摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
1 前言 | 第8-20页 |
1.1 线粒体 | 第8-13页 |
1.1.1 线粒体氧化 | 第11页 |
1.1.2 线粒体融合与分裂 | 第11-12页 |
1.1.3 线粒体自噬与细胞凋亡 | 第12-13页 |
1.2 线粒体聚合酶 | 第13-15页 |
1.2.1 线粒体DNA复制体 | 第13-14页 |
1.2.2 线粒体DNA复制 | 第14页 |
1.2.3 线粒体DNA聚合酶gamma复制保真性 | 第14-15页 |
1.3 纳米银 | 第15-18页 |
1.3.1 纳米银的毒理学效应 | 第17-18页 |
1.3.2 纳米银与线粒体 | 第18页 |
1.4 研究目的与意义 | 第18-19页 |
1.5 课题研究内容 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-36页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 实验试剂 | 第20-21页 |
2.1.2 实验器材 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-36页 |
2.2.1 目的基因克隆 | 第21-24页 |
2.2.2 蛋白质表达纯化 | 第24-25页 |
2.2.3 蛋白质肽指纹鉴定 | 第25-26页 |
2.2.4 细胞培养 | 第26页 |
2.2.5 MTT实验 | 第26-27页 |
2.2.6 实时定量PCR | 第27-30页 |
2.2.7 蛋白质免疫印迹实验 | 第30-34页 |
2.2.8 纳米银与线粒体蛋白pull-down assay | 第34页 |
2.2.9 纳米银与线粒体聚合酶小亚基纯蛋白 | 第34-36页 |
3 结果与讨论 | 第36-46页 |
3.1 线粒体聚合酶小亚基质粒构建 | 第36-37页 |
3.2 线粒体聚合酶小亚基蛋白纯化 | 第37-38页 |
3.3 线粒体聚合酶小亚基蛋白肽指纹图谱 | 第38-39页 |
3.4 细胞显微镜形态观察结果 | 第39-40页 |
3.5 MTT实验结果 | 第40-41页 |
3.6 实时定量PCR实验结果 | 第41-43页 |
3.7 纳米银与线粒体蛋白裂解液:pull-down实验 | 第43-44页 |
3.8 纳米银与线粒体聚合酶蛋白:pull-down实验 | 第44-46页 |
4 结论 | 第46-47页 |
5 展望 | 第47-48页 |
6 参考文献 | 第48-54页 |
7 攻读学位期间发表的论文 | 第54-55页 |
8 致谢 | 第55-56页 |
9 附录 | 第56-64页 |