摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第13-28页 |
1.1 昆虫丝氨酸蛋白酶研究进展 | 第13-20页 |
1.1.1 昆虫丝氨酸蛋白酶分类 | 第13-14页 |
1.1.2 丝氨酸蛋白及其同源物的鉴定 | 第14页 |
1.1.3 丝氨酸蛋白酶的分子结构 | 第14-16页 |
1.1.4 丝氨酸蛋白酶的功能 | 第16-19页 |
1.1.5 JAK-STAT途径参与昆虫抗病毒入侵的调控 | 第19-20页 |
1.2 家蚕抗性基因功能研究 | 第20-23页 |
1.2.1 已鉴定的家蚕抗病毒基因 | 第20-21页 |
1.2.2 家蚕中的丝氨酸蛋白酶类型与功能 | 第21-23页 |
1.3 家蚕病毒简介 | 第23-25页 |
1.3.1 家蚕二分浓核病毒简介 | 第23-24页 |
1.3.2 感染家蚕二分浓核病毒宿主家蚕的病理学变化 | 第24页 |
1.3.3 家蚕核型多角体病毒简介 | 第24-25页 |
1.4 研究目的和意义 | 第25-26页 |
1.5 研究内容和技术路线 | 第26-28页 |
1.5.1 研究内容 | 第26-27页 |
1.5.2 技术路线 | 第27-28页 |
第二章 家蚕BmSP142序列分析与组织特异性分布 | 第28-38页 |
2.1 材料和试剂 | 第28-29页 |
2.1.1 实验材料 | 第28页 |
2.1.2 实验试剂 | 第28页 |
2.1.3 试剂的配置 | 第28-29页 |
2.1.4 仪器 | 第29页 |
2.2 实验方法 | 第29-32页 |
2.2.1 BmSP142序列信息分析 | 第29页 |
2.2.2 BmSP142的组织分布 | 第29-32页 |
2.3 实验结果与分析 | 第32-37页 |
2.3.1 BmSP142的序列信息分析 | 第32-35页 |
2.3.2 BmSP142的组织分布 | 第35-37页 |
2.4 讨论 | 第37-38页 |
第三章 BmSP142的原核表达、纯化与活性分析 | 第38-52页 |
3.1 材料和试剂 | 第38-41页 |
3.1.1 实验材料 | 第38页 |
3.1.2 实验试剂 | 第38-39页 |
3.1.3 试剂的配置 | 第39-40页 |
3.1.4 仪器 | 第40-41页 |
3.2 实验方法 | 第41-46页 |
3.2.1 原核表达载体的构建 | 第41-43页 |
3.2.2 目的蛋白的诱导表达 | 第43-44页 |
3.2.3 BmSP142蛋白的纯化及活性分析 | 第44-45页 |
3.2.4 蛋白一级质谱分析 | 第45-46页 |
3.2.5 多克隆抗体的制备和检测 | 第46页 |
3.3 实验结果 | 第46-50页 |
3.3.1 重组质粒p GEX-5X3BmSP142的构建 | 第46-47页 |
3.3.2 BmSP142蛋白的原核表达及验证 | 第47-48页 |
3.3.3 BmSP142蛋白的纯化及活性测定 | 第48-49页 |
3.3.4 蛋白一级质谱分析 | 第49-50页 |
3.3.5 多克隆抗体的检测 | 第50页 |
3.4 讨论 | 第50-52页 |
第四章 BmSP142的转录时相和表达时相分析 | 第52-63页 |
4.1 材料和试剂 | 第52-53页 |
4.1.1 实验材料 | 第52页 |
4.1.2 实验试剂 | 第52页 |
4.1.3 试剂的配置 | 第52-53页 |
4.1.4 仪器 | 第53页 |
4.2 实验方法 | 第53-56页 |
4.2.1 不同品系家蚕中肠组织样品制备 | 第53页 |
4.2.2 不同时间点中肠组织c DNA的制备 | 第53-54页 |
4.2.3 转录时相分析 | 第54-55页 |
4.2.4 表达时相分析 | 第55-56页 |
4.3 实验结果 | 第56-60页 |
4.3.1 BmSP142基因标准曲线的制作 | 第56-57页 |
4.3.2 转录时相分析 | 第57-59页 |
4.3.3 表达时相分析 | 第59-60页 |
4.4 讨论 | 第60-63页 |
第五章 BmSP142的抗病毒侵染分析 | 第63-72页 |
5.1 材料和试剂 | 第63-64页 |
5.1.1 实验材料 | 第63页 |
5.1.2 实验试剂 | 第63页 |
5.1.3 试剂的配置 | 第63页 |
5.1.4 仪器 | 第63-64页 |
5.2 实验方法 | 第64-67页 |
5.2.1 体内实验研究BmSP142对BmBDV病毒复制效率的影响 | 第64-65页 |
5.2.2 体内实验研究BmSP142对BmNPV病毒复制效率的影响 | 第65-66页 |
5.2.3 利用携带荧光的BmNPV病毒粒子体外验证BmSP142对病毒增殖的影响 | 第66页 |
5.2.4 瞬时表达载体的构建 | 第66-67页 |
5.2.5 过表达BmSP142对病毒增殖的影响 | 第67页 |
5.3 实验结果 | 第67-70页 |
5.3.1 体内实验研究BmSP142对病毒复制效率的影响 | 第67-68页 |
5.3.2 体外实验验证BmSP142对病毒增殖的影响 | 第68-69页 |
5.3.3 过表达BmSP142对病毒增殖的抑制作用 | 第69-70页 |
5.4 讨论 | 第70-72页 |
第六章 总结与展望 | 第72-74页 |
6.1 主要工作总结 | 第72-73页 |
6.2 展望 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-81页 |
致谢 | 第81-83页 |
在读期间发表论文及参与课题 | 第83页 |