| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-27页 |
| 1 胚胎干细胞研究进展 | 第16-18页 |
| 2 胚胎干细胞多能性维持的调控机制 | 第18-20页 |
| 2.1 Oct3 /4 和Nanog在ES细胞多能性维持中的作用 | 第18页 |
| 2.2 LIF-STAT信号通路 | 第18-19页 |
| 2.3 BMP信号通路 | 第19页 |
| 2.4 Wnt信号通路 | 第19-20页 |
| 3 LIF研究概况 | 第20-21页 |
| 4 LIF与小鼠胚胎干细胞 | 第21-22页 |
| 5 LIF与人胚胎干细胞 | 第22-23页 |
| 6 LIF与鱼类胚胎干细胞 | 第23-25页 |
| 7 科学问题的提出及本研究的目的意义 | 第25-27页 |
| 第二章 尼罗罗非鱼胚胎干细胞系的建立 | 第27-46页 |
| 1 引言 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-35页 |
| 2.1 实验动物 | 第28页 |
| 2.2 实验试剂与仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-35页 |
| 2.3.1 细胞的分离与原代培养 | 第29-30页 |
| 2.3.2 传代培养 | 第30页 |
| 2.3.3 细胞的冻存和复苏 | 第30页 |
| 2.3.4 碱性磷酸酶显色 | 第30-31页 |
| 2.3.5 体外诱导形成拟胚体 | 第31页 |
| 2.3.6 细胞总RNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.3.7 第一链cDNA的合成 | 第32页 |
| 2.3.8 RT-PCR | 第32-33页 |
| 2.3.9 系统进化分析 | 第33页 |
| 2.3.10 细胞荧光免疫组化 | 第33-34页 |
| 2.3.11 染色体分析 | 第34页 |
| 2.3.12 细胞增殖活性检测 | 第34-35页 |
| 2.3.13 统计分析 | 第35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-44页 |
| 3.1 细胞的分离与培养 | 第35-36页 |
| 3.2 碱性磷酸酶活性和多能性基因的表达 | 第36-37页 |
| 3.3 体外分化潜能 | 第37-39页 |
| 3.4 体内分化潜能 | 第39-40页 |
| 3.5 染色体分析 | 第40-41页 |
| 3.6 生长实验 | 第41-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 第三章 白血病抑制因子维持尼罗罗非鱼胚胎干细胞未分化状态的研究 | 第46-57页 |
| 1 引言 | 第46-47页 |
| 2 材料与方法 | 第47-51页 |
| 2.1 实验对象 | 第47页 |
| 2.2 主要试剂 | 第47-48页 |
| 2.3 实验方法 | 第48-51页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第48页 |
| 2.3.2 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第48页 |
| 2.3.3 AP染色 | 第48页 |
| 2.3.4 EdU法检测细胞增殖 | 第48-50页 |
| 2.3.5 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡双染 | 第50页 |
| 2.3.6 RT-PCR | 第50页 |
| 2.3.7 细胞转染 | 第50-51页 |
| 2.3.8 统计检验 | 第51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-56页 |
| 3.1 OnLif促进TES1细胞的增殖 | 第51-52页 |
| 3.2 OnLif促进TES1细胞的存活 | 第52-55页 |
| 3.3 OnLif维持TES1未分化状态 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 附录 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第68页 |
