| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 翻译效率的影响因素 | 第10-14页 |
| 1.1.1 mRNA二级结构 | 第10-12页 |
| 1.1.2 密码子偏好性 | 第12-13页 |
| 1.1.3 氨基酸电荷 | 第13页 |
| 1.1.4 其他因素 | 第13-14页 |
| 1.2 定点突变 | 第14-15页 |
| 1.2.1 大引物法 | 第14页 |
| 1.2.2 试剂盒法 | 第14-15页 |
| 1.2.3 一步定点突变法 | 第15页 |
| 1.3 APA1与硫化氢 | 第15-17页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-26页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第18页 |
| 2.2 试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.1 酶以及生化试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.2 培养基 | 第19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-26页 |
| 2.3.1 APA1基因克隆 | 第19-21页 |
| 2.3.1.1 酵母菌的培养以及DNA提取 | 第19页 |
| 2.3.1.2 引物设计 | 第19-20页 |
| 2.3.1.3 APA1基因扩增 | 第20页 |
| 2.3.1.4 克隆载体的连接、转化、鉴定 | 第20-21页 |
| 2.3.2 EGFP基因扩增 | 第21-22页 |
| 2.3.2.1 引物设计和EGFP基因扩增 | 第21-22页 |
| 2.3.2.2 克隆载体的连接、转化、鉴定 | 第22页 |
| 2.3.3 表达质粒pY16TEF1-EGFP-APA1的构建 | 第22页 |
| 2.3.4 同义突变 | 第22-24页 |
| 2.3.4.1 同义突变位点的选取 | 第22-23页 |
| 2.3.4.2 引物设计 | 第23页 |
| 2.3.4.3 定点突变 | 第23-24页 |
| 2.3.5 pY16TEF1 -EGFP-APA1转化酵母细胞 | 第24页 |
| 2.3.5.1 酵母感受态的制备 | 第24页 |
| 2.3.5.2 酵母细胞的转化 | 第24页 |
| 2.3.6 APA1基因表达鉴定 | 第24页 |
| 2.3.7 APA1基因蛋白表达量的测定 | 第24-26页 |
| 第三章 结果与分析 | 第26-35页 |
| 3.1 APA1基因和EGFP基因的克隆 | 第26页 |
| 3.2 表达载体p Y16TEF1-EGFP-APA1的构建 | 第26-28页 |
| 3.3 同义突变 | 第28-31页 |
| 3.3.1 突变位点的选取 | 第28-29页 |
| 3.3.2 突变引物设计 | 第29页 |
| 3.3.3 定点突变 | 第29-31页 |
| 3.4 APA1基因表达鉴定 | 第31-32页 |
| 3.5 各转化子荧光强度的测定 | 第32-35页 |
| 3.5.1 酿酒酵母细胞生长曲线 | 第32页 |
| 3.5.2 荧光强度的测定 | 第32-35页 |
| 第四章 讨论 | 第35-38页 |
| 4.1 翻译效率与mRNA二级结构 | 第35-37页 |
| 4.2 定点突变 | 第37-38页 |
| 第五章 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 附录 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |
