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黄河鲤LGP2和STING基因的鉴定及其遗传多态性与鲤疱疹病毒感染的筛选

摘要第5-8页
Abstract第8-11页
第一章 文献综述第15-45页
    1.1 鱼类免疫系统概述第15页
    1.2 先天性免疫识别受体系统第15-23页
        1.2.1 TLRs(Toll样受体)及其信号通路第16-17页
        1.2.2 RIG-I样受体(RLRs)及其依赖的信号通路第17-20页
        1.2.3 NOD样受体(NLRs)及其依赖的信号通路第20-22页
        1.2.4 C型凝集素受体(CLRs)及其依赖的信号通路第22-23页
    1.3 天然免疫系统对病原核酸的识别第23-42页
        1.3.1 对DNA病毒的识别第24-34页
        1.3.2 对RNA病毒的识别第34-42页
    1.4 展望第42-43页
    1.5 研究的目的和意义第43-45页
第二章 黄河鲤LGP2基因鉴定及其核苷酸多态性与鲤疱疹病毒感染的关联研究第45-79页
    2.1 前言第45-46页
    2.2 材料和方法第46-54页
        2.2.1 主要化学试剂第46页
        2.2.2 主要仪器设备第46页
        2.2.3 制备病毒悬液第46-47页
        2.2.4 实验动物及病毒感染实验第47-48页
        2.2.5 LGP2基因cDNA全长的获得第48-50页
        2.2.6 提取黄河鲤的总DNA第50页
        2.2.7 扩增LGP2基因组全长第50-51页
        2.2.8 基因组步移获得LGP2基因 5’侧翼区第51页
        2.2.9 生物信息学分析第51页
        2.2.10 5’侧翼序列启动子区的活性验证第51-52页
        2.2.11 实时定量检测第52-53页
        2.2.12 细胞感染及取样第53页
        2.2.13 LGP2分析核苷酸多态性与黄河鲤抗KHV感染表型的关联性第53-54页
        2.2.14 与性状关联位点的二次验证第54页
    2.3 结果第54-75页
        2.3.1 LGP2 cDNA序列分析第54-55页
        2.3.2 黄河鲤LGP2基因DNA序列分析第55-62页
        2.3.3 不同物种间LGP2基因的结构比较第62-64页
        2.3.4 LGP25’侧翼序列启动子活性验证第64页
        2.3.5 LGP2 mRNA的组织分布及病毒刺激后时序表达谱第64-68页
        2.3.6 CFC经poly(I:C)和KHV刺激后LGP2 mRNA的表达第68页
        2.3.7 LGP2核苷酸多态性位点与黄河鲤抗KHV感染性状关联性第68-74页
        2.3.8 LGP2核苷酸多态性位点与黄河鲤抗KHV感染性状关联性二次验证第74-75页
    2.4 讨论第75-79页
第三章 黄河鲤STING基因的克隆与表达以及与疱疹病毒病的关联分析第79-107页
    3.1 前言第79-80页
    3.2 材料和方法第80-84页
        3.2.1 主要化学试剂第80页
        3.2.2 主要仪器设备第80页
        3.2.3 制备病毒悬液第80-81页
        3.2.4 实验动物及病毒感染实验第81页
        3.2.5 STING基因cDNA全长的克隆第81-82页
        3.2.6 黄河鲤基因组DNA提取第82页
        3.2.7 STING基因内含子的扩增第82-83页
        3.2.8 STING基因 5’侧翼序列的扩增第83页
        3.2.9 生物信息学分析第83页
        3.2.10 5’侧翼序列启动子活性验证第83-84页
        3.2.11 实时定量检测第84页
        3.2.12 细胞感染及取样第84页
        3.2.13 STING核苷酸多态性与黄河鲤抗KHV感染表型的关联分析第84页
        3.2.14 与性状关联位点的二次验证第84页
    3.3 结果第84-104页
        3.3.1 STING cDNA序列分析第84-90页
        3.3.2 黄河鲤STING全基因序列分析第90-91页
        3.3.3 侧翼序列及其生物信息学分析第91页
        3.3.4 不同物种间STING基因的结构比较第91-92页
        3.3.5 STING 5’侧翼序列启动子活性验证第92-93页
        3.3.6 STING mRNA的组织分布及病毒刺激后时序表达谱第93-97页
        3.3.7 CFC经KHV,Poly (I : C)和Poly (dA- dT)刺激后STING基因的表达分析第97-99页
        3.3.8 STING核苷酸多态性位点与黄河鲤抗KHV感染性状关联性第99-104页
        3.3.9 STING SNPs与黄河鲤抗KHV感染性状关联性二次验证第104页
    3.4 讨论第104-107页
第四章 利用转录组研究黄河鲤免疫基因与抗KHV病毒的相关性第107-128页
    4.1 前言第107-108页
    4.2 材料和方法第108-112页
        4.2.1 主要化学试剂第108页
        4.2.2 主要仪器设备第108页
        4.2.3 制备病毒悬液第108页
        4.2.4 实验动物及病毒感染实验第108页
        4.2.5 转录组文库构建和测序第108-109页
        4.2.6 数据库生物信息分析第109-111页
        4.2.7 SSR分析第111页
        4.2.8 SNP筛选第111-112页
        4.2.9 可变剪接事件识别及分析第112页
    4.3 结果第112-126页
        4.3.1 样本中总RNA质量检测分析第112页
        4.3.2 四个组织的转录组统计结果第112-113页
        4.3.3 文库Unigene比对注释概况第113-118页
        4.3.4 差异表达基因的鉴定第118-122页
        4.3.5 免疫信号相关基因分析第122-123页
        4.3.6 SNP和InDel分析第123-124页
        4.3.7 SSR分析第124-125页
        4.3.8 选择性剪切概况分析第125-126页
    4.4 讨论第126-128页
第五章 结论第128-130页
参考文献第130-148页
附录第148-159页
缩略 词第159-161页
致谢第161-163页
作者简介第163页

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