| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 符号表 | 第6-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 前言 | 第9页 |
| 1.2 三种引起奶牛流产疾病的概述 | 第9-14页 |
| 1.2.1 新孢子虫病(Neospora caninum) | 第9-12页 |
| 1.2.2 弓形虫病(Toxoplasma gondii) | 第12-13页 |
| 1.2.3 布氏杆菌病(Brucella abortus) | 第13-14页 |
| 1.3 目国内外研究现状及分析 | 第14-16页 |
| 1.3.1 病原生物学检测 | 第14-15页 |
| 1.3.2 血清学检测 | 第15-16页 |
| 1.3.3 分子生物学检测 | 第16页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 第2章 周口地区奶牛流产情况的走访调查 | 第17-21页 |
| 2.1 调查方法 | 第17页 |
| 2.2 结果 | 第17-20页 |
| 2.2.1 流产发生率 | 第17-18页 |
| 2.2.2 流产与胎次之间的关系 | 第18-19页 |
| 2.2.3 流产与月份之间的关系 | 第19-20页 |
| 2.3 讨论 | 第20-21页 |
| 第3章 多重巢式PCR方法的建立与优化 | 第21-43页 |
| 3.1 材料 | 第21页 |
| 3.1.1 核酸样品及主要试剂 | 第21页 |
| 3.1.2 主要仪器和耗材 | 第21页 |
| 3.2 方法 | 第21-28页 |
| 3.2.1 三种病原特异性引物的设计合成和稀释 | 第21-22页 |
| 3.2.2 重组质粒的构建 | 第22-26页 |
| 3.2.3 单巢式PCR反应条件的优化 | 第26-27页 |
| 3.2.4 多重巢式PCR反应条件的优化 | 第27页 |
| 3.2.5 多重巢式PCR方法的特异性与重复性检测 | 第27页 |
| 3.2.6 多重巢式PCR方法的敏感性检测 | 第27-28页 |
| 3.2.7 多重巢式PCR方法与单巢式PCR方法对比 | 第28页 |
| 3.3 结果 | 第28-40页 |
| 3.3.1 阳性DNA检测结果 | 第28-29页 |
| 3.3.2 重组质粒阳性检测结果 | 第29页 |
| 3.3.3 单巢式PCR反应条件的优化结果 | 第29-32页 |
| 3.3.4 多重巢式PCR反应条件的优化结果 | 第32-37页 |
| 3.3.5 多重巢式PCR方法的特异性与重复性检测结果 | 第37-38页 |
| 3.3.6 多重巢式PCR方法的敏感性检测结果 | 第38-40页 |
| 3.3.7 多重巢式PCR方法与单巢式PCR方法临床样品检测对比结果 | 第40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-43页 |
| 第4章 多重巢式PCR方法的临床应用 | 第43-51页 |
| 4.1 材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 主要试剂与仪器设备 | 第43-44页 |
| 4.2 方法 | 第44-46页 |
| 4.2.1 样品基因组DNA的提取 | 第44-45页 |
| 4.2.2 多重巢式PCR方法检测 | 第45页 |
| 4.2.3 凝胶电泳检测 | 第45页 |
| 4.2.4 测序及比对分析 | 第45-46页 |
| 4.2.5 周口地区检测结果与洛阳地区比对分析 | 第46页 |
| 4.3 结果 | 第46-49页 |
| 4.3.1 周口地区检测结果 | 第46-47页 |
| 4.3.2 周口地区与洛阳地区检测结果对比 | 第47-48页 |
| 4.3.3 根据不同养殖场分类结果分析 | 第48-49页 |
| 4.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第5章 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-59页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第59页 |
