶牛乳腺上皮细胞乳脂合成的影响 | 第33-40页 |
2.3.1 奶牛乳腺上皮细胞的分离培养、纯化与鉴定 | 第33-35页 |
2.3.2 CIDEC基因过表达对乳脂合成的影响 | 第35-39页 |
2.3.3 CIDEC基因沉寂对乳脂合成的影响 | 第39-40页 |
2.4 奶牛乳腺上皮细胞中调节CIDEC表达的信号通路分析 | 第40-41页 |
2.4.1 添加乳脂合成前体物对TAG合成的影响 | 第40页 |
2.4.2 添加乳脂合成前体物对m TOR信号通路的影响 | 第40-41页 |
2.5 CIDEC基因调节乳脂合成的机制 | 第41-48页 |
2.5.1 PPARγ 对奶牛乳脂合成的影响 | 第41-43页 |
2.5.2 CIDEC基因启动子区转录因子结合位点的筛选 | 第43-46页 |
2.5.3 染色质免疫共沉淀分析PPARγ 对CIDEC基因表达的调控 | 第46-48页 |
2.6 数据处理与统计分析 | 第48-49页 |
3 结果与分析 | 第49-70页 |
3.1 奶牛乳腺组织中CIDEC的表达与定位 | 第49-53页 |
3.1.1 荧光定量PCR检测奶牛乳腺组织中CIDEC m RNA的表达 | 第49-50页 |
3.1.2 原位杂交检测奶牛乳腺组织中CIDEC m RNA的表达 | 第50-52页 |
3.1.3 Western blot检测奶牛乳腺组织中CIDEC的表达 | 第52页 |
3.1.4 免疫荧光检测奶牛乳腺组织中CIDEC和脂滴的表达 | 第52-53页 |
3.2 CIDEC对奶牛乳腺上皮细胞乳脂合成的影响 | 第53-61页 |
3.2.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养及鉴定 | 第53-55页 |
3.2.2 CIDEC过表达对奶牛乳腺上皮细胞中乳脂合成的影响 | 第55-58页 |
3.2.3 CIDEC基因沉寂对奶牛乳腺上皮细胞乳脂合成的影响 | 第58-61页 |
3.3 奶牛乳腺上皮细胞中调节CIDEC表达的信号通路分析 | 第61-63页 |
3.3.1 添加乳脂合成前体物对TAG合成的影响 | 第61-62页 |
3.3.2 添加乳脂合成前体物对m TOR信号通路的影响 | 第62-63页 |
3.4 CIDEC基因调节乳脂合成的机制 | 第63-70页 |
3.4.1 PPARγ 对奶牛乳脂合成的影响 | 第63-67页 |
3.4.2 CIDEC基因启动子区转录因子结合位点的筛选 | 第67-68页 |
3.4.3 染色质免疫共沉淀分析PPARγ 对CIDEC基因表达的调控 | 第68-70页 |
4 讨论 | 第70-74页 |
4.1 奶牛乳腺组织中CIDEC的表达与定位分析 | 第70页 |
4.2 CIDEC基因对奶牛乳腺上皮细胞乳脂合成的影响 | 第70-71页 |
4.3 奶牛乳腺上皮细胞中调节CIDEC表达的信号通路 | 第71-72页 |
4.4 CIDEC基因调节乳脂合成的机制 | 第72-74页 |
5 结论 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-82页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第82页 |