致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 引言 | 第16-28页 |
1.1 转基因作物检测研究进展 | 第16-17页 |
1.1.1 转基因作物发展概况 | 第16页 |
1.1.2 转基因作物安全与标识概况 | 第16页 |
1.1.3 转基因检测技术概况 | 第16-17页 |
1.2 G-四链体的研究进展 | 第17-27页 |
1.2.1 G-四链体的介绍 | 第17-18页 |
1.2.2 G-四链体的拓扑构型 | 第18-19页 |
1.2.3 研究G-四链体结构的方法 | 第19-20页 |
1.2.3.1 非变性凝胶法 | 第19页 |
1.2.3.2 圆二色谱(CD) | 第19-20页 |
1.2.3.3 荧光共振能量转移(FRET) | 第20页 |
1.2.3.4 核磁共振(NMR) | 第20页 |
1.2.4 G-四链体的应用 | 第20-24页 |
1.2.4.1 G-四链体用于金属离子的检测 | 第21页 |
1.2.4.2 G-四链体用于核苷酸的检测 | 第21-23页 |
1.2.4.3 G-四链体用于蛋白质等物质的检测 | 第23-24页 |
1.2.5 G-四链体与DNA扩增技术联用研究进展 | 第24-27页 |
1.2.5.1 G-四链体和PCR结合检测方法 | 第24-25页 |
1.2.5.2 G-四链体和SDA结合检测方法 | 第25-26页 |
1.2.5.3 G-四链体和RCA结合检测方法 | 第26-27页 |
1.3 本文研究的主要目的和意义 | 第27-28页 |
第二章 G-四链体与等温扩增联用转基因检测方法的研究 | 第28-44页 |
2.1 材料与方法 | 第28-32页 |
2.1.1 仪器 | 第28-29页 |
2.1.2 试剂 | 第29-30页 |
2.1.3 引物设计 | 第30页 |
2.1.4 G-四链体和等温扩增结合检测体系 | 第30-31页 |
2.1.5 G-四链体和等温扩增结合检测方法灵敏度 | 第31-32页 |
2.2 结果与分析 | 第32-43页 |
2.2.1 G-四链体和等温扩增结合检测方法的建立 | 第32-33页 |
2.2.2 G-四链体和等温扩增结合检测方法灵敏度分析 | 第33-34页 |
2.2.3 条件优化 | 第34-43页 |
2.2.3.1 G-四链体等温扩增检测体系缓冲液配比的优化 | 第34-36页 |
2.2.3.2 G-四链体等温扩增检测体系Mg2+浓度优化 | 第36-37页 |
2.2.3.3 G-四链体等温扩增检测体系Hemin浓度优化 | 第37-38页 |
2.2.3.4 G-四链体等温扩增检测体系酶体系优化 | 第38-40页 |
2.2.3.5 G-四链体等温扩增检测体系反应时间优化 | 第40-41页 |
2.2.3.6 G-四链体等温扩增检测体系G-四链体类型优化 | 第41-43页 |
2.3 本章小结 | 第43-44页 |
第三章 G-四链体级联信号扩增可视化检测转基因植物方法研究 | 第44-55页 |
3.1 材料与分析 | 第44-49页 |
3.1.1 材料 | 第44-45页 |
3.1.2 试剂 | 第45-46页 |
3.1.3 方法 | 第46-49页 |
3.1.3.1 样品基因组DNA的提取 | 第46-47页 |
3.2.1.2 引物设计 | 第47页 |
3.1.3.2 G-四链体级联信号扩增检测体系 | 第47-48页 |
3.1.3.3 G-四链体级联信号扩增检测cry1Ab/cry1Ac基因灵敏度 | 第48页 |
3.1.3.4 G-四链体级联信号扩增检测cry1Ab/cry1Ac基因特异性 | 第48-49页 |
3.2 结果与分析 | 第49-54页 |
3.2.1 引物浓度的优化 | 第49-50页 |
3.2.2 G-四链体类型的影响 | 第50页 |
3.2.3 G-四链体级联信号扩增检测cry1Ab/cry1Ac基因方法的建立 | 第50-52页 |
3.2.4 G-四链体级联信号扩增检测cry1Ab/cry1Ac基因灵敏度分析 | 第52-53页 |
3.2.5 G-四链体级联信号扩增检测cry1Ab/cry1Ac基因的特异性 | 第53-54页 |
3.3 本章小结 | 第54-55页 |
第四章 G-四链体级联信号扩增可视化检测方法的通用性研究 | 第55-65页 |
4.1 材料与方法 | 第55-59页 |
4.1.1 材料 | 第55页 |
4.1.2 仪器 | 第55-56页 |
4.1.3 试剂 | 第56页 |
4.1.4 方法 | 第56-59页 |
4.1.4.1 样品基因组总DNA提取 | 第56页 |
4.1.4.2 引物设计 | 第56页 |
4.1.4.3 不同酶体系的G-四链体级联信号扩增检测体系 | 第56-58页 |
4.1.4.4 不同酶体系的G-四链体级联信号扩增检测系统灵敏度 | 第58页 |
4.1.4.5 不同酶体系的G-四链体联用检测系统特异性 | 第58-59页 |
4.2 结果与分析 | 第59-64页 |
4.2.1 引物浓度优化 | 第59-60页 |
4.2.2 不同酶体系的G-四链体级联信号扩增检测系统的建立 | 第60-61页 |
4.2.3 不同酶的G-四链体级联信号扩增检测体系灵敏度分析 | 第61-63页 |
4.2.4 不同酶的G-四链体级联信号扩增检测体系特异性分析 | 第63-64页 |
4.3 本章小结 | 第64-65页 |
总结与展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第72-73页 |