符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-26页 |
1.1 鸡抗病毒固有免疫的研究进展 | 第11-20页 |
1.1.1 鸡抗病毒固有免疫信号通路 | 第11-18页 |
1.1.2 信号分子通路的检测方法 | 第18-20页 |
1.2 荧光定量检测方法的研究进展 | 第20-23页 |
1.2.1 实时荧光定量RT-PCR的定量原理 | 第20页 |
1.2.2 实时荧光定量PCR的基本概念 | 第20页 |
1.2.3 实时荧光定量的探针种类及工作原理 | 第20-22页 |
1.2.4 实时荧光定量的定量方法 | 第22-23页 |
1.2.5 实时荧光定量检测方法在畜牧生产中的应用 | 第23页 |
1.3 新城疫研究概述 | 第23-25页 |
1.3.1 新城疫病毒的一般生物学特性 | 第24页 |
1.3.2 新城疫病毒的流行病学研究 | 第24-25页 |
1.3.3 新城疫病毒致病的分子机制 | 第25页 |
1.3.4 新城疫固有免疫研究进展 | 第25页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-32页 |
2.1 材料 | 第26-27页 |
2.1.1 病毒与鸡胚 | 第26页 |
2.1.2 主要试剂 | 第26页 |
2.1.3 主要仪器 | 第26-27页 |
2.1.4 主要缓冲液及试剂配制 | 第27页 |
2.2 方法 | 第27-32页 |
2.2.1 RNA的提取与反转录 | 第27-28页 |
2.2.2 鸡固有免疫信号分子Q-PCR系列检测方法的建立 | 第28-30页 |
2.2.3 不同毒力和剂量的新城疫病毒感染对鸡固有免疫信号通路的转录调控 | 第30-32页 |
3 结果与分析 | 第32-50页 |
3.1 实时荧光定量PCR方法的建立 | 第32-44页 |
3.1.1 引物及质粒标准品的制备 | 第32页 |
3.1.2 Q-PCR体系、循环参数及结果判定 | 第32-33页 |
3.1.3 Q-PCR的标准曲线及回归方程的建立 | 第33-37页 |
3.1.4 Q-PCR方法的特异性试验 | 第37-40页 |
3.1.5 Q-PCR方法的敏感性试验 | 第40页 |
3.1.6 Q-PCR方法的重复性试验 | 第40-44页 |
3.2 不同毒力和剂量的新城疫病毒感染对鸡固有免疫信号通路的转录调控 | 第44-50页 |
3.2.1 EID50和病毒增殖检测 | 第44页 |
3.2.2 宿主固有免疫应答的模式与病毒的感染剂量相关联 | 第44-47页 |
3.2.3 宿主固有免疫应答的模式与病毒的毒力相关 | 第47-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
4.1 实时荧光定量PCR方法的建立 | 第50-51页 |
4.2 不同毒力和剂量的新城疫病毒感染对鸡固有免疫信号通路的转录调控 | 第51-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第61页 |