| 中文摘要 | 第5-6页 |
| 英文摘要 | 第6页 |
| 第1章 前言 | 第10-22页 |
| 1.1 核苷酸简介 | 第10-12页 |
| 1.2 尿苷5’-一磷酸(5'-UMP)和胞苷5’-一磷酸(5’-CMP)的简介 | 第12-13页 |
| 1.3 5’-尿苷三磷酸(5'-UTP)的简介 | 第13-14页 |
| 1.4 尿苷-胞苷激酶(UCK)、尿苷酸激酶和乙酸激酶(ACK)简介 | 第14-16页 |
| 1.4.1 尿苷-胞苷激酶(UCK) | 第14-15页 |
| 1.4.2 尿苷酸激酶(UMPK) | 第15页 |
| 1.4.3 乙酸激酶(ACK) | 第15-16页 |
| 1.5 共表达简介 | 第16-18页 |
| 1.6 多酶反应体系 | 第18-20页 |
| 1.7 研究路径 | 第20-21页 |
| 1.8 研究意义及流程 | 第21-22页 |
| 第2章 应用尿苷-胞苷激酶磷酸化尿苷/胞苷 | 第22-36页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-28页 |
| 2.1.1 菌株,质粒及实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第23页 |
| 2.1.3 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第28-34页 |
| 2.2.1 SDS-PAGE图 | 第28-29页 |
| 2.2.2 酶比活力结果 | 第29页 |
| 2.2.3 不同菌种来源的UCK和ACK组合反应结果 | 第29-30页 |
| 2.2.4 酶量对反应的影响 | 第30-31页 |
| 2.2.5 磷酸供体对反应的影响 | 第31-32页 |
| 2.2.6 GTP浓度对反应的影响 | 第32-33页 |
| 2.2.7 底物浓度对反应的影响 | 第33页 |
| 2.2.8 温度对反应的影响 | 第33-34页 |
| 2.2.9 pH对反应的影响 | 第34页 |
| 2.3 小结 | 第34-36页 |
| 第3章 UCK和ACK共表达菌的构建及其在核苷酸合成中的应用 | 第36-45页 |
| 3.1 材料与方法 | 第37-39页 |
| 3.1.1 菌株,质粒及实验试剂 | 第37页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第37页 |
| 3.1.3 实验方法 | 第37-39页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第39-43页 |
| 3.2.1 SDS-PAGE图 | 第39-40页 |
| 3.2.2 共表达重组菌DU-A(L)的蛋白含量测定结果 | 第40页 |
| 3.2.3 底物浓度对共表达重组菌DU-A(L)酶液催化反应的影响 | 第40-41页 |
| 3.2.4 共表达重组菌DU-A(L)酶液量对反应的影响 | 第41-42页 |
| 3.2.5 共表达酶液催化反应中GTP浓度对反应的影响 | 第42-43页 |
| 3.3 小结 | 第43-45页 |
| 第4章 应用尿苷酸激酶磷酸化5’-UMP合成5’-UTP的研究 | 第45-52页 |
| 4.1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 4.1.1 菌株,质粒及实验试剂 | 第45页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第45页 |
| 4.1.3 实验方法 | 第45-46页 |
| 4.2 实验结果 | 第46-50页 |
| 4.2.1 重组菌pUMPK诱导表达 | 第46-47页 |
| 4.2.2 UMPK活性测定结果 | 第47页 |
| 4.2.3 尿苷酸激酶(UMPK)酶量对磷酸化转化率的影响 | 第47-48页 |
| 4.2.4 乙酸激酶酶量对反应的影响 | 第48-49页 |
| 4.2.5 5'-UMP浓度对反应的影响 | 第49页 |
| 4.2.6 不同磷酸供体对5'-UMP磷酸化反应的影响 | 第49-50页 |
| 4.2.7 不同的ATP梯度对5'-UMP磷酸化反应的影响 | 第50页 |
| 4.2.8 温度对5’-UMP磷酸化反应的影响 | 第50页 |
| 4.3 小结 | 第50-52页 |
| 第5章 以尿苷为底物一步酶法合成尿苷三磷酸 | 第52-57页 |
| 5.1 材料与方法 | 第52-53页 |
| 5.1.1 菌株,质粒及实验试剂 | 第52页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第52页 |
| 5.1.3 实验方法 | 第52-53页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第53-56页 |
| 5.2.1 尿苷酸激酶的酶量对5'-UTP产量的影响 | 第53-54页 |
| 5.2.2 GTP、ATP浓度对UTP产量的影响 | 第54-56页 |
| 5.2.3 ACK酶量对5'-UTP产量的影响 | 第56页 |
| 5.3 小结 | 第56-57页 |
| 第6章 结论与展望 | 第57-59页 |
| 6.1 结论 | 第57页 |
| 6.2 展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录Ⅰ | 第68页 |
