| 摘要 | 第10-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 前言 | 第13页 |
| 1.2 GABA的理化性质与分子结构 | 第13-14页 |
| 1.3 GABA的生理功效与应用 | 第14-15页 |
| 1.3.1 抗衰老 | 第14页 |
| 1.3.2 调节血压 | 第14页 |
| 1.3.3 治疗精神方面的疾病 | 第14-15页 |
| 1.3.4 功效性医药与食品的中间体 | 第15页 |
| 1.3.5 食品与饲料添加剂 | 第15页 |
| 1.3.6 其他功效 | 第15页 |
| 1.4 GABA的代谢途径 | 第15-16页 |
| 1.5 GABA的制备方法 | 第16-20页 |
| 1.5.1 化学合成法 | 第16-17页 |
| 1.5.2 植物富集法 | 第17页 |
| 1.5.3 微生物法 | 第17-18页 |
| 1.5.4 其它方法 | 第18页 |
| 1.5.5 微生物法制备GABA的研究现状 | 第18-20页 |
| 1.6 GABA的测定方法 | 第20-22页 |
| 1.6.1 比色法 | 第21页 |
| 1.6.2 纸上电泳法 | 第21页 |
| 1.6.3 氨基酸分析仪法 | 第21页 |
| 1.6.4 薄层扫描法 | 第21-22页 |
| 1.6.5 高效液相色谱法（HPLC） | 第22页 |
| 1.6.6 超高效液相色谱-质谱/质谱联用法（UPLC-MS/MS） | 第22页 |
| 1.6.7 气相－质谱联用检测法（GC-MS） | 第22页 |
| 1.7 论文选题背景及目的意义 | 第22-23页 |
| 1.8 本课题主要研究内容 | 第23-25页 |
| 第2章 转化法合成GABA霉菌的筛选与鉴定 | 第25-39页 |
| 2.1 前言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.2.1 菌种 | 第25页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2.4 试剂溶液及培养基成分 | 第27-28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28页 |
| 2.3.1 霉菌菌种的培养 | 第28页 |
| 2.3.2 转化合成GABA | 第28页 |
| 2.4 GABA的测定 | 第28-29页 |
| 2.4.1 GABA的定性检测 | 第28-29页 |
| 2.4.2 GABA 及 L-Glu 的定量检测 | 第29页 |
| 2.5 酶活性的定义及测定 | 第29-30页 |
| 2.6 菌体生物量（菌体干重）的测定 | 第30-31页 |
| 2.6.1 高产GABA转化菌株的筛选 | 第30页 |
| 2.6.2 菌种鉴定 | 第30-31页 |
| 2.6.3 菌种的诱变处理 | 第31页 |
| 2.6.4 高产GABA突变菌株的遗传稳定性试验 | 第31页 |
| 2.7 试验结果及分析 | 第31-38页 |
| 2.7.1 菌株的初筛 | 第31-33页 |
| 2.7.2 GABA标准曲线的建立 | 第33-34页 |
| 2.7.3 菌株的复筛 | 第34-35页 |
| 2.7.4 菌株的形态学 | 第35-36页 |
| 2.7.5 紫外-LiCl 复合诱变及诱变时间的选择 | 第36页 |
| 2.7.6 紫外-LiCl 复合诱变筛选菌株的转化结果 | 第36-37页 |
| 2.7.7 高产突变菌株 NW-3 的遗传稳定性试验 | 第37-38页 |
| 2.8 本章小结 | 第38-39页 |
| 第3章 高产菌株NW-3发酵产GAD条件的优化 | 第39-55页 |
| 3.1 前言 | 第39页 |
| 3.2 实验准备 | 第39-40页 |
| 3.2.1 菌种的选择 | 第39页 |
| 3.2.2 试剂与材料 | 第39页 |
| 3.2.3 仪器与设备 | 第39-40页 |
| 3.2.4 试剂溶液及培养基 | 第40页 |
| 3.3 实验方法及步骤 | 第40页 |
| 3.3.1 菌种NW-3的培养及GABA的合成 | 第40页 |
| 3.3.2 GABA的检测方法 | 第40页 |
| 3.3.3 测定菌体的生产曲线 | 第40页 |
| 3.4 实验结果及分析 | 第40-54页 |
| 3.4.1 培养基条件的优化 | 第40-46页 |
| 3.4.2 正交试验 | 第46-47页 |
| 3.4.3 最佳发酵产酶条件的确定 | 第47-54页 |
| 3.5 本章小结 | 第54-55页 |
| 第4章 固定化NW-3菌体产γ-氨基丁酸转化条件的优化 | 第55-77页 |
| 4.1 引言 | 第55页 |
| 4.2 实验材料 | 第55-57页 |
| 4.2.1 菌种 | 第55页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第55-56页 |
| 4.2.3 主要仪器设备 | 第56页 |
| 4.2.4 缓冲液的配制 | 第56-57页 |
| 4.2.5 底物转化液的配制 | 第57页 |
| 4.2.6 GABA标准液的配制 | 第57页 |
| 4.2.7 衍生剂邻苯二甲醛（OPA）溶液的配制 | 第57页 |
| 4.2.8 磷酸二氢钾（KH_2PO_4）缓冲液 | 第57页 |
| 4.3 实验方法 | 第57-58页 |
| 4.3.1 培养菌体方法 | 第57-58页 |
| 4.3.2 固定化菌体方法 | 第58页 |
| 4.3.3 L-Glu 的测定 | 第58页 |
| 4.3.4 L-Glu 负流量的测定 | 第58页 |
| 4.3.5 菌体生物量（菌体干重）的测定、GABA摩尔转化率的计算 | 第58页 |
| 4.3.6 响应面试验分析固定化菌体最佳转化条件 | 第58页 |
| 4.3.7 标准样与转化液的柱前衍生 | 第58页 |
| 4.4 菌体固定化条件的选择 | 第58-61页 |
| 4.4.1 固定化菌体交联剂的选择 | 第58页 |
| 4.4.2 酶活保留率的计算 | 第58-59页 |
| 4.4.3 最佳固定化条件的确立 | 第59-61页 |
| 4.5 固定化NW-3菌体转化条件的优化 | 第61-72页 |
| 4.5.1 固定化菌体转化反应最佳温度的确定 | 第61-62页 |
| 4.5.2 固定化菌体转化反应最佳pH值的确定 | 第62-63页 |
| 4.5.3 固定化菌体转化反应最佳缓冲体系的确定 | 第63-64页 |
| 4.5.4 固定化菌体转化反应最佳底物浓度的确定 | 第64页 |
| 4.5.5 固定化菌体转化反应最佳菌体添加量的确定 | 第64-65页 |
| 4.5.6 固定化菌体转化反应最佳摇床转速的确定 | 第65-66页 |
| 4.5.7 固定化菌体转化反应最佳转化时间的确定 | 第66-67页 |
| 4.5.8 响应面试验的设计 | 第67-72页 |
| 4.6 固定化NW-3菌体的连续转化稳定性试验 | 第72-73页 |
| 4.6.1 模拟间歇式反应器原理 | 第72-73页 |
| 4.7 高效液相色谱检测 | 第73-75页 |
| 4.7.1 检测条件 | 第73页 |
| 4.7.2 检测过程 | 第73-74页 |
| 4.7.3 检测结果 | 第74-75页 |
| 4.8 小结 | 第75-77页 |
| 第5章 结论及展望 | 第77-79页 |
| 5.1 全文结论 | 第77-78页 |
| 5.1.1 霉菌菌株的筛选 | 第77页 |
| 5.1.2 NW-3 菌株发酵产 GAD 条件的优化 | 第77-78页 |
| 5.1.3 固定化 NW-3 菌株转化产 GAD 条件的优化 | 第78页 |
| 5.2 展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
| 在学期间发表学术论文 | 第87页 |
