| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第13-19页 |
| 1.1 GEN辐射防护机制研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 GEN抗氧化作用 | 第14-15页 |
| 1.1.2 GEN调节信号转导和基因表达 | 第15页 |
| 1.1.3 GEN调节细胞周期 | 第15页 |
| 1.2 DNA辐射损伤修复与内质网应激 | 第15-17页 |
| 1.3 实验目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 GEN对受辐照L-02肝细胞细胞凋亡和细胞周期的影响 | 第19-29页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-21页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第20页 |
| 2.2.2 实验分组及处理 | 第20-21页 |
| 2.2.3 流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期 | 第21页 |
| 2.2.4 统计学处理 | 第21页 |
| 2.3 结果 | 第21-27页 |
| 2.3.1 不同浓度GEN对受照L-02细胞凋亡的影响 | 第21-24页 |
| 2.3.2 不同浓度GEN对受照L-02细胞周期的影响 | 第24-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 GEN对受辐照L-02细胞内质网应激及DNA损伤修复蛋白表达的影响 | 第29-38页 |
| 3.1 材料 | 第29-31页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第29页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第29-30页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.4 Western blot常用试剂配制 | 第31页 |
| 3.2 方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第31页 |
| 3.2.2 实验分组及处理 | 第31页 |
| 3.2.3 蛋白样品制备 | 第31-32页 |
| 3.2.4 含量的测定(BCA法) | 第32页 |
| 3.2.5 Western blot检测蛋白表达 | 第32-33页 |
| 3.3 结果 | 第33-35页 |
| 3.3.1 GEN对受辐照L-02细胞GRP78蛋白表达的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.2 GEN对受辐照L-02细胞HERPUD1蛋白表达的影响 | 第34页 |
| 3.3.3 GEN对受照L-02细胞HHR23A蛋白表达的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.4 GEN对受照L-02细胞HHR23B蛋白表达的影响 | 第35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-38页 |
| 第四章 GEN对受辐照L-02细胞DNA辐射损伤修复相关基因表达的影响 | 第38-47页 |
| 4.1 材料 | 第38-39页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第38页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第38-39页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第39页 |
| 4.2 方法 | 第39-42页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第39页 |
| 4.2.2 实验分组及处理 | 第39-40页 |
| 4.2.3 细胞总RNA提取 | 第40页 |
| 4.2.4 细胞总RNA定量及质控 | 第40页 |
| 4.2.5 cDNA合成 | 第40-41页 |
| 4.2.6 Real time PCR | 第41-42页 |
| 4.2.7 采用?? CT方法进行数据分析 | 第42页 |
| 4.3 结果 | 第42-44页 |
| 4.3.1 各组L-02细胞的RNA含量 | 第42-43页 |
| 4.3.2 GEN对受辐照L-02细胞DNA辐射损伤修复相关基因表达的影响 | 第43-44页 |
| 4.4 讨论 | 第44-47页 |
| 第五章 HERPUD1基因在DNA辐射损伤修复中的作用 | 第47-69页 |
| 5.1 材料 | 第47-49页 |
| 5.1.1 细胞株 | 第47页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第47-48页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第48-49页 |
| 5.2 方法 | 第49-53页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第49页 |
| 5.2.2 实验分组及处理 | 第49页 |
| 5.2.3 靶向HERPUD1基因shRNA表达载体的构建 | 第49-50页 |
| 5.2.4 干扰HERPUD1基因稳定转染人肝L-02细胞 | 第50页 |
| 5.2.5 荧光定量PCR检测所筛选克隆HERPUD1 mRNA的表达 | 第50-51页 |
| 5.2.6 Western blot鉴定稳定细胞系 | 第51页 |
| 5.2.7 MTT法检测细胞增殖率 | 第51页 |
| 5.2.8 单细胞凝胶电泳检测DNA损伤 | 第51-52页 |
| 5.2.9 流式细胞仪检测细胞周期 | 第52页 |
| 5.2.10 Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡 | 第52-53页 |
| 5.2.11 统计学处理 | 第53页 |
| 5.3 结果 | 第53-65页 |
| 5.3.1 HERPUD1 RNA干扰载体的构建 | 第53页 |
| 5.3.2 HERPUD1 RNA干扰质粒稳定转染的L-02细胞株的鉴定 | 第53-55页 |
| 5.3.3 HERPUD1被干扰后对受辐照细胞增殖率的影响 | 第55-57页 |
| 5.3.4 HERPUD1被干扰后对DNA辐射损伤的影响 | 第57-60页 |
| 5.3.5 受辐射干扰HERPUD1稳转细胞的周期分布变化 | 第60-62页 |
| 5.3.6 受辐射干扰HERPUD1稳转细胞的凋亡检测 | 第62-65页 |
| 5.4 讨论 | 第65-69页 |
| 第六章 总结与展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第82页 |
