| 摘要 | 第6-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1 大青叶蝉及其危害 | 第14-15页 |
| 1.1 大青叶蝉的形态特征 | 第14页 |
| 1.2 发生特点 | 第14-15页 |
| 1.3 大青叶蝉的危害 | 第15页 |
| 2 昆虫内共生菌研究概况 | 第15-16页 |
| 3 叶蝉内共生菌的研究进展 | 第16-20页 |
| 3.1 叶蝉内共生菌的种类 | 第17-19页 |
| 3.1.1 初生内共生菌 | 第17-18页 |
| 3.1.2 次生内共生菌 | 第18-19页 |
| 3.2 叶蝉内共生菌的作用 | 第19-20页 |
| 4 昆虫体内的相关酶系 | 第20-21页 |
| 4.1 保护酶的作用特性 | 第20页 |
| 4.2 解毒酶的作用特性 | 第20-21页 |
| 4.3 转氨酶的作用特性 | 第21页 |
| 5 实时荧光定量PCR的应用 | 第21-22页 |
| 6 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 7 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 大青叶蝉内共生菌的检测 | 第24-48页 |
| 1 材料与方法 | 第24-33页 |
| 1.1 实验材料 | 第24-29页 |
| 1.1.1 实验主要试剂 | 第24-25页 |
| 1.1.2 实验主要仪器 | 第25页 |
| 1.1.3 供试虫源 | 第25页 |
| 1.1.4 引物名称及合成 | 第25-29页 |
| 1.2 方法 | 第29-33页 |
| 1.2.1 DNA的提取 | 第29页 |
| 1.2.2 PCR扩增 | 第29-30页 |
| 1.2.3 PCR产物的纯化 | 第30页 |
| 1.2.4 克隆与测序 | 第30-31页 |
| 1.2.5 序列分析 | 第31-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-42页 |
| 2.1 内共生菌 16S rDNA的提取及测序结果 | 第33-34页 |
| 2.2 内共生菌 16S rRNA基因序列在GenBank中Blast同源序列检索 | 第34-35页 |
| 2.3 单倍型序列特征分析 | 第35-42页 |
| 2.3.1 Sulcia muelleri 16S rRNA基因序列特征分析 | 第35-38页 |
| 2.3.2 Sodalis sp. 16S rRNA基因序列特征分析 | 第38-39页 |
| 2.3.3 Rickettsia sp. 16S rRNA基因序列特征分析 | 第39-42页 |
| 2.4 单倍型序列Gen Bank登录号 | 第42页 |
| 2.5 单倍型序列系统发育树的构建 | 第42页 |
| 3 结论与讨论 | 第42-48页 |
| 第三章 内共生菌在大青叶蝉中的分布 | 第48-62页 |
| 1 材料与方法 | 第48-54页 |
| 1.1 材料 | 第48-50页 |
| 1.1.1 实验主要试剂 | 第48页 |
| 1.1.2 实验主要仪器 | 第48-49页 |
| 1.1.3 特异引物和探针的设计与合成 | 第49页 |
| 1.1.4 饲养大青叶蝉植物及种植 | 第49-50页 |
| 1.1.5 大青叶蝉的饲养 | 第50页 |
| 1.1.6 大青叶蝉不同龄期的获取 | 第50页 |
| 1.1.7 大青叶蝉不同解剖器官的获取 | 第50页 |
| 1.2 方法 | 第50-54页 |
| 1.2.1 DNA的提取 | 第50-51页 |
| 1.2.2 PCR扩增 | 第51页 |
| 1.2.3 PCR产物的纯化 | 第51页 |
| 1.2.4 克隆、质粒的提取及测序 | 第51-52页 |
| 1.2.5 绝对定量PCR | 第52-53页 |
| 1.2.6 大青叶蝉不同龄期内共生菌感染率的检测 | 第53页 |
| 1.2.7 大青叶蝉不同龄期共生菌拷贝数的检测 | 第53页 |
| 1.2.8 大青叶蝉内部器官及组织的内共生菌拷贝数的检测 | 第53页 |
| 1.2.9 数据分析 | 第53-54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-61页 |
| 2.1 特异引物检测大青叶蝉三种内共生菌的结果 | 第54-55页 |
| 2.2 大青叶蝉不同龄期三种内共生菌感染率的检测 | 第55-57页 |
| 2.3 标准品绝对定量PCR的检测结果 | 第57-59页 |
| 2.4 大青叶蝉不同龄期内共生菌的拷贝数 | 第59-60页 |
| 2.5 大青叶蝉不同器官内共生菌的拷贝数 | 第60-61页 |
| 3 结论与讨论 | 第61-62页 |
| 第四章 三种抗生素对大青叶蝉内共生菌去除效果的比较 | 第62-73页 |
| 1 材料与方法 | 第62-64页 |
| 1.1 材料 | 第62-63页 |
| 1.1.1 实验主要试剂 | 第62-63页 |
| 1.1.2 供试虫源 | 第63页 |
| 1.2 方法 | 第63-64页 |
| 1.2.1 DNA的提取 | 第63页 |
| 1.2.2 PCR扩增 | 第63页 |
| 1.2.3 质粒的提取 | 第63-64页 |
| 1.2.4 绝对定量PCR | 第64页 |
| 1.2.5 大青叶蝉内共生菌感染率的检测 | 第64页 |
| 1.2.6 抗生素对大青叶蝉内共生菌的影响 | 第64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-71页 |
| 2.1 大青叶蝉内共生菌的检测 | 第64-66页 |
| 2.2 标准品绝对定量PCR的检测结果 | 第66-68页 |
| 2.3 抗生素处理后内共生菌拷贝数的变化 | 第68-71页 |
| 3 结论与讨论 | 第71-73页 |
| 第五章 抗生素处理对大青叶蝉氨基酸和总蛋白含量的影响 | 第73-79页 |
| 1 材料与方法 | 第73-74页 |
| 1.1 材料 | 第73页 |
| 1.1.1 实验主要试剂 | 第73页 |
| 1.1.2 供试虫源 | 第73页 |
| 1.2 方法 | 第73-74页 |
| 1.2.1 抗生素的处理 | 第73-74页 |
| 1.2.2 抗生素处理对大青叶蝉氨基酸含量的影响 | 第74页 |
| 1.2.3 抗生素处理对大青叶蝉总蛋白含量的影响 | 第74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-77页 |
| 2.1 抗生素处理对大青叶蝉氨基酸含量的影响 | 第74-76页 |
| 2.2 抗生素处理对大青叶蝉总蛋白含量的影响 | 第76-77页 |
| 3 结论与讨论 | 第77-79页 |
| 第六章 抗生素处理对大青叶蝉保护酶、解毒酶及转氨酶活性的影响 | 第79-86页 |
| 1 材料与方法 | 第79-81页 |
| 1.1 材料 | 第79-80页 |
| 1.1.1 实验主要试剂 | 第79页 |
| 1.1.2 供试虫源 | 第79-80页 |
| 1.2 方法 | 第80-81页 |
| 1.2.1 抗生素的处理 | 第80页 |
| 1.2.2 抗生素处理对大青叶蝉体内主要保护酶活性的影响 | 第80页 |
| 1.2.3 抗生素处理对大青叶蝉体内主要解毒酶活性的影响 | 第80-81页 |
| 1.2.4 抗生素处理对大青叶蝉体内主要转氨酶活性的影响 | 第81页 |
| 1.3 数据处理 | 第81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-84页 |
| 2.1 抗生素处理对大青叶蝉体内主要保护酶活性的影响 | 第81-82页 |
| 2.2 抗生素处理对大青叶蝉体内主要解毒酶活性的影响 | 第82-83页 |
| 2.3 抗生素处理对大青叶蝉体内主要转氨酶活性的影响 | 第83-84页 |
| 3 结论与讨论 | 第84-86页 |
| 第七章 全文总结 | 第86-89页 |
| 1 主要结论 | 第86-88页 |
| 2 本文的创新之处 | 第88页 |
| 3 本研究的不足之处及今后的研究方向 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-103页 |
| 附录 | 第103-104页 |
| 图版Ⅰ大青叶蝉不同龄期图 | 第104-105页 |
| 图版Ⅱ 大青叶蝉内部器官或组织图 | 第105-106页 |
| 图版Ⅲ 谷丙转氨酶和谷草转氨酶标准曲线图 | 第106-107页 |
| 图版Ⅳ 大青叶蝉氨基酸检测图谱 | 第107-110页 |
