致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
SUMMARY | 第9-10页 |
第1章 引言 | 第13-31页 |
1.1 选题的背景与意义 | 第13-26页 |
1.1.1 Non-coding RNA | 第13页 |
1.1.2 端粒与端粒酶 | 第13-15页 |
1.1.3 端粒酶RNA | 第15-21页 |
1.1.4 核糖核酸酶 (ribonuclease, RNase) | 第21-25页 |
1.1.5 选题意义 | 第25-26页 |
1.2 hTRIR的功能研究 | 第26-29页 |
1.2.1 hTRIR蛋白的相关信息 | 第26-28页 |
1.2.2 hTRIR蛋白在人体中的分布 | 第28-29页 |
1.2.3 hTRIR蛋白的功能研究 | 第29页 |
1.3 拟解决的关键科学问题 | 第29-31页 |
第2章 材料与方法 | 第31-43页 |
2.1 hTRIR的发现 | 第31页 |
2.2 实验材料和方法 | 第31-43页 |
2.2.1 细胞培养 | 第31-32页 |
2.2.2 细胞核蛋白(NE) 的提取 | 第32-34页 |
2.2.3 Total RNA提取 | 第34-35页 |
2.2.4 hTRIR cDNA链合成 | 第35页 |
2.2.5 原核表达载体的构建 | 第35-36页 |
2.2.6 原核表达载体的转化与蛋白诱导 | 第36页 |
2.2.7 原核表达蛋白的纯化 | 第36-38页 |
2.2.8 实验动物伦理声明与hTRIR多克隆抗体的制备 | 第38页 |
2.2.9 免疫印迹 (Western Blot) | 第38-39页 |
2.2.10 α-~(32)P-GTP标记的T7聚合酶转录 | 第39-40页 |
2.2.11 RNA体外切割实验 | 第40-41页 |
2.2.12 DNA体外切割实验 | 第41-42页 |
2.2.13 统计分析 | 第42-43页 |
第3章 hTRIR是一种新发现的RNase | 第43-73页 |
3.1 hTRIR蛋白 | 第43页 |
3.2 hTRIR蛋白是一种新发现的RNase | 第43-73页 |
3.2.1 hTRIR蛋白的质谱鉴定 | 第43-45页 |
3.2.2 hTRIR表达载体的构建与蛋白质纯化 | 第45-48页 |
3.2.3 hTRIR蛋白在不同细胞系中的表达 | 第48-49页 |
3.2.4 hTRIR功能的生物信息学分析 | 第49-53页 |
3.2.5 hTRIR可以切割不同形式的RNA | 第53-55页 |
3.2.6 hTRIR不能切割不同类型的DNA | 第55-57页 |
3.2.7 hTRIR体外酶切条件的优化 | 第57-64页 |
3.2.8 hTRIR蛋白质的C端含有RNase活性结构域 | 第64-66页 |
3.2.9 hTRIR是人体中一种新发现的RNase | 第66-73页 |
第4章 讨论与展望 | 第73-79页 |
4.1 hTRIR是一种新发现的RNase | 第73-77页 |
4.2 展望 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-105页 |
附录 | 第105-107页 |
作者简介 | 第107页 |