| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第10-21页 |
| 1.1 铜离子转运载体因子 | 第11-17页 |
| 1.1.1 还原型谷胱甘肽 | 第11-13页 |
| 1.1.2 DJ-1 蛋白 | 第13-14页 |
| 1.1.3 铜转运蛋白CTR（Copper transporter,简称CTR1） | 第14页 |
| 1.1.4 功能强大的 Atox-1 | 第14-15页 |
| 1.1.5 生物体内运输铜离子的辅助蛋白因子及其相互作用关系 | 第15-17页 |
| 1.2 GSH、GR研究进展 | 第17-20页 |
| 1.2.1 GR概述 | 第18页 |
| 1.2.2 植物中GR的克隆和功能研究 | 第18页 |
| 1.2.3 GSH、GR与生物或非生物胁迫的关系研究 | 第18-20页 |
| 1.3 本论文研究意义及课题来源 | 第20-21页 |
| 第2章 巨尾桉GR基因的克隆 | 第21-33页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-29页 |
| 2.2.1 总RNA提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 mRNA纯化 | 第23页 |
| 2.2.3 cDNA第一链合成 | 第23-24页 |
| 2.2.4 PCR扩增GR目的片段 | 第24-25页 |
| 2.2.5 PCR目的片段回收 | 第25-26页 |
| 2.2.6 目的片段与pMD18-T Vector连接 | 第26-27页 |
| 2.2.7 重组载体转化 | 第27页 |
| 2.2.8 筛选pMD-EuGSH阳性克隆子 | 第27-29页 |
| 2.2.9 pMD-EuGR基因测序及序列提交 | 第29页 |
| 2.3 结果分析 | 第29-33页 |
| 2.3.1 巨尾桉GR基因的克隆及测序结果 | 第29-32页 |
| 2.3.2 巨尾桉GR基因的亚细胞定位 | 第32-33页 |
| 第3章 建立巨尾桉GR基因的原核表达体系 | 第33-47页 |
| 3.1 材料 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-38页 |
| 3.2.1 制备E.coli JM109感受态细胞 | 第33-34页 |
| 3.2.2 pMD-EuGR加入SalI、XhoI酶切位点 | 第34页 |
| 3.2.3 pMD-GR与pET-32 a(+)加入酶切位点并连接 | 第34-35页 |
| 3.2.4 IPTG诱导GR蛋白表达 | 第35-37页 |
| 3.2.5 Bradford法测定蛋白质含量 | 第37页 |
| 3.2.6 GR酶活性测定 | 第37-38页 |
| 3.3 结果分析 | 第38-46页 |
| 3.3.1 原核表达载体pET-EuGR的构建 | 第38-40页 |
| 3.3.2 GR蛋白原核表达分析 | 第40-41页 |
| 3.3.3 GR蛋白原核表达条件筛选 | 第41-43页 |
| 3.3.4 pET-EuGR阳性菌株GR酶活性检测 | 第43-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 第4章 GR在巨尾桉中的表达研究 | 第47-54页 |
| 4.1 材料 | 第47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-50页 |
| 4.2.1 巨尾桉盆栽苗驯化 | 第47-48页 |
| 4.2.2 巨尾桉叶片及组培苗总RNA提取 | 第48-49页 |
| 4.2.3 荧光定量PCR | 第49-50页 |
| 4.3 结果分析 | 第50-52页 |
| 4.3.1 GR基因在巨尾桉组培苗中的相对定量分析 | 第50-51页 |
| 4.3.2 GR基因在巨尾桉盆栽苗中的相对定量分析 | 第51-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-54页 |
| 第5章 GR与CCS、CSD在低温下的表达量关系研究 | 第54-73页 |
| 5.1 材料 | 第54-55页 |
| 5.2 实验方法 | 第55-57页 |
| 5.2.1 转基因巨尾桉盆栽苗驯化 | 第55页 |
| 5.2.2 转基因巨尾桉植株 SOD 酶活性测定 | 第55-56页 |
| 5.2.3 总RNA提取 | 第56页 |
| 5.2.4 荧光定量PCR | 第56-57页 |
| 5.3 结果分析 | 第57-71页 |
| 5.3.1 获得pBI-eSOD、pBD-anti-4CL-eCSD1转基因盆栽苗 | 第57页 |
| 5.3.2 转基因巨尾桉植株SOD酶活性测定 | 第57-61页 |
| 5.3.3 巨尾桉转基因植株筛选 | 第61-62页 |
| 5.3.4 室温下qPCR分析GR、CCS、CSD的相对表达量 | 第62-63页 |
| 5.3.5 4℃处理 36h后qPCR分析GR、CCS、CSD的相对表达量 | 第63-65页 |
| 5.3.6 4℃处理 48h后qPCR分析GR、CCS、CSD的相对表达量 | 第65-67页 |
| 5.3.7 EuCSD在 4℃低温处理前后的表达量变化 | 第67-68页 |
| 5.3.8 EuCCS在 4℃低温处理前后的表达量变化 | 第68-69页 |
| 5.3.9 EuGR在 4℃低温处理前后的表达量变化 | 第69页 |
| 5.3.10 结合植株SOD活性分析GR与CSD1激活途径的关联性 | 第69-71页 |
| 5.4 讨论 | 第71-73页 |
| 第6章 结论与展望 | 第73-75页 |
| 6.1 研究结论 | 第73-74页 |
| 6.2 展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 个人简历、在校期间发表的学术论文与研究成果 | 第82页 |
