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红花CtDof基因的克隆、表达分析及功能验证

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第11-23页
    1.1 红花的简述第11-13页
        1.1.1 红花的起源与分布第11页
        1.1.2 红花主要的化学成分及药理活性第11-12页
        1.1.3 红花的应用第12-13页
    1.2 转录因子的概述第13-17页
        1.2.1 转录因子的定义第13-14页
        1.2.2 转录因子的结构特征第14页
        1.2.3 转录因子的生物学功能第14-17页
    1.3 Dof转录因子的概述第17-22页
        1.3.1 Dof转录因子的定义第17-18页
        1.3.2 Dof转录因子的结构特征第18页
        1.3.3 Dof转录因子的生物学功能第18-22页
    1.4 研究的内容与意义第22-23页
第2章 红花CtDof基因家族的表达分析第23-32页
    2.1 前言第23页
    2.2 实验材料、试剂和仪器第23-24页
        2.2.1 实验材料第23页
        2.2.2 实验试剂第23-24页
        2.2.3 实验仪器第24页
    2.3 实验方法第24-27页
        2.3.1 实时荧光定量PCR引物的设计第24-25页
        2.3.2 实时荧光定量PCR反应cDNA的制备第25-26页
        2.3.3 Real-Time PCR反应体系及反应条件第26-27页
    2.4 结果与分析第27-31页
        2.4.1 红花CtDof基因荧光定量PCR的扩增效率考察第27-28页
        2.4.2 在红花不同组织部位的相对表达量第28-30页
        2.4.3 在红花种子不同发育时期的相对表达量第30-31页
    2.5 讨论第31-32页
第3章 红花CtDof1基因的克隆及生物信息学分析第32-49页
    3.1 前言第32页
    3.2 实验材料、试剂和仪器第32-33页
        3.2.1 实验材料第32页
        3.2.2 实验试剂第32-33页
        3.2.3 实验仪器第33页
    3.3 实验方法第33-42页
        3.3.1 总RNA的提取第33-34页
        3.3.2 总RNA反转录成cDNA第34-35页
        3.3.3 红花CtDof1中间片段的克隆第35-39页
        3.3.4 红花CtDof13’末端的克隆第39-41页
        3.3.5 红花CtDof1基因的克隆第41-42页
        3.3.6 红花CtDof1基因的生物信息学分析第42页
    3.4 结果与分析第42-48页
        3.4.1 红花种子总RNA的检测第42-43页
        3.4.2 红花CtDof1基因中间片段在红花基因组中的验证第43页
        3.4.3 红花CtDof1基因 3’RACE的克隆第43-44页
        3.4.4 红花CtDof1基因全长基因的克隆第44页
        3.4.5 红花CtDof1基因及编码蛋白的生物信息学分析第44-48页
    3.5 讨论第48-49页
第4章 红花CtDof1基因的功能验证第49-68页
    4.1 前言第49-50页
    4.2 实验材料、试剂和仪器第50-51页
        4.2.1 实验材料第50页
        4.2.2 实验试剂第50页
        4.2.3 实验仪器第50-51页
    4.3 实验方法第51-58页
        4.3.1 目的基因引物的设计第51页
        4.3.2 目的基因的克隆第51-52页
        4.3.3 红花CtDof1基因植物超表达载体的连接第52-53页
        4.3.4 红花CtDof1基因在植物中的超表达第53-56页
        4.3.5 CtDof1转基因拟南芥在盐胁迫应答中的功能第56-58页
    4.4 结果与分析第58-67页
        4.4.1 红花CtDof1基因植物超表达载体的构建第58-61页
        4.4.2 红花CtDof1基因在拟南芥中的超表达第61-62页
        4.4.3 红花CtDof1基因在红花中的超表达第62-64页
        4.4.4 CtDof1转基因拟南芥在盐胁迫应答中的功能第64-67页
    4.5 讨论第67-68页
第5章 红花CtDof1基因原核表达载体的构建及诱导分析第68-79页
    5.1 前言第68页
    5.2 实验材料、试剂和仪器第68-69页
        5.2.1 实验材料第68页
        5.2.2 实验试剂第68-69页
        5.2.3 实验仪器第69页
    5.3 实验方法第69-74页
        5.3.1 目的基因引物的设计第69页
        5.3.2 红花CtDof1基因原核表达载体的构建第69-70页
        5.3.3 红花CtDof1基因的诱导表达第70-71页
        5.3.4 诱导表达的产物检测第71-74页
    5.4 结果与分析第74-78页
    5.5 讨论第78-79页
结论第79-82页
参考文献第82-89页
作者在攻读硕士学位期间主要研究成果第89-90页
致谢第90页

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